第一部分大鼠2-AAF/PH模型中肝卵圓細(xì)胞的增殖模型的建立以及肝卵圓細(xì)胞的分離、鑒定及培養(yǎng)目的建立大鼠2-AAF/PH肝卵圓細(xì)胞增殖模型,探討其分離、鑒定和培養(yǎng)的方法。方法大鼠每天灌喂2-乙酰氨基芴,劑量為15mg/kg,第5天停藥并在10%水合氯醛全麻下行2/3大部肝切除術(shù)。第6天繼續(xù)喂藥,連續(xù)一周。對照組只是用生理鹽水代替2-乙酰氨基芴,其余步驟一樣。分別于手術(shù)后第2、6、10、12、16、21天麻醉后頸椎脫臼法處死大鼠取肝臟標(biāo)本,每個時間點(diǎn)取3只大鼠,繪制肝卵圓細(xì)胞增殖曲線圖；取肝卵圓細(xì)胞增殖高峰期大鼠,采用改良的二步膠原酶灌注消化加密度梯度離心法分離肝卵圓細(xì)胞,用流式細(xì)胞儀、細(xì)胞免疫熒光、透射電鏡鑒定肝卵圓細(xì)胞。結(jié)果2-AAF/PH模型成功誘導(dǎo)肝卵圓細(xì)胞增殖,同時還發(fā)現(xiàn)肝卵圓細(xì)胞的增殖高峰在術(shù)后10天左右,對照組無肝卵圓細(xì)胞出現(xiàn)。分離的肝卵圓細(xì)胞呈鋪路石樣生長,流式細(xì)胞儀檢測OV6陽性細(xì)胞占85.36%±7%，細(xì)胞免疫熒光顯示細(xì)胞表達(dá)肝卵圓細(xì)胞標(biāo)志物OV6, AFP, CKI9, ALB, C-kit,透射電鏡顯示核漿比大,胞漿內(nèi)細(xì)胞器少,表現(xiàn)為不成熟細(xì)胞特性。結(jié)論2-AAF... 

【文章來源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：92 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
英文縮略詞表
摘要
Abstract
第一部分
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
第二部分
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
第三部分
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
總結(jié)
綜述一
綜述二
    參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文情況
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Characterization of CD133+ parenchymal cells in the liver:Histology and culture[J]. Seiichi Yoshikawa,Yoh Zen,Takahiko Fujii,Yasunori Sato,Tetsuo Ohta,Yutaka Aoyagi,Yasuni Nakanuma.  World Journal of Gastroenterology. 2009(39)



本文編號：3107713