研究表明生物材料的拓撲結構與細胞多個分化方向有一對多的對應關系。目前對應現(xiàn)象報道散在,也沒有在整個基因轉錄水平系統(tǒng)性地進行機制探究。本研究采用平行和無序兩種不同的拓撲結構材料和小鼠的脂肪干細胞為研究對象,試圖尋找材料的拓撲結構影響干細胞分化的一種新機制。首先通過流式細胞術和三系分化鑒定了實驗所用的小鼠脂肪干細胞具有多向分化的潛能。將細胞培養(yǎng)于材料上,并采用細胞染色和標志基因檢測,發(fā)現(xiàn)平行材料易于誘導脂肪干細胞向肌腱細胞和神經干細胞分化,而無序材料則誘導其向骨、軟骨和脂肪細胞分化。之后為驗證該現(xiàn)象同時尋找可能存在的機制,進行了轉錄組學的測序,結合大數(shù)據(jù)分析,證明了不同拓撲結構誘導脂肪干細胞向不同方向分化。通過單克隆實驗和三系分化檢測發(fā)現(xiàn),脂肪干細胞培養(yǎng)在平行的拓撲結構上表現(xiàn)出比無序材料更高的細胞干性,即所有譜系均在平行結構上表現(xiàn)出更強的分化能力。深入分析轉錄組結果發(fā)現(xiàn),代謝調控在其中起了主要作用,提示在無序材料上培養(yǎng)的脂肪干細胞可能因代謝轉換而降低了細胞干性。接著通過組蛋白乙酰化熒光實驗和該位點相關的基因檢測從側面證明了無序物理微環(huán)境降低了脂肪干細胞的干性。最后干性相關基因的檢測,為這一... 

【文章來源】：浙江大學浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－ｌｍＡＤＳＣｓ的流式分析結果

理軟件（Ｉｍａｇｅ�。┓謩e測量平行和無序兩種纖維的平均直徑。??２．３實驗結果??兩種靜電紡絲材料的表征，根據(jù)本課題組已發(fā)表的文章，如下圖１－３所示??［２７］。根據(jù)掃描電子顯微鏡的結果顯示，平行的材料平均直徑為１．７３ｕｍ，而無序??材料的平均直徑為１．５１?ｕｍ，兩者的標準差均在０．５、ｕｍ以下。??１３??

３．３．３拓撲結構誘導ｍＡＤＳＣｓ成軟骨??干細胞在無序材料表面也有向軟骨細胞分化的趨勢，同三系分化一致用阿爾??新藍染色，結果如圖１－６，無序材料上種植后的細胞，其阿利新藍的染色比平行??材料上的細胞深。表明無序的拓撲環(huán)境更易于誘導脂肪干細胞向成軟骨細胞分??化。??Ａｌｉｇｎｅｄ?Ｒａｎｄｏｍ??：ｖ、＇．．．，?’?．?ｗ鱗：錢：??－－－：ｋｋ－ｖ－?＇?－ｊ?Ｊ?Ｘ?－？?＾?■?＇？＇＾?＞?■？？?■■■＾；?２＇－＂＂」??．．．?－－ｄｉ?－＇ｘ?？＊?？＇?＃?？？，＞ｒ４?？－?，？４－ｖ：ｈ＂?ｗ＇?＇ＣｉｓＳ??，．．．Ｓ＂Ｓ?．ｍ．、＇氣．（．ｖ?；．ｄ：；Ｋ?備．４??－…一??＋?％＇．．』產??＜?．??、？?Ｉ－＇＂?＇?Ｖ’卜劣??Ａ?Ｂ??２０??


本文編號：3318062