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血竭醇提物對大鼠穿支皮瓣模型存活及PI3K/Akt/eNOS通路的影響

發(fā)布時間:2021-08-28 04:38
  目的:研究血竭醇提物對大鼠穿支皮瓣模型存活及PI3K/Akt/eNOS通路的影響。方法:采用只保留穿支血管切斷其他血管的方法復(fù)制大鼠穿支皮瓣模型,造模成功后,將大鼠分為模型組(外敷,生理鹽水)和血竭醇提取物(EESD,血竭素含量為75.08mg/g)組(外敷,0.21 g/cm2),每組10只,連續(xù)敷藥7 d,每天1次。敷藥7 d后測定各組大鼠穿支皮瓣存活率、皮瓣微血管密度。將人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVEC)缺氧缺糖16 h后復(fù)氧復(fù)糖復(fù)制HUVEC缺氧缺糖/復(fù)氧復(fù)糖細胞模型,造模成功后,將細胞分為正常組、模型組和血竭素高、中、低濃度組(2.5、1.0、0.5μg/m L),于復(fù)氧復(fù)糖培養(yǎng)24 h后,采用顯微鏡觀察各組細胞的形態(tài),采用MTT法和比色法分別測定各組細胞的活性和細胞中一氧化氮(NO)的含量,采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)和Western blot法檢測絲氨酸/蘇氨酸激酶(Akt)、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA的表達水平,PI3K蛋白的表達以及Akt、eNOS蛋白的磷酸化程度。結(jié)果:在大鼠實驗中,與模型... 

【文章來源】:中國藥房. 2019,30(23)北大核心

【文章頁數(shù)】:6 頁

【部分圖文】:

血竭醇提物對大鼠穿支皮瓣模型存活及PI3K/Akt/eNOS通路的影響


各組大鼠穿支皮瓣的病理學(xué)觀察圖(HE染色,×200)

細胞,蛋白


與正常組比較,模型組HUVEC細胞中PI3K、Akt、e NOS mRNA的表達水平顯著降低(P<0.05);與模型組比較,血竭素高、中、低濃度組HUVEC細胞中PI3K、Akt、e NOS mRNA的表達水平均顯著升高(P<0.05)。各組HUVEC細胞中PI3K、Akt、eNOS mRNA的表達水平檢測結(jié)果見圖2。3.2.4 各組HUVEC細胞中PI3K、Akt、eNOS、p-Akt、p-eNOS蛋白表達結(jié)果

電泳圖,蛋白,電泳圖,細胞


與正常組比較,模型組HUVEC細胞中PI3K蛋白的表達以及Akt、eNOS蛋白的磷酸化程度均顯著降低(P<0.05);與模型組比較,血竭素高、中、低濃度組HUVEC細胞PI3K蛋白的表達以及Akt、eNOS蛋白的磷酸化程度均顯著升高(P<0.05)。各組HUVEC細胞中PI3K、Akt、eNOS、p-Akt、p-eNOS蛋白表達的電泳圖見圖3,定量分析結(jié)果見圖4。4 討論


本文編號:3367808

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