無菌大鼠的人工培育及生物學(xué)特性的測(cè)定仙臺(tái)病毒膠體金免疫層析方法的建立
發(fā)布時(shí)間:2021-02-14 02:50
大鼠是目前應(yīng)用非常廣泛的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,而無菌大鼠由于排除了微生物的影響,作為實(shí)驗(yàn)工具有其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。隨著對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量的要求越來越高,本土化無菌大鼠的大規(guī)模使用成為一種趨勢(shì)。針對(duì)這種趨勢(shì),我們?cè)谇叭说墓ぷ骰A(chǔ)上,改進(jìn)條件,成功培育了無菌大鼠,并對(duì)其生物學(xué)特性進(jìn)行了測(cè)定。實(shí)驗(yàn)中對(duì)2只懷孕大鼠進(jìn)行了子宮摘除術(shù),共得到大鼠胎兒36只,離乳18只,成活率為50%。2月齡后,將性成熟的FO代無菌大鼠進(jìn)行兄妹間的交配,得到F1代無菌大鼠;同樣的方法得到F2代無菌大鼠。分別對(duì)5周齡、8周齡的無菌大鼠取血和臟器測(cè)定血常規(guī)、血生化、凝血酶原時(shí)間、免疫指標(biāo)和臟器系數(shù)。這些指標(biāo)將會(huì)為無菌大鼠的推廣應(yīng)用提供良好的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。仙臺(tái)病毒是呼吸道病毒,是引起嚙齒類動(dòng)物呼吸道疾病的主要病原,也是清潔級(jí)以上實(shí)驗(yàn)動(dòng)物必須排除的病原菌。目前檢測(cè)仙臺(tái)病毒的方法有很多,本試驗(yàn)旨在建立一種特異、敏感、快速的膠體金免疫層析檢測(cè)法。我們采用雞胚培養(yǎng)獲得含有仙臺(tái)病毒的尿囊液,超速離心后制成仙臺(tái)病毒抗原,備用。采用鞣酸-檸檬酸鈉還原法制得10nm、16nm大小的膠體金顆粒,分別標(biāo)記小鼠二抗和大鼠二抗。金標(biāo)抗體制成以后組裝試紙條:硝酸纖維素膜上...
【文章來源】:北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校
【文章頁數(shù)】:64 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
懷孕的無菌大鼠Fig.4Pregnantgermfreerats
圖8母鼠哺乳和人工哺乳無菌大鼠的體重變化Fig.8ComParisonofweightgrowingbetweengermfreerats6血液數(shù)值的測(cè)定結(jié)果6.1血常規(guī)6.1.15周齡F1代和FZ代無菌大鼠血常規(guī)的測(cè)定數(shù)值表155周齡Fl和F2代無菌大鼠血常規(guī)的數(shù)值Tab.15ResultsofroutinebloodtestinFIandFZgermfreeratsaged5weeks測(cè)定項(xiàng)目(Index)WBCRBC雌性(female)F1FZ7.27士0.386.78士0.226一41士0.126.60士0.09139.55士2.16141.55士1.560.44士0.010.41士0.0069.35士0.5661.75士0.30雄性(male)F1FZ7.18士0.557.42士0.456.27士0.086.02士0.09137.60士1.91131.10士1.570.44士0.010.37士0.0170.15士0.5862.05士0.44
圖1雞胚接毒示意圖Fig.1Sehematiediagramofchiekenembryo,于氣室接近胚位處以碘配和酒精進(jìn)行消頭沿此小孔插入0.5一1.ocm(避開血管),注入燈外焰烤化后密封小孔,置孵卵箱中孵育一次。24小時(shí)內(nèi)死亡的雞胚,認(rèn)為是非特全柜內(nèi)以無菌手續(xù)收取雞胚尿囊液。收毒放置2小時(shí),使雞胚血管收縮,血液凝固。以無菌操作小心撥開石蠟片,以鑷子緩用針頭尖小心劃破氣室膜。以無菌鑷子撥要吸到囊膜和血液。用一次性巧ml離心管液。RA)存于阿氏溶液中。紅細(xì)胞3次,然后用生理鹽水調(diào)整紅細(xì)胞
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]無菌豚鼠與普通豚鼠血液學(xué)參數(shù)的比較[J]. 張琨,孫淑華,仉慧敏,胡小燕,王艷榮,孟金萍,劉云波. 中國實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào). 2010(02)
[2]不同日齡SPF級(jí)Wistar大鼠血液生化參考值的建立[J]. 吳曉燕,王冬平,賀櫟,尚世臣,孫巖松,李桂軍,凡秀. 中國比較醫(yī)學(xué)雜志. 2008(07)
[3]SPF級(jí)與普通級(jí)新西蘭兔血液學(xué)參數(shù)的比較[J]. 李增強(qiáng),孫淑華,孟金萍,王艷蓉,楊旭,張琨,劉云波. 中國比較醫(yī)學(xué)雜志. 2008(04)
[4]動(dòng)態(tài)調(diào)節(jié)人工乳粘稠度和營養(yǎng)成分飼喂無菌大鼠效果研究[J]. 王建國,李蘭娟,盧領(lǐng)群,薩曉嬰,戴方偉. 浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版). 2007(03)
[5]性別、年齡對(duì)SPF級(jí)近交系Wistar大鼠血常規(guī)值的影響[J]. 王剛,黃小瓊,鄺少松,許競(jìng)輝,趙士海,夏冠玲. 中國比較醫(yī)學(xué)雜志. 2007(03)
[6]柯薩奇病毒IgM抗體膠體金免疫層析快速診斷試紙條的研制[J]. 張寶元,崔小岱,馬曉紅,張?chǎng)?呼守生. 中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)雜志. 2006(03)
