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HT22海馬神經(jīng)元細(xì)胞氧糖剝奪再灌注模型的建立

發(fā)布時(shí)間:2021-06-10 18:26
  【目的】探討HT22海馬神經(jīng)元細(xì)胞氧糖剝奪再灌注(OGD/R)模型的建立條件。【方法】將HT22海馬神經(jīng)元細(xì)胞分為正常對(duì)照組和模型組,以不同的密度接種至96孔板,正常對(duì)照組細(xì)胞始終在正常氣體條件下培養(yǎng),模型組先采用缺氧小室對(duì)細(xì)胞進(jìn)行缺氧處理8 h,然后給予不同時(shí)間的復(fù)氧處理。應(yīng)用細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒8(CCK-8)測(cè)定細(xì)胞活力,采用微板法檢測(cè)乳酸脫氫酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)的活力及丙二醛(MDA)的含量,并進(jìn)行細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察!窘Y(jié)果】與正常對(duì)照組比較,接種密度9 000、5 000、3 000個(gè)/孔的HT22細(xì)胞在復(fù)氧6 h時(shí)均明顯損傷,細(xì)胞存活率降低,上清液中LDH活力及MDA含量升高,SOD活力下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P <0.05)!窘Y(jié)論】HT22細(xì)胞OGD/R模型的最佳造模條件是缺氧8 h復(fù)氧6 h。 

【文章來源】:廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào). 2020,37(01)

【文章頁(yè)數(shù)】:5 頁(yè)

【部分圖文】:

HT22海馬神經(jīng)元細(xì)胞氧糖剝奪再灌注模型的建立


不同造模條件下細(xì)胞的形態(tài)(×100)

細(xì)胞,缺血性腦中風(fēng)


缺血性腦中風(fēng)(ischemic stroke,IS)是一種因血管部分或完全阻塞導(dǎo)致血液不能流入大腦而引起腦組織損傷的疾病,患者預(yù)后常伴有運(yùn)動(dòng)、語言等神經(jīng)功能缺損癥狀,給社會(huì)和家庭帶來了沉重的負(fù)擔(dān)[1-2]。腦組織處于缺血缺氧的病理狀態(tài)下,大腦的結(jié)構(gòu)和功能將出現(xiàn)嚴(yán)重的損傷和破壞,當(dāng)用溶栓、擴(kuò)血管等手段重新補(bǔ)給血液后,會(huì)進(jìn)一步加劇腦組織的損傷并伴隨一系列的炎癥反應(yīng),引起再灌注損傷。氧糖剝奪再灌注(OGD/R)模型通過剝奪細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)及氧氣供給模擬人體缺血再灌注損傷過程,是目前較為理想的體外實(shí)驗(yàn)?zāi)P蚚3]。海馬對(duì)缺氧的耐受力較差,因此選擇海馬神經(jīng)元細(xì)胞建立穩(wěn)定的氧糖剝奪再灌注模型,對(duì)缺血性腦中風(fēng)疾病的研究具有重要意義[4]。本研究以HT22海馬神經(jīng)元細(xì)胞為研究對(duì)象,采用缺氧小室(見圖1)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行缺氧、不同時(shí)間的復(fù)氧建立氧糖剝奪再灌注模型,通過觀察細(xì)胞形態(tài),檢測(cè)細(xì)胞存活率,同時(shí)測(cè)定不同條件下細(xì)胞培養(yǎng)基中乳酸脫氫酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)的活力及丙二醛(MDA)的含量,確定最佳的造模條件,以期為研究缺血性腦中風(fēng)疾病的研究建立一種穩(wěn)定可靠的細(xì)胞模型,現(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)道如下。1 材料與方法

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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本文編號(hào):3222896

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