第一部分大鼠2-AAF/PH模型中肝卵圓細胞的增殖模型的建立以及肝卵圓細胞的分離、鑒定及培養(yǎng)目的建立大鼠2-AAF/PH肝卵圓細胞增殖模型,探討其分離、鑒定和培養(yǎng)的方法。方法大鼠每天灌喂2-乙酰氨基芴,劑量為15mg/kg,第5天停藥并在10%水合氯醛全麻下行2/3大部肝切除術。第6天繼續(xù)喂藥,連續(xù)一周。對照組只是用生理鹽水代替2-乙酰氨基芴,其余步驟一樣。分別于手術后第2、6、10、12、16、21天麻醉后頸椎脫臼法處死大鼠取肝臟標本,每個時間點取3只大鼠,繪制肝卵圓細胞增殖曲線圖；取肝卵圓細胞增殖高峰期大鼠,采用改良的二步膠原酶灌注消化加密度梯度離心法分離肝卵圓細胞,用流式細胞儀、細胞免疫熒光、透射電鏡鑒定肝卵圓細胞。結果2-AAF/PH模型成功誘導肝卵圓細胞增殖,同時還發(fā)現(xiàn)肝卵圓細胞的增殖高峰在術后10天左右,對照組無肝卵圓細胞出現(xiàn)。分離的肝卵圓細胞呈鋪路石樣生長,流式細胞儀檢測OV6陽性細胞占85.36%±7%，細胞免疫熒光顯示細胞表達肝卵圓細胞標志物OV6, AFP, CKI9, ALB, C-kit,透射電鏡顯示核漿比大,胞漿內(nèi)細胞器少,表現(xiàn)為不成熟細胞特性。結論2-AAF... 

【文章來源】：華中科技大學湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：92 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
英文縮略詞表
摘要
Abstract
第一部分
    前言
    材料與方法
    結果
    討論
第二部分
    前言
    材料與方法
    結果
    討論
第三部分
    前言
    材料與方法
    結果
    討論
總結
綜述一
綜述二
    參考文獻
發(fā)表論文情況
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]Characterization of CD133+ parenchymal cells in the liver:Histology and culture[J]. Seiichi Yoshikawa,Yoh Zen,Takahiko Fujii,Yasunori Sato,Tetsuo Ohta,Yutaka Aoyagi,Yasuni Nakanuma.  World Journal of Gastroenterology. 2009(39)



本文編號：3107713