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內質網應激參與低氧誘導的小鼠骨髓間充質干細胞凋亡

發(fā)布時間:2021-07-05 15:46
  目的探討小鼠骨髓間充質干細胞(Bm MSCs)在低氧、營養(yǎng)剝奪條件下的凋亡機制。方法分別提取Chop+/+及Chop-/-小鼠骨髓間充質干細胞分離、培養(yǎng),并用流式細胞術鑒定其表面標記。在低氧、去血清條件下誘導細胞凋亡并用AnnexinⅤ-FITC的檢測方法比較兩種細胞的凋亡情況。結果用流式細胞術對分離的Bm MSCs進行免疫表型分析,結果顯示,兩種基因型Bm MSCs CD44、Scal-1的陽性率至少為75. 74%以上,CD34、CD45的表達率皆為2%以下。AnnexinⅤ-FITC凋亡檢測顯示,缺氧、去血清24 h后,Chop+/+Bm MSCs AnnexinⅤ陽性細胞增多,由0 h的16. 76%±5. 87%增加到29. 51%±3. 04%(P <0. 01);而缺氧、去血清24 h條件下的Chop-/-Bm MSCs AnnexinⅤ陽性細胞為11. 12%±6. 22%,與Chop+/+比較,差異有統(tǒng)計學意義(P <0. 01)。結論 Chop基因缺失可抑制Bm MSCs在低氧、去血清條件下的細胞凋亡,表明內質網應激途徑參與了低氧、去血清條件下Bm MS... 

【文章來源】:山西醫(yī)科大學學報. 2019,50(10)

【文章頁數(shù)】:5 頁

【部分圖文】:

內質網應激參與低氧誘導的小鼠骨髓間充質干細胞凋亡


WT及Chop-/-小鼠骨髓間充質干細胞基因型鑒定及形態(tài)學A.基因型鑒定B.野生型BmMSCsC.Chop-/-BmMSCs

表面標志,流式細胞術分析,間充質干細胞,凋亡


圖2流式細胞術分析野生型小鼠BmMSCs表面標志物結果Figure2AnalysisoftheWTBmMSCsmarkersbyflowcytometry圖3流式細胞術分析Chop-/-小鼠BmMSCs表面標志物結果圖Figure3AnalysisoftheChop-/-BmMSCsmarkersbyflowcytometry2.2間充質干細胞在低氧、營養(yǎng)剝奪條件下的凋亡情況通過流式細胞儀檢測AnnexinⅤ陽性細胞即凋亡細胞,發(fā)現(xiàn)缺氧、去血清24h后,AnnexinⅤ陽性細胞增多,由0h的16.76%±5.87%增加到29.51%±3.04%,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01,見圖4)。表明在體外缺氧、去血清的培養(yǎng)條件下,間充質干細胞凋亡增多。圖4流式細胞術檢測野生型小鼠BmMSCs凋亡Figure4AnalysisoftheWTBmMSCsapoptosisbyflowcytometry2.3Chop基因缺失抑制小鼠骨髓間充質干細胞的凋亡在同樣體外缺氧、去血清的培養(yǎng)條件下,Chop基因缺失小鼠骨髓間充質干細胞凋亡減少。結果顯示,缺氧、去血清24h,Chop-/-基因型小鼠BmMSCsAnnexinⅤ陽性細胞僅11.12%±6.22%,與同等條件山西醫(yī)科大學學報,2019年10月,第50卷第10期·5041·

表面標志,流式細胞術分析,小鼠,間充質干細胞


圖2流式細胞術分析野生型小鼠BmMSCs表面標志物結果Figure2AnalysisoftheWTBmMSCsmarkersbyflowcytometry圖3流式細胞術分析Chop-/-小鼠BmMSCs表面標志物結果圖Figure3AnalysisoftheChop-/-BmMSCsmarkersbyflowcytometry2.2間充質干細胞在低氧、營養(yǎng)剝奪條件下的凋亡情況通過流式細胞儀檢測AnnexinⅤ陽性細胞即凋亡細胞,發(fā)現(xiàn)缺氧、去血清24h后,AnnexinⅤ陽性細胞增多,由0h的16.76%±5.87%增加到29.51%±3.04%,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01,見圖4)。表明在體外缺氧、去血清的培養(yǎng)條件下,間充質干細胞凋亡增多。圖4流式細胞術檢測野生型小鼠BmMSCs凋亡Figure4AnalysisoftheWTBmMSCsapoptosisbyflowcytometry2.3Chop基因缺失抑制小鼠骨髓間充質干細胞的凋亡在同樣體外缺氧、去血清的培養(yǎng)條件下,Chop基因缺失小鼠骨髓間充質干細胞凋亡減少。結果顯示,缺氧、去血清24h,Chop-/-基因型小鼠BmMSCsAnnexinⅤ陽性細胞僅11.12%±6.22%,與同等條件山西醫(yī)科大學學報,2019年10月,第50卷第10期·5041·


本文編號:3266361

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