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流感病毒A/PR/8/34重配母本株高免疫原性HA蛋白制備及鑒定

發(fā)布時間:2021-10-01 06:05
  制備流感病毒經典重配過程中所需的A/PR/8/34母本株血凝素蛋白(Hemagglutinin,HA)抗血清。A/PR/8/34流感病毒滅活純化后經菠蘿蛋白酶消化。5%20%蔗糖連續(xù)密度梯度離心法純化HA蛋白。單向免疫擴散法(Single Radial Immunodiffusion,SRID)篩選目的蛋白。SDS-PAGE法鑒定目的蛋白。純化的A/PR/8/34 HA蛋白免疫兔子制備抗血清,血凝抑制試驗(Hemoglutination Inhibition Assay,HI)測定HA抗血清效價,經SRID法鑒定HA抗血清純度。成功制備了高免疫原性A/PR/8/34HA蛋白;兔抗血清HI滴度可達10240,SRID法鑒定為高純度HA抗血清。制備了流感病毒經典重配中關鍵試劑,摸索成功整套技術方法,為我國自主研發(fā)季節(jié)性流感疫苗株奠定了基礎。 

【文章來源】:病毒學報. 2016,32(02)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】:4 頁

【文章目錄】:
材料與方法
    1主要試劑、儀器和實驗動物
    2病毒及抗血清
    3病毒制備
    4鑒定用全病毒抗血清最佳檢測濃度的確定
    5 HA蛋白的制備和鑒定
    6 HA蛋白抗血清制備
    7 HA蛋白抗血清HI法測定
    8 HA蛋白抗血清SRID法測定
結果
    1鑒定用全病毒抗血清最佳檢測濃度確定
    2 HA蛋白的制備
    3 HA蛋白的鑒定
        3.1 SRID法鑒定
        3.2 SDS-PAGE法鑒定
    4 HA蛋白抗血清HI法測定
    5 HA蛋白抗血清SRID法鑒定
討論


【參考文獻】:
期刊論文
[1]季節(jié)性流感疫苗株制備技術平臺的建立[J]. 辛麗,魯健,陳永坤,唐靜,郭俊峰,王大燕,舒躍龍.  中華實驗和臨床病毒學雜志. 2015 (02)



本文編號:3417292

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