剛地弓形蟲（Toxoplasma gondii）簡稱弓形蟲，是一種細胞內寄生原蟲，具有人獸共患、機會性致病特點。弓形蟲寄生于人體及動物有核細胞，造成多組織器官的損害，引起弓形蟲病。孕婦感染后，還可出現(xiàn)流產、早產、畸形等不良妊娠結局和不孕[1]，在免疫功能低下者如艾滋病患者，是其致死的主要原因。弓形蟲呈世界性分布，人、獸感染率均極高，給人類健康和經濟社會發(fā)展帶來了較大的影響。因此弓形蟲病是醫(yī)學領域重點防治的一種寄生蟲病。為探索GRA1/MIC6基因對弓形蟲感染的免疫保護性，本試驗對基因GRA1、MIC6進行引物設計，將GRA1、MIC6基因及其串聯(lián)基因與真核表達載體pVAX1及原核表達載體pET28-a相連，構建真核及原核表達載體。另外在兩基因串聯(lián)的基礎上插入了CpG-ODN加強序列，分別與真核表達載體pVAX1及原核表達載體pET28-a相連。將質粒轉染到Hela細胞中，用間接免疫熒光及Western blot方法驗證在Hela內表達。將原核表達質粒導入大腸桿菌，表達出重組的蛋白。將核酸疫苗、亞單位疫苗分別對小鼠接種，進行免疫保護分析。結果：GRA1，MIC6基因得到有效擴增，經比對，... 

【文章來源】：吉林大學吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

GRA1及L-GRA1基因PCR擴增凝膠電泳分析

6 基因的 PCR 擴 基因擴增結果為6 基因 PCR 擴增凝膠tic analysis result of Mer（DL2000）；1：M1 M 2bp1

IC6 基因的 PCR 擴增6 基因擴增結果為 10IC6 基因 PCR 擴增凝膠電retic analysis result of MICrker（DL2000）；1：MI1050b1 M 2

【參考文獻】：
期刊論文
[1]剛地弓形蟲基因工程疫苗[J]. 徐安健,谷俊朝.  中國生物工程雜志. 2009(11)
[2]重組人IL-2及IFN-γ對感染弓形蟲妊娠鼠T細胞亞群的影響[J]. 楊順,錢建新,褚靜英,馮萍,朱雪明.  中國血吸蟲病防治雜志. 2008(05)
[3]弓形蟲SAG1-MIC3融合基因真核表達載體的構建與鑒定[J]. 田小東,古欽民,周懷瑜,張加勤,叢華,趙群力,李瑛.  中國病原生物學雜志. 2008(03)
[4]弓形蟲代謝分泌抗原在免疫中研究進展[J]. 張德林,李學瑞,王艷華,李惠萍,劉伯林.  中國人獸共患病學報. 2007(12)
[5]弓形蟲微線體蛋白研究進展[J]. 李學瑞,趙象忠,王艷華,張德林.  中國人獸共患病學報. 2006(04)
[6]弓形蟲SAG1單基因疫苗與SAG1-ROP2復合基因疫苗的免疫效果觀察[J]. 楊婷婷,何深一,張加勤,周懷瑜,叢華,古欽民,李瑛,趙群力.  中國人獸共患病雜志. 2005(05)
[7]弓形蟲P30-P22復合DNA疫苗免疫小鼠誘導的體液免疫應答[J]. 孫怡,何深一,古欽民,李瑛,叢華,周懷愉,趙群力.  臨沂醫(yī)學專科學校學報. 2004(06)
[8]弓形蟲疫苗研究新進展[J]. 蔣華,何深一.  國外醫(yī)學(寄生蟲病分冊). 2004(06)
[9]CpG-DNA免疫刺激活性研究進展[J]. 景志忠,才學鵬.  中國獸醫(yī)雜志. 2004(09)
[10]弓形蟲P24基因編碼蛋白的分子生物學研究進展[J]. 彭碧文,林建銀.  國外醫(yī)學(寄生蟲病分冊). 2004(03)



本文編號：3211813