許多能導(dǎo)致人類傳染病的病毒（如麻疹病毒、狂犬病毒、呼吸道合胞病毒和人副流感病毒等）都屬于不分節(jié)負(fù)鏈RNA病毒。水泡性口炎病毒（VSV）是研究不分節(jié)負(fù)鏈RNA病毒的的模式病毒,該類病毒在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的復(fù)制與轉(zhuǎn)錄是依賴于自身所攜帶的聚合酶來(lái)完成的。構(gòu)成VSV的聚合酶的蛋白包括核衣殼蛋白（Nucleoprotein,N）、磷酸蛋白（Phosphoprotein,P）和大聚合酶蛋白（Large protein,L）,其中核衣殼蛋白在病毒復(fù)制轉(zhuǎn)錄過(guò)程中起著形成復(fù)制轉(zhuǎn)錄模板,保護(hù)病毒基因組不被核酶降解的作用,而磷酸蛋白作為聚合酶輔助因子是一個(gè)高度磷酸化的蛋白,在病毒生活史中參與了幫助核衣殼蛋白對(duì)病毒基因組的特異性識(shí)別以及調(diào)節(jié)病毒復(fù)制轉(zhuǎn)錄的過(guò)程。本論文通過(guò)對(duì)核衣殼蛋白與磷酸蛋白上氨基端的氨基酸進(jìn)行點(diǎn)突變,以找出對(duì)其功能發(fā)揮起重要作用的氨基酸位點(diǎn),并且進(jìn)一步揭示這些氨基酸在病毒復(fù)制轉(zhuǎn)錄過(guò)程中所扮演的角色。近年來(lái)的研究表明,在VSV的N-RNA復(fù)合體中,一個(gè)單體的N蛋白分子通過(guò)氨基端的臂（N-terminal arm）與相鄰的N蛋白相互作用包裹基因組RNA,形成功能性的N-RNA模板。當(dāng)病毒自身的聚合酶在模... 

【文章來(lái)源】：武漢大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

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電鏡下VSV病毒粒子形態(tài)（圖片來(lái)自維基百科）

武漢大學(xué)博士學(xué)位論文于VSV而設(shè)計(jì)的治療載體方面有很大的幫助。例如，基質(zhì)蛋白會(huì)通過(guò)身的RNA依賴的RNA聚合酶（RdRp)來(lái)調(diào)控其基因的轉(zhuǎn)錄。這個(gè)現(xiàn)象病毒感染的后期，基質(zhì)蛋白的積累會(huì)促進(jìn)無(wú)活性的RNP核心的產(chǎn)生，為包毒顆粒做準(zhǔn)備�；|(zhì)蛋白含有所謂的“后期功能域”（late domain)在VSV程中發(fā)揮著重要作用，這個(gè)結(jié)構(gòu)域中包含一個(gè)重要的PPPY基元，它調(diào)節(jié)白與細(xì)胞中的一個(gè)在其他包膜病毒出芽中起泛素連接酶作用的NEDD4的用(Harty, 2001; Jayakar, 2000)�；|(zhì)蛋白質(zhì)還包含一個(gè)PSAP基元，該基元病毒（艾滋病毒和埃博拉病毒）出芽過(guò)程中與細(xì)胞蛋白TSG101結(jié)合，幫出芽。但在VSV的出芽中的功能尚不明r(Martin-Serrano, 2001)。

Conzelmann和同事包裝出了重組的狂犬病毒，這也是第一次完全從cDNA獲得的負(fù)鏈RNA病毒（圖1-10)。在實(shí)驗(yàn)室中，編碼狂犬病毒N,P,L蛋白以及病毒的anti基因組RNA的質(zhì)粒被共同轉(zhuǎn)染進(jìn)入細(xì)胞，并且都通過(guò)T7 RNA聚合酶來(lái)進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。由于真核細(xì)胞中沒(méi)有T7RNA聚合酶，所以上述細(xì)胞還需要用攜帶T7 RNA聚合酶的重組的痘病毒進(jìn)行感染。這一試驗(yàn)成功的一個(gè)關(guān)鍵因素在于從cDNA上被T7 RNA聚合酶合成出來(lái)的是正義的anti基因組RNA。因?yàn)槿绻麖腸DNA上被T7 RNA聚合酶首先合成出來(lái)的負(fù)義的基因組RNA，那么這一RNA就會(huì)與從編碼N,P,L質(zhì)粒上轉(zhuǎn)錄出來(lái)的正義的mRNA雜交形成雙鏈結(jié)構(gòu)，這樣就會(huì)干擾重組病毒的形成。此外，由于一些負(fù)鏈RNA病毒的基因組RNA上包含連續(xù)的尿瞭唆并且后面跟著發(fā)卡結(jié)構(gòu)，這一結(jié)構(gòu)與T7 RNA聚合酶是別的轉(zhuǎn)錄終止序列類似

【參考文獻(xiàn)】：
博士論文
[1]SsNSRV-1基因功能及其與核盤菌互作機(jī)制研究[D]. 高知梟.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2020

碩士論文
[1]19種化合物抗大口黑鱸彈狀病毒活性篩選[D]. 張雨.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2019



本文編號(hào)：3282351