干細(xì)胞因子（stem cell factor. SCF）是一種多功能細(xì)胞因子,參與機(jī)體發(fā)育中多種細(xì)胞的增殖調(diào)控,是多種哺乳動(dòng)物干細(xì)胞增殖分化的關(guān)鍵因子。它作用于早期造血干/祖細(xì)胞,在維持其存活、促進(jìn)增殖、及調(diào)控其向各系造血分化中起重要作用。人SCF由外顯子6蛋白酶解位點(diǎn)選擇性剪接形成可溶型（sSCF）與膜結(jié)合型（mSCF）兩種形式,二者在造血中的作用有所不同。sSCF參與干/祖細(xì)胞的動(dòng)員,而nSCF則被認(rèn)為是造血微環(huán)境’niche"的重要組成分子,參與造血干細(xì)胞與"niche"之間的相互作用,造血微環(huán)境缺乏nSCF導(dǎo)致造血干細(xì)胞重建造血障礙。我們以往的研究結(jié)果闡明了sSCF、mSCF可分別通過(guò)旁分泌方式和并置性作用機(jī)制促進(jìn)表達(dá)c-kit細(xì)胞的增殖。不僅如此,在細(xì)胞緊密接觸的條件下,mSCF的作用更為顯著,提示nSCF可能在維持造血干細(xì)胞功能以及促進(jìn)其體內(nèi)、外擴(kuò)增方面有獨(dú)特的效果。本論文在此基礎(chǔ)之上,用DNA重組技術(shù)成功構(gòu)建了人可溶型及膜結(jié)合型干細(xì)胞因子的重組逆轉(zhuǎn)錄病毒表達(dá)載體MSCV-PGK-GFP-sSCF、MSCV-PGK-GFP-mSCF,二者與空載體MSCV-PGK-GFP分別... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

CM一MSCs茜素紅染色

圖1CM一MSCs生長(zhǎng)形態(tài)Cs成骨誘導(dǎo)分化鑒定5d左右，細(xì)胞形態(tài)逐漸由長(zhǎng)梭形變?yōu)榉叫巍Ⅶ[片鏡下可見(jiàn)細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含顆粒樣物質(zhì)。第8天時(shí)，細(xì)胞質(zhì)外均可見(jiàn)較多細(xì)小黑色顆粒，胞核顏色較淡，密集，中央可見(jiàn)類(lèi)似結(jié)節(jié)狀的結(jié)構(gòu)，部分細(xì)胞呈現(xiàn)由棕黑色細(xì)胞外基質(zhì)沉積。茜素紅染色后鏡下可見(jiàn)，呈團(tuán)樣并向四周放射，中心顏色明顯加深(圖感染后具有向成骨細(xì)胞分化的潛能

圖3CM一MSCs油紅0染色裝一GFP一sSCF、MSCV一PGK一GFP一mSCF、MSCV一PGK染法轉(zhuǎn)染Phoenix包裝細(xì)胞后，熒光顯微鏡下觀察nix細(xì)胞都表達(dá)GFP標(biāo)記蛋白(圖4)。


本文編號(hào)：3075551