剛地弓形蟲（Toxoplasma gondii）簡(jiǎn)稱弓形蟲，是一種細(xì)胞內(nèi)寄生原蟲，具有人獸共患、機(jī)會(huì)性致病特點(diǎn)。弓形蟲寄生于人體及動(dòng)物有核細(xì)胞，造成多組織器官的損害，引起弓形蟲病。孕婦感染后，還可出現(xiàn)流產(chǎn)、早產(chǎn)、畸形等不良妊娠結(jié)局和不孕[1]，在免疫功能低下者如艾滋病患者，是其致死的主要原因。弓形蟲呈世界性分布，人、獸感染率均極高，給人類健康和經(jīng)濟(jì)社會(huì)發(fā)展帶來了較大的影響。因此弓形蟲病是醫(yī)學(xué)領(lǐng)域重點(diǎn)防治的一種寄生蟲病。為探索GRA1/MIC6基因?qū)蜗x感染的免疫保護(hù)性，本試驗(yàn)對(duì)基因GRA1、MIC6進(jìn)行引物設(shè)計(jì)，將GRA1、MIC6基因及其串聯(lián)基因與真核表達(dá)載體pVAX1及原核表達(dá)載體pET28-a相連，構(gòu)建真核及原核表達(dá)載體。另外在兩基因串聯(lián)的基礎(chǔ)上插入了CpG-ODN加強(qiáng)序列，分別與真核表達(dá)載體pVAX1及原核表達(dá)載體pET28-a相連。將質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到Hela細(xì)胞中，用間接免疫熒光及Western blot方法驗(yàn)證在Hela內(nèi)表達(dá)。將原核表達(dá)質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌，表達(dá)出重組的蛋白。將核酸疫苗、亞單位疫苗分別對(duì)小鼠接種，進(jìn)行免疫保護(hù)分析。結(jié)果：GRA1，MIC6基因得到有效擴(kuò)增，經(jīng)比對(duì)，... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

GRA1及L-GRA1基因PCR擴(kuò)增凝膠電泳分析

6 基因的 PCR 擴(kuò) 基因擴(kuò)增結(jié)果為6 基因 PCR 擴(kuò)增凝膠tic analysis result of Mer（DL2000）；1：M1 M 2bp1

IC6 基因的 PCR 擴(kuò)增6 基因擴(kuò)增結(jié)果為 10IC6 基因 PCR 擴(kuò)增凝膠電retic analysis result of MICrker（DL2000）；1：MI1050b1 M 2

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]剛地弓形蟲基因工程疫苗[J]. 徐安健,谷俊朝.  中國(guó)生物工程雜志. 2009(11)
[2]重組人IL-2及IFN-γ對(duì)感染弓形蟲妊娠鼠T細(xì)胞亞群的影響[J]. 楊順,錢建新,褚靜英,馮萍,朱雪明.  中國(guó)血吸蟲病防治雜志. 2008(05)
[3]弓形蟲SAG1-MIC3融合基因真核表達(dá)載體的構(gòu)建與鑒定[J]. 田小東,古欽民,周懷瑜,張加勤,叢華,趙群力,李瑛.  中國(guó)病原生物學(xué)雜志. 2008(03)
[4]弓形蟲代謝分泌抗原在免疫中研究進(jìn)展[J]. 張德林,李學(xué)瑞,王艷華,李惠萍,劉伯林.  中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào). 2007(12)
[5]弓形蟲微線體蛋白研究進(jìn)展[J]. 李學(xué)瑞,趙象忠,王艷華,張德林.  中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào). 2006(04)
[6]弓形蟲SAG1單基因疫苗與SAG1-ROP2復(fù)合基因疫苗的免疫效果觀察[J]. 楊婷婷,何深一,張加勤,周懷瑜,叢華,古欽民,李瑛,趙群力.  中國(guó)人獸共患病雜志. 2005(05)
[7]弓形蟲P30-P22復(fù)合DNA疫苗免疫小鼠誘導(dǎo)的體液免疫應(yīng)答[J]. 孫怡,何深一,古欽民,李瑛,叢華,周懷愉,趙群力.  臨沂醫(yī)學(xué)�？茖W(xué)校學(xué)報(bào). 2004(06)
[8]弓形蟲疫苗研究新進(jìn)展[J]. 蔣華,何深一.  國(guó)外醫(yī)學(xué)(寄生蟲病分冊(cè)). 2004(06)
[9]CpG-DNA免疫刺激活性研究進(jìn)展[J]. 景志忠,才學(xué)鵬.  中國(guó)獸醫(yī)雜志. 2004(09)
[10]弓形蟲P24基因編碼蛋白的分子生物學(xué)研究進(jìn)展[J]. 彭碧文,林建銀.  國(guó)外醫(yī)學(xué)(寄生蟲病分冊(cè)). 2004(03)



本文編號(hào)：3211813