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骨形態(tài)發(fā)生蛋白2/7異二聚體對(duì)人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化的促進(jìn)作用

發(fā)布時(shí)間:2021-09-25 13:13
  目的:探討新型成骨誘導(dǎo)生長(zhǎng)因子骨形態(tài)發(fā)生蛋白2/7異二聚體(bone morphogenetic protein 2/7heterodimer,BMP-2/7)在誘導(dǎo)人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(human adipose-derived stem cells,h ASCs)成骨分化中的作用。方法:體外培養(yǎng)h ASCs,以成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基(osteogenic medium,OM)中添加150μg/L BMP-2/7為實(shí)驗(yàn)組,以單純OM為陽(yáng)性對(duì)照組(OM組),以常規(guī)增殖培養(yǎng)基(proliferation medium,PM)為陰性對(duì)照組(PM組)。體外誘導(dǎo)的第1、4和7天檢測(cè)細(xì)胞DNA含量,第7和14天進(jìn)行堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色及定量檢測(cè),第21和28天進(jìn)行茜素紅染色及定量檢測(cè),第1、4、7和14天分別進(jìn)行成骨相關(guān)基因的檢測(cè)。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)使用6只裸鼠,于其背部正中做皮膚切口,向兩側(cè)分離出4個(gè)皮下植入腔,分別植入:(1)單純?chǔ)?磷酸三鈣(β-tricalcium phosphate,β-TCP)支架(支架對(duì)照組);(2)β-TCP支架+h ASCs(體外PM培... 

【文章來(lái)源】:北京大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2016,48(01)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】:8 頁(yè)

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1. 1 細(xì)胞
    1. 2 主要試劑
    1. 3 h ASCs體外成骨誘導(dǎo)及相關(guān)檢測(cè)
        1.3.1細(xì)胞DNA含量測(cè)定
        1.3.2 ALP染色
        1.3.3 ALP活性定量分析
        1.3.4茜素紅礦化結(jié)節(jié)染色及定量
        1.3.5實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)成骨相關(guān)基因的表達(dá)
    1. 4動(dòng)物體內(nèi)植入實(shí)驗(yàn)
    1. 5 標(biāo)本制取、組織學(xué)切片
    1. 6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2. 1 細(xì)胞DNA含量測(cè)定
    2. 2 ALP染色
    2. 3 ALP活性定量分析
    2. 4 茜素紅礦化結(jié)節(jié)染色及定量
    2. 5 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)成骨分化相關(guān)基因的表達(dá)
    2. 6 組織學(xué)切片染色結(jié)果
3 討論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]應(yīng)用游離腓骨復(fù)合組織瓣行功能性重建上頜骨缺損[J]. 彭歆,毛馳,俞光巖,郭傳瑸,黃敏嫻,張益,馬蓮,鄧旭亮,林野,馬大權(quán),孟兆強(qiáng),張雷.  北京大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2011(01)
[2]牙周維護(hù)治療在保持牙周長(zhǎng)期療效中的作用[J]. 張勇,欒慶先.  北京大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2011(01)



本文編號(hào):3409804

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