由人類(lèi)免疫缺陷病毒（HIV）導(dǎo)致的獲得性免疫缺陷綜合癥（AIDS）是人類(lèi)健康的頭號(hào)威脅，但自HIV分離以來(lái)，始終未能成功研制出一種有效地HIV疫苗。在本論文研究中，首次嘗試以諾如病毒P粒子作為gp41近膜端外側(cè)區(qū)（MPER）廣泛中和抗體表位的載體，通過(guò)P粒子的結(jié)構(gòu)束縛，遞呈相關(guān)抗原并誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生MPER特異性體液免疫應(yīng)答。研究結(jié)果表明，HIV嵌合P粒子疫苗能夠誘導(dǎo)豚鼠產(chǎn)生的MPER特異性的血清抗體，并具有明顯的結(jié)合活性，然而中和活性微弱。利用HIV嵌合減毒流感活疫苗加強(qiáng)免疫后，未能提高HIV嵌合P粒子疫苗的免疫應(yīng)答水平。雖然未能克服MPER特異性中和抗體誘導(dǎo)的屏障，但不能否定諾如P粒子展示平臺(tái)在疫苗中的應(yīng)用潛能。另一方面，流感病毒滴度的傳統(tǒng)檢測(cè)方法穩(wěn)定性差，給免疫原的定量帶來(lái)很大影響，有效感染劑量的確定最終又影響著疫苗的有效性。因此，本論文利用qPCR技術(shù)，建立檢測(cè)三價(jià)流感減毒活疫苗病毒滴度的方法，大大縮短了病毒滴定所需的時(shí)間，并且克服了傳統(tǒng)方法中檢測(cè)結(jié)果不穩(wěn)定等問(wèn)題。1.嵌合諾如病毒P粒子疫苗誘導(dǎo)HIV-1廣泛中和抗體的研究自HIV發(fā)現(xiàn)以來(lái)，全球的科學(xué)家們大大投入到HIV疫苗研發(fā)的科... 

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語(yǔ)表
第一章 嵌合諾如病毒 P 粒子疫苗誘導(dǎo) HIV-1 廣泛中和抗體的研究
    第一節(jié) 背景知識(shí)
        1. HIV 背景介紹
        2. NoV 背景介紹
        3. 立題依據(jù)及論文設(shè)計(jì)思路
    第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)材料
        1. 質(zhì)粒、HIV-1 假病毒、菌株及細(xì)胞系
        2. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        3. 主要試劑
        4. 主要溶液
        5. 構(gòu)建引物
        6. 分支肽序列
        7. 主要儀器
    第三節(jié) 實(shí)驗(yàn)方法
        1. 嵌合蛋白的同源模擬
        2. NoV-PP 及 NoV-PP-HIV 嵌合質(zhì)粒構(gòu)建
        3. 蛋白表達(dá)及純化
        4. LAIV-HIV 疫苗的制備
        5. 免疫實(shí)驗(yàn)及評(píng)價(jià)方法
        6. 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
    第四節(jié) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        1. 嵌合蛋白的同源模擬
        2. NoV-PP-HIV 嵌合質(zhì)粒構(gòu)建
        3. 蛋白表達(dá)及純化
    小結(jié)
第二章 QPCR 法檢測(cè)三價(jià)流感減毒活疫苗病毒滴度方法的建立
    第一節(jié) 背景知識(shí)
        1. 流感病毒背景介紹
        2. 實(shí)時(shí)定量 PCR 技術(shù)
        3. 立題依據(jù)及論文設(shè)計(jì)思路
    第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)材料
        1. 疫苗毒株、細(xì)胞系及雞胚
        2. 主要試劑
        3. 主要溶液
        4. 構(gòu)建所需引物
        5. 主要儀器
    第三節(jié) 實(shí)驗(yàn)方法
        1. RT-qPCR 檢測(cè)方法
        2. 關(guān)鍵收獲時(shí)間的確定
        3. 半數(shù)雞胚感染劑量分析（EID50）
        4. 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    第四節(jié) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        1. RT-qPCR 的特異性和有效性
        2. 關(guān)鍵收獲時(shí)間的確定
        3. RT-qPCR 的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性
        4. RT-qPCR 檢測(cè)方法的可行性評(píng)價(jià)
    小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)歷
致謝



本文編號(hào)：3311985