目的比較3型肺炎鏈球菌莢膜多糖不同基團活化對多糖抗原性及結(jié)合物免疫原性的影響。方法分別采用1-氰基-4-二甲氨基-吡啶四氟硼酸（1-cyano-4-dimethylaminopyridinium tetrafluoroborate, CDAP）活化多糖羥基,碳二亞胺（1-（3-dimethylaminopropyl）-3-ethylcarbodiimide hydrochloride, EDC）活化多糖羧基,再與己二酰肼（adipic dihydrazide, ADH）偶聯(lián)獲得活化度相近的多糖衍生物。用三硝基苯磺酸方法（trinitrobenzene sulfonic acid, TNBS）測定多糖活化度;高效液相分子排阻與多角度激光散射儀聯(lián)用（HPLC-SEC-MALLS）分析衍生物分子分布和大小;Zeta電位儀與滴定儀聯(lián)用分析其表面電荷變化;速率比濁法和免疫雙擴散法比較其抗原性變化;利用多糖衍生物與載體蛋白偶聯(lián)獲得的不同結(jié)合物免疫小鼠,間接ELISA分析不同結(jié)合物免疫后的IgG抗體濃度,進一步闡述活化過程中多糖抗原性的變化對結(jié)合物免疫原性的影響。結(jié)果 TNBS結(jié)果顯示,獲得同一基團... 

【文章來源】：微生物學(xué)免疫學(xué)進展. 2020,48(01)

【文章頁數(shù)】：9 頁

【部分圖文】：

3型多糖重復(fù)單位結(jié)構(gòu)

表2 不同碳二亞胺比例對多糖羧基活化度的影響實驗結(jié)果Tab.2 The effect to derivatives from carboxyl group activated with different degree of EDC 編號 碳二亞胺/(mmol/L) 活化度/% Mw/(g/mol) (質(zhì)量比) (摩爾比) 3-COO-AH-1 5 5.91 10 0.87×105 3-COO-AH-2 10 9.26 16 1.08×105 3-COO-AH-3 20 13.30 23 1.33×105 3-COO-AH-4 50 20.93 36 4.51×1052.3 多糖及衍化物等電點分析

表4 不同基團活化度對多糖抗原性的影響實驗結(jié)果Tab.4 The effect to antigenicity for derivatives from activated chemical groups activated with different degree 編號 活化度/% 多糖質(zhì)量濃度A/(μg/mL) 多糖質(zhì)量濃度B/(μg/mL) 多糖單位抗原值(B/A) 參考多糖 0.00 1 000.00 1 000.00 1.00 3-CN-AH-1 7.49 275.84 236.00 0.86 3-CN-AH-2 11.42 263.71 220.50 0.84 3-CN-AH-3 21.66 239.83 205.60 0.86 3-CN-AH-4 32.38 251.17 209.20 0.83 3-COO-AH-1 5.91 429.05 437.50 1.02 3-COO-AH-2 9.26 424.36 362.60 0.85 3-COO-AH-3 13.30 438.49 327.60 0.75 3-COO-AH-4 20.93 451.13 183.75 0.41 注:已知硫酸-蒽酮法計算得到的是多糖化學(xué)濃度,在此以多糖質(zhì)量濃度A表示;而速率比濁法檢測得到的是多糖免疫學(xué)濃度,在此以多糖質(zhì)量濃度B表示。硫酸-蒽酮法標(biāo)準(zhǔn)曲線R2=0.998;速率比濁法標(biāo)準(zhǔn)曲線R2=0.996。2.5 結(jié)合物制備及免疫原性檢測

【參考文獻】：
期刊論文
[1]中國內(nèi)地兒童侵襲型肺炎鏈球菌感染血清型的分布特征[J]. 蘇楠,韓星,楊懌墨,林江濤.  中華醫(yī)學(xué)雜志. 2016 (18)
[2]2010—2011年中國肺炎鏈球菌耐藥性和血清型研究[J]. 王啟,張菲菲,趙春江,陳宏斌,王占偉,郭宇,李荷楠,王輝.  中華結(jié)核和呼吸雜志. 2013 (02)



本文編號：3374812