發(fā)布時(shí)間：2021-08-07 14:26

　　目的探討氯化鋰（Li Cl）激活Wnt/β-catenin信號(hào)通路致小鼠Sca-1+造血干/祖細(xì)胞（Sca-1+HSC/HPC）衰老及其機(jī)制。方法免疫磁珠法分離純化小鼠Sca-1+HSC/HPC。純化后細(xì)胞分為:正常對(duì)照組,常規(guī)培養(yǎng);Li Cl組,正常對(duì)照組基礎(chǔ)上,加入Li Cl（終濃度10mmol/L）;D-半乳糖致衰組,正常對(duì)照組基礎(chǔ)上,加入D-半乳糖（終濃度166mmol/L）,各組培養(yǎng)48h。造血祖細(xì)胞混合集落（CFU-Mix）培養(yǎng)檢測Sca-1+HSC/HPC多向分化潛能,細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒-8（CCK-8）檢測Sca-1+HSC/HPC增殖能力,衰老相關(guān)β-半乳糖苷酶（SA-β-Gal）染色檢測細(xì)胞衰老,免疫細(xì)胞化學(xué)染色和Western blotting檢測細(xì)胞內(nèi)β-catenin、糖原合成激酶3β（GSK-3β）、P53、P21蛋白表達(dá),ELISA檢測細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)8羥基脫氧鳥苷（8-OH-d G）含量。結(jié)果與正常對(duì)照組相比,Li Cl組與D-半乳糖致衰組Sca-1+HSC/HPC增殖能力下降,形成CFU-Mix數(shù)量下降,SA-β-Gal染色陽性細(xì)胞百分率增加,β-catenin... 

【文章來源】：解剖學(xué)報(bào). 2016,47(01)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
材料和方法
    1. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    2. 主要試劑
    3. Sca-1+HSC / HPC分離純化、鑒定
    4. CCK-8 檢測Li Cl對(duì)Sca-1+HSC / HPC增殖能力的影響
    5. 多向造血祖細(xì)胞集落( CFU-Mix) 培養(yǎng)檢測Li Cl對(duì)Sca-1+HSC / HPC分化能力的影響
    6. 衰老相關(guān)-β-半乳糖苷酶染色檢測Li Cl對(duì)Sca-1+HSC / HPC衰老的影響
    7.激光掃描共焦顯微鏡檢測細(xì)胞P53與β-catenin蛋白表達(dá)及定位
    8. Western blotting檢測P53、P21、β-catenin及GSK-3β 蛋白表達(dá)
    9. ELISA檢測上清液中8-OH-d G濃度水平
    10. 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
結(jié)果
    1. Sca-1+HSC / HPC分離純化及鑒定
    2. 不同濃度Li Cl對(duì)Sca-1+HSC / HPC形成CFUMix的影響
    3. Li Cl對(duì)Sca-1+HSC / HPC增殖能力影響
    4. Li Cl對(duì)Sca-1+HSC / HPC的SA-β-Gal染色陽性百分率影響
    5. Li Cl對(duì)Sca-1+HSC / HPC表達(dá)P53 與 β-catenin蛋白及定位的影響
    6. Li Cl對(duì)小鼠Sca-1+HSC / HPC表達(dá)P53、P21、β-catenin、GSK-3β 蛋白的影響
    7.Li Cl對(duì)小鼠Sca-1+HSC/HPC 8-OH-d G水平的影響
討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]免疫磁性活化細(xì)胞分選方法優(yōu)化及純化后細(xì)胞的生物學(xué)特性檢測[J]. 耿珊,張琛,劉俊,劉典鋒,周玥,王亞平.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2012(07)
[2]Wnt/β-catenin信號(hào)通路對(duì)間充質(zhì)干細(xì)胞衰老的影響及其作用機(jī)制[J]. 項(xiàng)曉霞,陳律,王駿浩,張余斌,張大勇.  浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2011(06)



本文編號(hào)：3327962