PKA調節(jié)亞基對煙曲霉自噬的影響
發(fā)布時間:2021-10-19 15:52
目的:煙曲霉(Aspergillus fumigatus,A.fumigatus)是一種常見的通過空氣傳播的條件性致病絲狀真菌,常存在于高溫堆肥和腐爛植物中,對其生存環(huán)境的擾動會釋放大量的分生孢子(conidia),導致免疫能力低下的人易患侵襲性曲霉病(Invasive aspergillosis,IA),甚至危及生命。自噬作為另一種程序性細胞死亡,與凋亡有顯著的區(qū)別!白允尚约毎劳觥痹谛螒B(tài)學上存在突出特點是細胞質產(chǎn)生大量自噬液泡(autophagic vacuolization of the cytoplasm)。自噬在酵母和哺乳動物細胞中廣泛研究,酵母是單細胞生物,哺乳動物是復雜的高級多細胞生物,而絲狀真菌作為低級多細胞模式生物,其自噬研究尚少,但逐漸引起重視。對煙曲霉的自噬研究結果顯示:EDTA可以誘導煙曲霉的自噬,包括液泡的大量形成,產(chǎn)生自噬顆粒;atg1基因敲除使菌絲自噬顆粒消失,在營養(yǎng)缺乏培養(yǎng)基失去菌絲延伸能力;在饑餓狀態(tài),ATG8蛋白在野生菌株液泡中累積,atg1基因敲除使ATG8蛋白不能在液泡中累積。在真核生物中,c AMP信號通路參與多種調節(jié)過程,且已有研究證明這一...
【文章來源】:青島大學山東省
【文章頁數(shù)】:50 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
引言
材料和方法
1 實驗菌株和動物
2 實驗試劑
3 實驗設備及儀器
4 實驗方法
4.1 存活率的檢測
4.2 煙曲霉自噬體的形態(tài)學觀察
4.3 MDC染色法對自噬體進行染色
4.4 Real-timePCR法檢測自噬相關基因的表達
4.5 營養(yǎng)缺乏時,菌絲延伸能力的檢測
4.6 Westernblot法檢測煙曲霉感染的小鼠LC3-Ⅱ蛋白表達水平
5 統(tǒng)計學處理
結果
1 pkaR敲除降低煙曲霉存活率
2 形態(tài)學觀察pkaR敲除對煙曲霉自噬的影響
3 MDC染色觀察pkaR敲除對煙曲霉自噬體的影響
4 pkaR敲除提高煙曲霉Afatg1的mRNA水平
5 pkaR敲除提高煙曲霉Afatg8的mRNA水平
6 pkaR敲除提高煙曲霉Afatg11的mRNA水平
7 pkaR敲除對煙曲霉菌絲延伸能力的影響
8 煙曲霉感染小鼠LC3-Ⅱ蛋白表達水平檢測
討論
結論
參考文獻
綜述
綜述參考文獻
攻讀學位期間的研究成果
縮略詞表
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]青蒿琥酯治療肺煙曲霉感染自噬機制[J]. 戴京京,王丹丹,周武碧,劉敏. 中國微生態(tài)學雜志. 2018(02)
本文編號:3445170
【文章來源】:青島大學山東省
【文章頁數(shù)】:50 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
引言
材料和方法
1 實驗菌株和動物
2 實驗試劑
3 實驗設備及儀器
4 實驗方法
4.1 存活率的檢測
4.2 煙曲霉自噬體的形態(tài)學觀察
4.3 MDC染色法對自噬體進行染色
4.4 Real-timePCR法檢測自噬相關基因的表達
4.5 營養(yǎng)缺乏時,菌絲延伸能力的檢測
4.6 Westernblot法檢測煙曲霉感染的小鼠LC3-Ⅱ蛋白表達水平
5 統(tǒng)計學處理
結果
1 pkaR敲除降低煙曲霉存活率
2 形態(tài)學觀察pkaR敲除對煙曲霉自噬的影響
3 MDC染色觀察pkaR敲除對煙曲霉自噬體的影響
4 pkaR敲除提高煙曲霉Afatg1的mRNA水平
5 pkaR敲除提高煙曲霉Afatg8的mRNA水平
6 pkaR敲除提高煙曲霉Afatg11的mRNA水平
7 pkaR敲除對煙曲霉菌絲延伸能力的影響
8 煙曲霉感染小鼠LC3-Ⅱ蛋白表達水平檢測
討論
結論
參考文獻
綜述
綜述參考文獻
攻讀學位期間的研究成果
縮略詞表
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]青蒿琥酯治療肺煙曲霉感染自噬機制[J]. 戴京京,王丹丹,周武碧,劉敏. 中國微生態(tài)學雜志. 2018(02)
本文編號:3445170
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