目的:為探索α芋螺毒素MI的解毒方法,研究MI分支肽抗原的合成方法、免疫原性及抗血清對MI的解毒活性。方法:采用固相多肽合成法合成含炔基MI線性肽及含疊氮賴氨酸分支肽,空氣氧化得含炔基MI,通過銅[Cu（Ⅰ）]催化疊氮-炔雜環(huán)加成反應(yīng)合成多分支肽。多分支肽4次免疫BALB/c小鼠制備抗血清,ELISA法測定血清抗體滴度,然后MI與抗血清混合注射KM小鼠,測定抗血清的保護(hù)效果。結(jié)果:合成了MI八分支肽,N端連接的MI八分支肽的免疫原性差,10、20μg/只劑量組第4次免疫后的血清抗體滴度分別為1∶400及1∶6400;C端連接的MI八分支肽的免疫原性較高,10、20μg/只劑量組第4次免疫后的血清抗體滴度分別為1∶3200及1∶25 600。各組200μL抗血清與20μg/kg MI混合后注射小鼠,小鼠均死亡,且死亡時(shí)間與對照組相比無顯著差異。結(jié)論:C端連接的MI八分支肽比N端連接的八分肽免疫抗原性高,但兩者的抗血清對MI無顯著解毒活性。 

【文章來源】：生物技術(shù)通訊. 2019,30(06)

【文章頁數(shù)】：7 頁

【部分圖文】：

C端連接的MI多分支肽抗原的合成路線圖

含炔基MI與賴氨酸多分支肽的點(diǎn)擊反應(yīng)產(chǎn)物為一個(gè)主產(chǎn)物（圖3）及反應(yīng)原料，產(chǎn)物純化后，質(zhì)譜分析結(jié)果如圖4所示，均為八分支肽。圖3 N端（A）及C端（B）連接的MI多分支肽點(diǎn)擊反應(yīng)產(chǎn)物及純肽的HPLC分析1：含炔基MI;2:MI多分支肽；3:D;4:TBTA

N端（A）及C端（B）連接的MI多分支肽點(diǎn)擊反應(yīng)產(chǎn)物及純肽的HPLC分析1：含炔基MI;2:MI多分支肽；3:D;4:TBTA


本文編號：3075539