目的:探究肺炎鏈球菌減毒活菌疫苗SPY1誘導(dǎo)特異性Treg細(xì)胞的產(chǎn)生機(jī)制及Treg細(xì)胞參與疫苗保護(hù)性免疫的效應(yīng)機(jī)制。背景:疫苗的有效性主要取決于其免疫保護(hù)機(jī)制,因此,闡明疫苗的保護(hù)機(jī)制是新型疫苗研發(fā)的關(guān)鍵部分。SPY1是本課題組前期研發(fā)的一株肺炎鏈球菌減毒活菌疫苗,該疫苗毒力顯著降低,遺傳穩(wěn)定性高,安全性好,保護(hù)效果優(yōu)于現(xiàn)有的商品化多糖疫苗。在之前的研究中,我們發(fā)現(xiàn)SPY1可誘導(dǎo)產(chǎn)生保護(hù)性的特異性Treg免疫反應(yīng),然而,其潛在機(jī)制并不清楚。TGF-β是Treg細(xì)胞分化的關(guān)鍵細(xì)胞因子,我們前期使用TGF-β1活性抑制物多肽P17處理SPY1免疫小鼠,疫苗的保護(hù)效果明顯降低,表明SPY1誘導(dǎo)的TGF-β1對(duì)獲得性免疫中保護(hù)性Treg細(xì)胞免疫應(yīng)答的重要性。由此我們提出疑問:TGF-β1是通過何種信號(hào)通路誘導(dǎo)了SPY1特異性Treg細(xì)胞的分化?SPY1特異性Treg細(xì)胞又是通過何種方式參與了疫苗對(duì)小鼠的保護(hù)性免疫?本研究擬進(jìn)一步探索SPY1免疫誘導(dǎo)特異性Treg細(xì)胞的產(chǎn)生及效應(yīng)機(jī)制,為闡明SPY1疫苗的保護(hù)效應(yīng)機(jī)制提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。主要研究方法:1.C57BL/6J小鼠隨機(jī)分為四個(gè)組:未免疫... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

Treg細(xì)胞抑制劑P17消除SPY1對(duì)侵襲性S.pneumoniae感染的保護(hù)Figure1-1Tregcellsdown-regulatoryP17eliminatesSPY1-elicitedprotectionagainstinvasive

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文為了深入探究 P17 處理對(duì) SPY1 誘導(dǎo)的特異性免疫應(yīng)答的影響，末次免疫后第七天分離并培養(yǎng)小鼠脾細(xì)胞，用 70%乙醇滅活 SPY1 刺激，ELISA 檢測(cè)脾細(xì)胞上清中細(xì)胞因子水平。與未免疫組相比，免疫組小鼠脾細(xì)胞上清中檢測(cè)到高水平的IL-6、IL-12p70、IFN-γ、IL-4、IL-5 和 IL-17A（圖 1-2A，C-G），這與我們之前的研究結(jié)果一致[8]。同時(shí)，IL-10 的水平在免疫組小鼠也是明顯升高的（圖 1-2H），這在一定程度上說明了 SPY1 免疫激活了免疫調(diào)控應(yīng)答。另一方面，我們也檢測(cè)了免疫小鼠中免疫平衡的維持，由于 P17 處理下調(diào)了免疫抑制性 Treg 細(xì)胞，導(dǎo)致抑炎細(xì)胞因子 IL-6 水平下調(diào)（圖 1-2A），免疫細(xì)胞因子（IL-12p70、IFN-γ、IL-4、IL-5和 IL-17A）（圖 1-2C-G）和感染相關(guān)炎癥因子（TNF-α）水平進(jìn)一步升高（圖 1-2B）。A B

圖 1-3 S. pneumoniae 感染后各組小鼠肺組織炎癥分析Figure 1-3 Pathological analysis of lung tissues were done by H&E staining. (A) Lungappearances were shown 24 h post 19F infection. (B) Lung tissues were isolated at 6 h, 12 h and 24h post 19F challenged, pathological analysis was done by H&E staining, sections were examinedunder light microscopy at 200 , 400 magnification. (C) Score of peribronchial inflammation wasmeasured.


本文編號(hào)：3354193