目的:構(gòu)建鸚鵡熱衣原體（Cps）MOMP和MIP蛋白的重組核酸菌影疫苗,分析其免疫活性及抗Cps感染作用,為Cps疫苗的研制提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:構(gòu)建p ET 30a-MOMP原核表達(dá)載體,誘導(dǎo)表達(dá)并純化重組MOMP蛋白。構(gòu)建pc DNA3.1（+）-MOMP和pc DNA3.1（+）-MIP真核重組質(zhì)粒,氯化鈣法分別將其裝載入化學(xué)滲透壓裂解法制備的E.coli JM109空菌影（BG）中,制備重組核酸菌影pc DNA3.1（+）-MOMP BG和pc DNA3.1（+）-MIP BG;并鑒定其在鼠源性巨噬細(xì)胞RAW 264.7中的表達(dá)。設(shè)立PBS和空BG對(duì)照組、pc DNA3.1（+）-MOMP、pc DNA3.1（+）-MIP、pc DNA3.1（+）-MOMP BG、pc DNA3.1（+）-MIP BG、pc DNA3.1（+）-MOMP/MIP BG聯(lián)合免疫和pc DNA3.1（+）-MOMP/MIP BG聯(lián)合免疫蛋白加免（Heterologous boost,He;即免疫3次后最后一次免疫用重組蛋白加免）實(shí)驗(yàn)組,以后腿肌注免疫途徑免疫BALB/c鼠,共免疫四次。末次免疫1 w... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：97 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

MOMPPCR產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果分析

圖 4.2 重組 pET 30a-MOMP 菌液 PCR 瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果分析arose gel electrophoresis analysis of recombinant pET 30a-MOMP PC1: DNA marker; 2～5: PCR products of recombinant MOMP圖 4.3 pET 30a MOMP 重組質(zhì)粒的雙酶切鑒定

圖 4.3 pET 30a MOMP 重組質(zhì)粒的雙酶切鑒定4.3 Double enzyme digestion of recombinant pET 30a-M; 2: recombinant pET 30a-MOMP; 3: recombinant pET 30aby BamH I and Xho I-MOMP 原核表達(dá)克隆載體的誘導(dǎo)表達(dá)m 振蕩搖菌培養(yǎng)，0.2 mM IPTG 誘導(dǎo)表達(dá)，SDKDa 的預(yù)期分子量大小的目的蛋白（圖 4.4）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]云南省昆明市動(dòng)物園和寵物市場中鳥類鸚鵡熱衣原體的流行病學(xué)調(diào)查及其基因型分布研究（英文）[J]. Yue FENG,Yue-mei FENG,Zhong-hua ZHANG,Shao-xiong WU,Du-bo ZHONG,Chen-jian LIU.  Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）. 2016(04)
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博士論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3342280