[7]普通級(jí)、SPF級(jí)SD、Wistar大鼠血液生化常值的測(cè)定與比較[J]. 詹純列,肖育華,李新春,楊傳紅,賴晃文,王捷. 中國比較醫(yī)學(xué)雜志. 2004(02)
[8]不同周齡SPF級(jí)Wistar大鼠血常規(guī)值、主要臟器重量系數(shù)及體重、體尺的測(cè)定[J]. 楊斐,顧祖曦,施映霞,胡櫻,冷偉民. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)與管理. 2003(04)
[9]仙臺(tái)病毒[J]. 姜騫. 畜牧獸醫(yī)科技信息. 2003(12)
[10]免疫酶和膠體金技術(shù)在包蟲病診斷中的應(yīng)用[J]. 秦小平. 臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志. 2002(01)
本文編號(hào):3032994
【文章來源】:北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校
【文章頁數(shù)】:64 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
懷孕的無菌大鼠Fig.4Pregnantgermfreerats
圖8母鼠哺乳和人工哺乳無菌大鼠的體重變化Fig.8ComParisonofweightgrowingbetweengermfreerats6血液數(shù)值的測(cè)定結(jié)果6.1血常規(guī)6.1.15周齡F1代和FZ代無菌大鼠血常規(guī)的測(cè)定數(shù)值表155周齡Fl和F2代無菌大鼠血常規(guī)的數(shù)值Tab.15ResultsofroutinebloodtestinFIandFZgermfreeratsaged5weeks測(cè)定項(xiàng)目(Index)WBCRBC雌性(female)F1FZ7.27士0.386.78士0.226一41士0.126.60士0.09139.55士2.16141.55士1.560.44士0.010.41士0.0069.35士0.5661.75士0.30雄性(male)F1FZ7.18士0.557.42士0.456.27士0.086.02士0.09137.60士1.91131.10士1.570.44士0.010.37士0.0170.15士0.5862.05士0.44
圖1雞胚接毒示意圖Fig.1Sehematiediagramofchiekenembryo,于氣室接近胚位處以碘配和酒精進(jìn)行消頭沿此小孔插入0.5一1.ocm(避開血管),注入燈外焰烤化后密封小孔,置孵卵箱中孵育一次。24小時(shí)內(nèi)死亡的雞胚,認(rèn)為是非特全柜內(nèi)以無菌手續(xù)收取雞胚尿囊液。收毒放置2小時(shí),使雞胚血管收縮,血液凝固。以無菌操作小心撥開石蠟片,以鑷子緩用針頭尖小心劃破氣室膜。以無菌鑷子撥要吸到囊膜和血液。用一次性巧ml離心管液。RA)存于阿氏溶液中。紅細(xì)胞3次,然后用生理鹽水調(diào)整紅細(xì)胞
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]無菌豚鼠與普通豚鼠血液學(xué)參數(shù)的比較[J]. 張琨,孫淑華,仉慧敏,胡小燕,王艷榮,孟金萍,劉云波. 中國實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào). 2010(02)
[2]不同日齡SPF級(jí)Wistar大鼠血液生化參考值的建立[J]. 吳曉燕,王冬平,賀櫟,尚世臣,孫巖松,李桂軍,凡秀. 中國比較醫(yī)學(xué)雜志. 2008(07)
[3]SPF級(jí)與普通級(jí)新西蘭兔血液學(xué)參數(shù)的比較[J]. 李增強(qiáng),孫淑華,孟金萍,王艷蓉,楊旭,張琨,劉云波. 中國比較醫(yī)學(xué)雜志. 2008(04)
[4]動(dòng)態(tài)調(diào)節(jié)人工乳粘稠度和營養(yǎng)成分飼喂無菌大鼠效果研究[J]. 王建國,李蘭娟,盧領(lǐng)群,薩曉嬰,戴方偉. 浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版). 2007(03)
[5]性別、年齡對(duì)SPF級(jí)近交系Wistar大鼠血常規(guī)值的影響[J]. 王剛,黃小瓊,鄺少松,許競(jìng)輝,趙士海,夏冠玲. 中國比較醫(yī)學(xué)雜志. 2007(03)
[6]柯薩奇病毒IgM抗體膠體金免疫層析快速診斷試紙條的研制[J]. 張寶元,崔小岱,馬曉紅,張?chǎng)?呼守生. 中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)雜志. 2006(03)
[7]普通級(jí)、SPF級(jí)SD、Wistar大鼠血液生化常值的測(cè)定與比較[J]. 詹純列,肖育華,李新春,楊傳紅,賴晃文,王捷. 中國比較醫(yī)學(xué)雜志. 2004(02)
[8]不同周齡SPF級(jí)Wistar大鼠血常規(guī)值、主要臟器重量系數(shù)及體重、體尺的測(cè)定[J]. 楊斐,顧祖曦,施映霞,胡櫻,冷偉民. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué)與管理. 2003(04)
[9]仙臺(tái)病毒[J]. 姜騫. 畜牧獸醫(yī)科技信息. 2003(12)
[10]免疫酶和膠體金技術(shù)在包蟲病診斷中的應(yīng)用[J]. 秦小平. 臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志. 2002(01)
本文編號(hào):3032994
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