目的研究Toll樣受體4（TLR4）在銅綠假單胞菌（Pseudomonase aeruginosa,PA）上清液誘導(dǎo)小鼠單核巨噬細胞RAW264.7凋亡中的作用。方法 RAW264.7巨噬細胞分為control組（不做任何處理）、MOD組（體積分數(shù)為0.10、0.20、0.30的PA上清液處理）、control+TAK-242組（TLR4阻斷劑處理）、MOD+TAK-242組（體積分數(shù)為0.10、0.20、0.30的PA上清液處理+TLR4阻斷劑處理）,采用Hoechst染色法觀察細胞凋亡后細胞核形態(tài)學(xué)變化,MTT檢測細胞增殖抑制率,流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡,Western blot檢測TLR4蛋白的表達。結(jié)果與control組相比,MOD組呈現(xiàn)不同程度的細胞凋亡（P<0.05）,且隨著PA上清液體積分數(shù)的逐漸增加,細胞凋亡率不同程度逐漸增加（P<0.05）;加入TLR4阻斷劑后,細胞凋亡率比MOD組明顯降低（P<0.05）。同時隨著PA上清液體積分數(shù)逐漸增加,TLR4蛋白的表達不同程度逐漸增加（P<0.05）;加入TLR4阻斷劑后,TLR4蛋白的表達水平降低（P... 

【文章來源】：免疫學(xué)雜志. 2019,35(11)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實驗細胞
    1.2 實驗菌株
    1.3 實驗主要試劑及儀器
    1.4 細胞培養(yǎng)
    1.5 PA上清液的制備
    1.6 實驗分組
    1.7 Hoechst染色法觀察RAW264.7巨噬細胞凋亡后細胞核染色質(zhì)形態(tài)變化
    1.8 MTT法觀察各組細胞在不同作用時間下增殖情況
    1.9 流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡
    1.1 0 Western blot檢測TLR4蛋白表達情況
    1.1 1 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 RAW264.7巨噬細胞凋亡后細胞核染色質(zhì)形態(tài)變化
    2.2 MTT法檢測阻斷TLR4與不阻斷TLR4各組細胞的增殖抑制率
    2.3 Annexin V-FITC/PI雙染流式細胞術(shù)檢測阻斷TLR4與不阻斷TLR4各組細胞的凋亡率
    2.4 Western blot檢測阻斷TLR4與不阻斷TLR4各組TLR4蛋白表達情況
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]銅綠假單胞菌上清液誘導(dǎo)J774細胞凋亡過程中Fas蛋白的表達[J]. 孟子卜,柴文戍.  中國藥理學(xué)通報. 2012(01)
[2]銅綠假單胞菌上清液誘導(dǎo)J774細胞凋亡過程中凋亡誘導(dǎo)因子的表達[J]. 李穎,柴文戍,劉硯,寧學(xué)聰.  山東醫(yī)藥. 2010(41)



本文編號：3116875