鸚鵡熱衣原體MOMP、MIP重組核酸菌影疫苗的免疫保護(hù)作用
發(fā)布時(shí)間：2021-08-14 10:14
目的:構(gòu)建鸚鵡熱衣原體（Cps）MOMP和MIP蛋白的重組核酸菌影疫苗,分析其免疫活性及抗Cps感染作用,為Cps疫苗的研制提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:構(gòu)建p ET 30a-MOMP原核表達(dá)載體,誘導(dǎo)表達(dá)并純化重組MOMP蛋白。構(gòu)建pc DNA3.1（+）-MOMP和pc DNA3.1（+）-MIP真核重組質(zhì)粒,氯化鈣法分別將其裝載入化學(xué)滲透壓裂解法制備的E.coli JM109空菌影（BG）中,制備重組核酸菌影pc DNA3.1（+）-MOMP BG和pc DNA3.1（+）-MIP BG;并鑒定其在鼠源性巨噬細(xì)胞RAW 264.7中的表達(dá)。設(shè)立PBS和空BG對(duì)照組、pc DNA3.1（+）-MOMP、pc DNA3.1（+）-MIP、pc DNA3.1（+）-MOMP BG、pc DNA3.1（+）-MIP BG、pc DNA3.1（+）-MOMP/MIP BG聯(lián)合免疫和pc DNA3.1（+）-MOMP/MIP BG聯(lián)合免疫蛋白加免（Heterologous boost,He;即免疫3次后最后一次免疫用重組蛋白加免）實(shí)驗(yàn)組,以后腿肌注免疫途徑免疫BALB/c鼠,共免疫四次。末次免疫1 w...
【文章來(lái)源】：南華大學(xué)湖南省
【文章頁(yè)數(shù)】：97 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
MOMPPCR產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果分析
圖 4.2 重組 pET 30a-MOMP 菌液 PCR 瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果分析arose gel electrophoresis analysis of recombinant pET 30a-MOMP PC1: DNA marker; 2～5: PCR products of recombinant MOMP圖 4.3 pET 30a MOMP 重組質(zhì)粒的雙酶切鑒定
圖 4.3 pET 30a MOMP 重組質(zhì)粒的雙酶切鑒定4.3 Double enzyme digestion of recombinant pET 30a-M; 2: recombinant pET 30a-MOMP; 3: recombinant pET 30aby BamH I and Xho I-MOMP 原核表達(dá)克隆載體的誘導(dǎo)表達(dá)m 振蕩搖菌培養(yǎng)，0.2 mM IPTG 誘導(dǎo)表達(dá)，SDKDa 的預(yù)期分子量大小的目的蛋白（圖 4.4）。
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]云南省昆明市動(dòng)物園和寵物市場(chǎng)中鳥(niǎo)類(lèi)鸚鵡熱衣原體的流行病學(xué)調(diào)查及其基因型分布研究（英文）[J]. Yue FENG,Yue-mei FENG,Zhong-hua ZHANG,Shao-xiong WU,Du-bo ZHONG,Chen-jian LIU. Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）. 2016(04)
[2]實(shí)驗(yàn)性自身免疫性神經(jīng)炎中NKR-P1+細(xì)胞對(duì)IL-12和IL-18協(xié)同作用的影響[J]. 李呼倫,閆彬彬,李國(guó)忠,劉希君,王廣友,徐欣,孫博,曹京燕,王丹丹,王曙晨,金連弘. 中國(guó)生物制品學(xué)雜志. 2012(04)
[3]IL-12、IL-18基因?qū)IV-1外膜蛋白基因疫苗誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答的影響[J]. 王福祥,楊寶山,馬英驥,李用國(guó). 中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志. 2006(01)
博士論文
[1]豬流產(chǎn)衣原體Pmp18N-rVCG疫苗的構(gòu)建、小鼠免疫評(píng)價(jià)和機(jī)制研究[D]. 潘青.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
碩士論文
[1]IL-12、IL-18及OPN在HBV相關(guān)性肝臟疾病中的水平及其臨床意義[D]. 金燕.延邊大學(xué) 2014
[2]乙型肝炎肝硬化患者FoxP3 mRNA表達(dá)及血清IL-12、IL-18水平的變化[D]. 李娜.瀘州醫(yī)學(xué)院 2013
[3]應(yīng)用抗菌肽—超高壓制備肺炎克雷伯菌和副豬嗜血桿菌菌影方法的建立[D]. 胡本鋼.吉林大學(xué) 2012
本文編號(hào)：3342280
【文章來(lái)源】：南華大學(xué)湖南省
【文章頁(yè)數(shù)】：97 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【部分圖文】：
MOMPPCR產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果分析
圖 4.2 重組 pET 30a-MOMP 菌液 PCR 瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果分析arose gel electrophoresis analysis of recombinant pET 30a-MOMP PC1: DNA marker; 2～5: PCR products of recombinant MOMP圖 4.3 pET 30a MOMP 重組質(zhì)粒的雙酶切鑒定
圖 4.3 pET 30a MOMP 重組質(zhì)粒的雙酶切鑒定4.3 Double enzyme digestion of recombinant pET 30a-M; 2: recombinant pET 30a-MOMP; 3: recombinant pET 30aby BamH I and Xho I-MOMP 原核表達(dá)克隆載體的誘導(dǎo)表達(dá)m 振蕩搖菌培養(yǎng)，0.2 mM IPTG 誘導(dǎo)表達(dá)，SDKDa 的預(yù)期分子量大小的目的蛋白（圖 4.4）。
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]云南省昆明市動(dòng)物園和寵物市場(chǎng)中鳥(niǎo)類(lèi)鸚鵡熱衣原體的流行病學(xué)調(diào)查及其基因型分布研究（英文）[J]. Yue FENG,Yue-mei FENG,Zhong-hua ZHANG,Shao-xiong WU,Du-bo ZHONG,Chen-jian LIU. Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）. 2016(04)
[2]實(shí)驗(yàn)性自身免疫性神經(jīng)炎中NKR-P1+細(xì)胞對(duì)IL-12和IL-18協(xié)同作用的影響[J]. 李呼倫,閆彬彬,李國(guó)忠,劉希君,王廣友,徐欣,孫博,曹京燕,王丹丹,王曙晨,金連弘. 中國(guó)生物制品學(xué)雜志. 2012(04)
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博士論文
[1]豬流產(chǎn)衣原體Pmp18N-rVCG疫苗的構(gòu)建、小鼠免疫評(píng)價(jià)和機(jī)制研究[D]. 潘青.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
碩士論文
[1]IL-12、IL-18及OPN在HBV相關(guān)性肝臟疾病中的水平及其臨床意義[D]. 金燕.延邊大學(xué) 2014
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[3]應(yīng)用抗菌肽—超高壓制備肺炎克雷伯菌和副豬嗜血桿菌菌影方法的建立[D]. 胡本鋼.吉林大學(xué) 2012
本文編號(hào)：3342280
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