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新型冠狀病毒上海株(nCoV-SH01)的分離和鑒定

發(fā)布時間:2021-07-14 23:47
  新型冠狀病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)疫情對人類生命健康構(gòu)成極大威脅。病毒的分離是構(gòu)建新型冠狀病毒(2019 novel coronavirus, 2019-nCoV)細(xì)胞感染模型和動物感染模型的基礎(chǔ)。本研究利用冠狀病毒易感的Vero E6細(xì)胞,從1例上海感染者的咽拭子中分離到一株2019-nCoV,命名為nCoV-SH01。對該毒株全基因組采用一代Sanger和二代Illumina法測序,發(fā)現(xiàn)該毒株與GenBank MN908947的同源性>99.99%。免疫熒光檢測顯示,該毒株與COVID-19康復(fù)者的血清呈陽性反應(yīng)。當(dāng)nCoV-SH01感染Vero E6細(xì)胞后,導(dǎo)致典型的合胞體病變,細(xì)胞病變效應(yīng)明顯且進(jìn)展迅速,提示nCoV-SH01可用于進(jìn)一步建立2019-nCoV的細(xì)胞感染和動物感染模型,為開展致病性研究以及抗病毒藥物和疫苗研發(fā)奠定了基礎(chǔ)。 

【文章來源】:微生物與感染. 2020,15(01)

【文章頁數(shù)】:6 頁

【部分圖文】:

新型冠狀病毒上海株(nCoV-SH01)的分離和鑒定


nCoV-SH01在Vero E6細(xì)胞上的細(xì)胞病變效應(yīng)

細(xì)胞培養(yǎng),熒光,細(xì)胞,測序


SCDC-10咽拭子和第1次細(xì)胞培養(yǎng)上清液的2019-nCoV熒光定量RT-PCR檢測

細(xì)胞,病毒,抗原,血清


為進(jìn)一步確認(rèn)SCDC-10-P1中有2019-nCoV復(fù)制及Vero E6細(xì)胞上的細(xì)胞病變與2019-nCoV感染相關(guān),采用免疫熒光染色法,用1份來自COVID-19康復(fù)者的血清對SCDC-10感染的細(xì)胞進(jìn)行檢測,并設(shè)立了健康人血清對照和未感染病毒的正常細(xì)胞對照,以排除假陽性結(jié)果。結(jié)果顯示,僅康復(fù)者的血清與SCDC-10的細(xì)胞呈陽性反應(yīng),且與細(xì)胞病變部位高度重合(圖3)。結(jié)果提示,SCDC-10接種后,細(xì)胞呈現(xiàn)的病變與2019-nCoV高度相關(guān),細(xì)胞中存在2019-nCoV感染和相關(guān)病毒抗原的表達(dá)。3 討論


本文編號:3285139

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