發(fā)布時間：2021-07-02 13:40

　　目的:近年來干細胞移植治療是缺血性腦卒中較有潛力的治療手段,其中內皮祖細胞（Endothelial Progenitor Cells,EPC）也是其中一種干細胞。EPC是骨髓組織、外周血或者臍帶血中,可分化為內皮細胞的多潛能性細胞,在特定條件下可誘導分化成為血管內皮細胞,具有新生血管和內皮的作用。但動物實驗研究表明移植入的EPC很難在卒中后炎癥、幾乎不存在血管的區(qū)域存活,給臨床的應用帶來很多困難。所以探索EPC如何定向遷移至缺血區(qū)以及怎樣向梗死區(qū)定向形成管腔樣結構并與原有血管融合形成血管網絡可能會為尋找到更有效的治療方式提供新的思路。卒中后,損傷區(qū)域會釋放很多細胞因子,粘附因子等,其中CXC12與VEGF是其中較為重要的因子。研究表明CXCL12可以動員、募集EPC參與血管新生,而VEGF則是參與這一過程的重要因子。所以我們猜想CXC12與VEGF之間在EPC增殖,遷移和血管生成等過程中存在協(xié)同作用以后期探索兩者對缺血性卒中缺血區(qū)新生血管的定向新生和對神經功能的修復作用。方法:1.用密度梯度離心法分離臍帶血中單個核細胞,接種在用人纖維連接蛋白（FN）包被過的培養(yǎng)瓶中,用內皮細胞專用培養(yǎng)... 

【文章來源】：皖南醫(yī)學院安徽省

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

人臍帶血來源的內皮祖細胞鑒定

合VEGF組中，隨著濃度的升高，EPC的增殖能力并沒有持續(xù)增高，反而在100 ng/ml時出現(xiàn)了下降，而且兩組細胞因子聯(lián)合對EPC促增殖能力的作用也沒有高于VEGF組，而是在 50 ng/ml 濃度時達到高峰，轉而出現(xiàn)下降。其中圖2B表示EPC的增殖能力的變化，A為各組對EPC增殖能力的影響大小。綜上結果，CXCL12和VEGF對EPC的增殖能力都有促進，并且有濃度依賴性。而兩 組 因 子 聯(lián) 合 對 EPC 的 增 殖 作 用 并 不 是 較 強 ， 反 而 有 最 佳 濃 度 配 比 。

組細胞因子的濃度都是500 ng/ml。這三組細胞因子分別填充條帶。對照組為FITC-BSA填充條帶。鋪上細胞30min后固定染色。紅色：細胞肌動蛋白。綠色：FITC的標記的條帶，藍色：DAPI。如圖3所示，對照組的EPC肌動蛋白分布較自由，與帶有細胞因子的條帶位置也沒呈現(xiàn)出關系，相對于條帶分布的較散亂，而CXCL12組和CXCL12聯(lián)合VEGF組細胞的肌動蛋白并不像對照組那樣雜亂分布，反而向條帶方向趨化，形成黏著斑。而VEGF組同對照組一樣，肌動蛋白的分布沒有方向性的變化。為了證實上述結果，我們又設計實驗如下：在常規(guī)用FN和PDL包被的transwell系統(tǒng)中


本文編號：3260574