[目的]探索并尋找一種可應(yīng)用于臨床的靶向治療方法,來(lái)抑制移植器官的慢性排斥反應(yīng)。盡管臨床器官移植應(yīng)用的免疫抑制劑已經(jīng)取得了令人注目的進(jìn)展,但仍不能逆轉(zhuǎn)慢性排斥反應(yīng),而這恰恰是移植器官長(zhǎng)期存活的關(guān)鍵。因此,目前移植領(lǐng)域相關(guān)研究的一個(gè)重要目標(biāo)就是阻斷慢性排斥,同時(shí)避免全身免疫抑制的副作用。本實(shí)驗(yàn)室建立了大鼠腹腔異位心臟移植模型來(lái)研究慢性排斥反應(yīng)阻斷機(jī)制,發(fā)現(xiàn)阻斷慢性排斥是T細(xì)胞浸潤(rùn)受到顯著抑制,而T細(xì)胞浸潤(rùn)是細(xì)胞骨架肌動(dòng)蛋白推動(dòng)T細(xì)胞向移植物內(nèi)遷移的過(guò)程[1-9]。我們最近的研究顯示阻斷慢性排斥反應(yīng)需要在移植術(shù)后早期（1-7天）實(shí)施阻斷,其導(dǎo)致了細(xì)胞骨架肌動(dòng)蛋白結(jié)構(gòu)發(fā)生了顯著變化,而參與構(gòu)建肌動(dòng)蛋白和抗原遞呈細(xì)胞的囊泡運(yùn)輸?shù)腞ho-GTP酶通路的分子下調(diào)。這些發(fā)現(xiàn)說(shuō)明阻斷慢性排斥反應(yīng)需要通過(guò)干擾Rho-GTP酶信號(hào)通路來(lái)破壞T細(xì)胞的細(xì)胞骨架肌動(dòng)蛋白的完整性和抗原遞呈通路來(lái)實(shí)現(xiàn),而這一研究將開(kāi)創(chuàng)以Rho-GTP酶信號(hào)通路為靶向的免疫抑制治療的新方向。近期的研究顯示哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶標(biāo)（mammalian target of rapamycin,mTOR）激酶復(fù)合體1和2（雷帕霉素敏感的復(fù)合體... 

【文章來(lái)源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：107 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語(yǔ)/符號(hào)說(shuō)明
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、動(dòng)物試驗(yàn)—大鼠異位腹腔心臟移植模型的建立
    1.1 材料和方法
        1.1.1 主要儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)材料
        1.1.2 試驗(yàn)動(dòng)物
        1.1.3 動(dòng)物模型建立
            1.1.3.1 動(dòng)物分組
            1.1.3.2 異位心臟移植手術(shù)
            1.1.3.3 術(shù)后觀察及處理
            1.1.3.4 受體臟器切取
    1.2 結(jié)果
    1.3 討論
        1.3.1 手術(shù)方法
        1.3.2 麻醉方法的選擇
        1.3.3 控制冷熱缺血時(shí)間
        1.3.4 減少出血
        1.3.5 術(shù)后處理
        1.3.6 影響手術(shù)成敗的因素
        1.3.7 術(shù)后大體形態(tài)和鏡下病理變化
    1.4 結(jié)論
二、mTOR復(fù)合體C1與C2及下游RAC1與免疫耐受的關(guān)系
    2.1 材料與方法
        2.1.1 試驗(yàn)器材與試劑
        2.1.2 試劑配制
        2.1.3 試驗(yàn)技術(shù)及操作過(guò)程
            2.1.3.1 從脾中提取T細(xì)胞并從T細(xì)胞提取蛋白
            2.1.3.2 樣品蛋白濃度測(cè)定
            2.1.3.3 Western Blot
            2.1.3.4 Reblot
            2.1.3.5 免疫染色及免疫雙染色
        2.1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 Western Blot
        2.2.2 Western Blot數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)
            2.2.2.1 mTOR表達(dá)
            2.2.2.2 RAPTOR表達(dá)
            2.2.2.3 PRAS40表達(dá)
            2.2.2.4 GBL表達(dá)
            2.2.2.5 DEPTOR的表達(dá)
            2.2.2.6 SIN的表達(dá)
            2.2.2.7 RICTOR的表達(dá)
            2.2.2.8 RAC 1的表達(dá)
        2.2.3 免疫染色及免疫雙染色
            2.2.3.1 mTOR與ER免疫共染色結(jié)果
            2.2.3.2 mTOR與高爾基體免疫共染色結(jié)果
            2.2.3.3 RAC1與mTOR免疫共染色結(jié)果
    2.3 討論
        2.3.1 Mtor
        2.3.2 mTOR復(fù)合物
        2.3.3 mTOR信號(hào)通路
        2.3.4 mTOR下游
        2.3.5 mTOR信號(hào)通路在細(xì)胞中重新分布
    2.4 結(jié)論
三、Y-27632抑制大鼠心臟移植慢性排斥反應(yīng)
    3.1 材料和方法
        3.1.1 主要儀器設(shè)備及試驗(yàn)材料
        3.1.2 試驗(yàn)動(dòng)物
        3.1.3 動(dòng)物模型建立
            3.1.3.1 動(dòng)物分組
            3.1.3.2 異位心臟移植手術(shù)
            3.1.3.3 術(shù)后觀察及處理
            3.1.3.4 受體臟器切取
        3.1.4 標(biāo)本
        3.1.5 統(tǒng)計(jì)分析
    3.2. 結(jié)果
        3.2.1 HE染色
        3.2.2 VVG/Trichrome染色
    3.3 討論
    3.4 小結(jié)
全文結(jié)論
論文創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明
綜述(一)
    參考文獻(xiàn)
綜述(二)
    參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]兩種大鼠心臟移植模型的制作比較[J]. 王曉亮,彭志海.  實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué). 2008(06)
[2]大鼠異位心臟移植模型的術(shù)式探討[J]. 馬毅,陳細(xì)桃,朱曉峰,何曉順,陳規(guī)劃.  中華實(shí)驗(yàn)外科雜志. 2005(10)
[3]大鼠異位心臟移植動(dòng)物模型制作的外科技巧[J]. 高旭輝,王昊飛,王武軍,鄒小明.  實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志. 2004(05)



本文編號(hào)：3429692