研究目的目前,同種器官移植已在臨床廣泛開展,對(duì)治療器官衰竭、血液疾病以及惡性腫瘤發(fā)揮了不可替代的作用。然而發(fā)生于移植術(shù)后數(shù)周或數(shù)月的急性排斥反應(yīng)（AR, Acute rejection）仍是導(dǎo)致治療失敗的主要因素。移植術(shù)后常規(guī)使用的免疫抑制性藥物嚴(yán)重降低了患者機(jī)體的免疫功能,導(dǎo)致了感染、肝腎損傷,影響了移植受者的預(yù)后。為解決這一難題,研究者們利用多種細(xì)胞和生物因子及制劑,通過(guò)不同途徑誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生特異性的免疫耐受以克服非特異性的免疫抑制劑的嚴(yán)重毒副作用。目前移植免疫耐受研究的熱點(diǎn)之一是擴(kuò)增調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Regulatory T cell, Treg）或增強(qiáng)其功能。既往研究表明,Treg細(xì)胞是參與維持外周耐受的重要細(xì)胞,應(yīng)用Treg細(xì)胞誘導(dǎo)免疫耐受具有多種優(yōu)勢(shì),因而有可能被發(fā)展為誘導(dǎo)移植免疫耐受和治療器官移植排斥的重要工具細(xì)胞。目前體外擴(kuò)增的Treg進(jìn)行細(xì)胞治療方案的應(yīng)用受到很多因素制約,而應(yīng)用藥物擴(kuò)增受體機(jī)體內(nèi)的Treg細(xì)胞比例或者增強(qiáng)Treg細(xì)胞抑制能力的方案具有更好的應(yīng)用前景。人體內(nèi)的Treg細(xì)胞主要存在于CD4+CD25hi（高表達(dá)）細(xì)胞亞群中,約占外周血CD4+T細(xì)胞的1%～2%... 

