流感病毒A/PR/8/34重配母本株高免疫原性HA蛋白制備及鑒定
發(fā)布時間:2021-10-01 06:05
制備流感病毒經(jīng)典重配過程中所需的A/PR/8/34母本株血凝素蛋白(Hemagglutinin,HA)抗血清。A/PR/8/34流感病毒滅活純化后經(jīng)菠蘿蛋白酶消化。5%20%蔗糖連續(xù)密度梯度離心法純化HA蛋白。單向免疫擴(kuò)散法(Single Radial Immunodiffusion,SRID)篩選目的蛋白。SDS-PAGE法鑒定目的蛋白。純化的A/PR/8/34 HA蛋白免疫兔子制備抗血清,血凝抑制試驗(Hemoglutination Inhibition Assay,HI)測定HA抗血清效價,經(jīng)SRID法鑒定HA抗血清純度。成功制備了高免疫原性A/PR/8/34HA蛋白;兔抗血清HI滴度可達(dá)10240,SRID法鑒定為高純度HA抗血清。制備了流感病毒經(jīng)典重配中關(guān)鍵試劑,摸索成功整套技術(shù)方法,為我國自主研發(fā)季節(jié)性流感疫苗株奠定了基礎(chǔ)。
【文章來源】:病毒學(xué)報. 2016,32(02)北大核心CSCD
【文章頁數(shù)】:4 頁
【文章目錄】:
材料與方法
1主要試劑、儀器和實驗動物
2病毒及抗血清
3病毒制備
4鑒定用全病毒抗血清最佳檢測濃度的確定
5 HA蛋白的制備和鑒定
6 HA蛋白抗血清制備
7 HA蛋白抗血清HI法測定
8 HA蛋白抗血清SRID法測定
結(jié)果
1鑒定用全病毒抗血清最佳檢測濃度確定
2 HA蛋白的制備
3 HA蛋白的鑒定
3.1 SRID法鑒定
3.2 SDS-PAGE法鑒定
4 HA蛋白抗血清HI法測定
5 HA蛋白抗血清SRID法鑒定
討論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]季節(jié)性流感疫苗株制備技術(shù)平臺的建立[J]. 辛麗,魯健,陳永坤,唐靜,郭俊峰,王大燕,舒躍龍. 中華實驗和臨床病毒學(xué)雜志. 2015 (02)
本文編號:3417292
【文章來源】:病毒學(xué)報. 2016,32(02)北大核心CSCD
【文章頁數(shù)】:4 頁
【文章目錄】:
材料與方法
1主要試劑、儀器和實驗動物
2病毒及抗血清
3病毒制備
4鑒定用全病毒抗血清最佳檢測濃度的確定
5 HA蛋白的制備和鑒定
6 HA蛋白抗血清制備
7 HA蛋白抗血清HI法測定
8 HA蛋白抗血清SRID法測定
結(jié)果
1鑒定用全病毒抗血清最佳檢測濃度確定
2 HA蛋白的制備
3 HA蛋白的鑒定
3.1 SRID法鑒定
3.2 SDS-PAGE法鑒定
4 HA蛋白抗血清HI法測定
5 HA蛋白抗血清SRID法鑒定
討論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]季節(jié)性流感疫苗株制備技術(shù)平臺的建立[J]. 辛麗,魯健,陳永坤,唐靜,郭俊峰,王大燕,舒躍龍. 中華實驗和臨床病毒學(xué)雜志. 2015 (02)
本文編號:3417292
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