【文章來(lái)源】：山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：154 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
目錄
CONTENTS
中文摘要
ABSTRACT
符號(hào)說(shuō)明
序言
第一部分 rFliC對(duì)小鼠同種皮膚移植物的影響及與TLR5表達(dá)的相關(guān)性
    前言
    材料和方法
        一、實(shí)驗(yàn)材料
        二、實(shí)驗(yàn)儀器
        三、實(shí)驗(yàn)方法
            1. 小鼠同種皮膚移植模型的構(gòu)建
            2. 基因重組鞭毛蛋白(rFliC)的制備
            3. SDS-PAGE鑒定提取純化的rFliC
            4. Western blot鑒定提取純化的rFliC
            5. 移植物病理(HE)染色
            6. 移植物免疫組化(IHC)染色
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        一、成功構(gòu)建小鼠同種皮膚移植模型
        二、成功制備高純度rFliC
        三、rFliC對(duì)小鼠同種皮膚移植物生存的影響
            1. rFliC對(duì)同種皮膚移植物生存期的影響
            2. rFliC對(duì)同種皮膚移植物組織病理變化的影響
        四、rFliC體內(nèi)處理對(duì)同種皮膚移植物TLR5表達(dá)的影響
    討論
第二部分 rFliC對(duì)小鼠同種移植受體Treg細(xì)胞的影響
    前言
    材料和方法
        一、實(shí)驗(yàn)材料
        二、實(shí)驗(yàn)儀器
        三、實(shí)驗(yàn)方法
            1. 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)同種移植受體CD4~+CD25~+Foxp3~+細(xì)胞比例
            2. 免疫組化染色觀察移植受體脾細(xì)胞Foxp3表達(dá)情況
            3. qRT-PCR檢測(cè)同種移植受體Treg相關(guān)分子表達(dá)
            4. Western blot檢測(cè)移植受體Treg相關(guān)分子表達(dá)
            5. 移植受體Treg細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)
            6. 移植受體Treg細(xì)胞抑制功能實(shí)驗(yàn)
            7. 制備同種抗原
            8. 半定量RT-PCR檢測(cè)同種抗原刺激的Treg細(xì)胞分子表達(dá)
            9. Western blot檢測(cè)同種抗原刺激的Treg細(xì)胞分子表達(dá)
            10. 同種抗原刺激的Treg細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)
            11. 同種抗原刺激的Treg細(xì)胞抑制功能實(shí)驗(yàn)
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        一、rFliC對(duì)同種移植受體CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg細(xì)胞的影響
            1. rFliC對(duì)移植受體CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg細(xì)胞比例的影響
            2. rFliC對(duì)移植受體Treg細(xì)胞Foxp3表達(dá)的影響
        二、rFliC對(duì)移植受體Treg細(xì)胞相關(guān)分子表達(dá)的影響
        三、rFliC對(duì)移植受體Treg細(xì)胞功能的影響
            1. rFliC對(duì)移植受體Treg細(xì)胞增殖的影響
            2. rFliC對(duì)移植受體Treg細(xì)胞抑制功能的影響
        四、rFliC體外處理對(duì)同種抗原刺激的Treg細(xì)胞分子表達(dá)的影響
        五、rFliC體外處理對(duì)同種抗原刺激的Treg細(xì)胞活性的影響
            1. rFliC對(duì)同種抗原刺激的Treg細(xì)胞增殖的影響
            2. rFliC對(duì)同種抗原刺激的Treg細(xì)胞抑制功能的影響
    討論
第三部分 rFliC對(duì)同種抗原激活的Treg細(xì)胞Foxp3表達(dá)影響的分子機(jī)理與調(diào)控
    前言
    材料和方法
        一、實(shí)驗(yàn)材料
        二、實(shí)驗(yàn)儀器
        三、實(shí)驗(yàn)方法
            1. 檢測(cè)rFliC對(duì)Treg細(xì)胞JNK、p38 MAPK信號(hào)的活化情況
            2. 檢測(cè)rFliC活化Treg細(xì)胞JNK/p38 MAPK信號(hào)與Foxp3表達(dá)的相關(guān)性
            3. 檢測(cè)rFliC對(duì)Treg細(xì)胞PI3K-Akt信號(hào)活化情況
            4. 檢測(cè)Treg細(xì)胞中rFliC激活的PI3K-Akt信號(hào)對(duì)p38 MAPK活化的影響
            5. 檢測(cè)rFliC激活的PI3K-Akt信號(hào)與Foxp3表達(dá)的相關(guān)性
            6. 檢測(cè)rFliC激活的PI3K-Akt/p38 MAPK信號(hào)與Foxp3表達(dá)的相關(guān)性
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        一、rFliC對(duì)同種抗原刺激Treg細(xì)胞JNK/p38 MAPK信號(hào)的影響
        二、rFliC上調(diào)同種抗原刺激Treg細(xì)胞的Foxp3表達(dá)與p38活化相關(guān)
        三、rFliC對(duì)同種抗原刺激Treg細(xì)胞PI3K-Akt信號(hào)的影響
        四、rFliC-同種抗原刺激Treg細(xì)胞PI3K信號(hào)對(duì)p38 MAPK信號(hào)活化的影響
        五、PI3K對(duì)rFliC-同種抗原激活Treg細(xì)胞的p38-Foxp3通路的影響
    討論
全文小結(jié)
論文創(chuàng)新點(diǎn)
附圖表
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄
攻讀學(xué)位期間參與科研項(xiàng)目情況
攻讀學(xué)位期間獲獎(jiǎng)勵(lì)情況
已發(fā)表SCI論文
待發(fā)表SCI論文
學(xué)位論文評(píng)閱及答辯情況表


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Total body irradiation of donors can alter the course of tolerance and induce acute rejection in a spontaneous tolerance rat liver transplantation model[J]. ZHANG YeWei 1, ZHAO HeWei 1 , BO Lin 2 , YANG YinXue 3 , LU Xiang 4 , SUN JingFeng 1 , WEN JianFei 1 , HE Xia 5 & YIN GuoWen 6 1 Department of Hepatobiliary and Pancreatic Surgery, Affiliated Jiangsu Cancer Hospital of Nanjing Medical University, Nanjing 210009, China; 2 Department of Rheumatism and Immunology, Affiliated No. 2 Hospital of Suzhou University, Suzhou 215000, China; 3 Department of General Surgery, Affiliated Hospital of Ningxia Medical University, Yinchuan 750004, China; 4 Department of Geriatrics, The Second Affiliated Hospital of Nanjing Medical University, Nanjing 210011, China; 5 Department of Radiotherapy, Affiliated Jiangsu Cancer Hospital of Nanjing Medical University, Nanjing 210009, China; 6 Department of Interventional, Affiliated Jiangsu Cancer Hospital of Nanjing Medical University, Nanjing 210009, China.  Science China（Life Sciences）. 2012(09)



本文編號(hào)：3452314