目的檢測N-�；掖及罚∟AEs）相關(guān)受體及其代謝酶在孤獨癥譜系障礙（ASD）模型鼠海馬中的表達(dá),分析NAEs信號與ASD的關(guān)聯(lián)性,為ASD的病因研究提供新的思路。方法以丙戊酸鈉（VPA）誘導(dǎo)的ASD模型鼠為研究對象,進(jìn)行生長發(fā)育和行為學(xué)檢測;采用Western Blot和RT-PCR檢測其海馬組織中NAEs相關(guān)受體,即內(nèi)源性大麻素受體（CB1R和CB2R）及其代謝酶花生四烯酸磷脂酰乙醇胺特異性磷脂酶D（NAPE-PLD）和酰胺水解酶（FAAH）的蛋白及mRNA表達(dá)水平。結(jié)果自梳實驗、三箱實驗及水迷宮實驗結(jié)果顯示:與對照組鼠相比,VPA鼠存在重復(fù)的行為模式、社會交互能力障礙及學(xué)習(xí)、記憶能力障礙;Western Blot結(jié)果顯示:與對照組鼠相比,VPA鼠海馬CB1R與FAAH蛋白表達(dá)上調(diào)（t=3.033、2.865,P<0.05）,CB2R以及NAPE-PLD蛋白表達(dá)在兩組大鼠間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（t=1.034、0.290,P>0.05）,且RT-PCR結(jié)果顯示:CB1R、CB2R、FAAH和NAPE-PLD的mRNA表達(dá)水平在兩組大鼠海馬中差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（t=2.239... 

【文章來源】：中國兒童保健雜志. 2020,28(04)

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

VPA鼠自梳時間測試結(jié)果

CB1R,CB2R,FAAH和NAPE-PLD的mRNA表達(dá)水平在兩組大鼠海馬中的差異無統(tǒng)計學(xué)意義(t=2.239、0.747、0.748、0.012,P>0.05)。見圖5。3 討 論

課題組前期采用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(LC-MS/MS)檢測外周血中NAEs的水平,采集58名ASD兒童及性別、年齡1∶1匹配的58名正常發(fā)育兒童的空腹靜脈血,發(fā)現(xiàn)ASD兒童NAEs水平明顯低于正常兒童。此外,也有一些研究支持ASD與NAEs可能存在關(guān)聯(lián)[8-9]。Siniscalco等[10]對ASD患兒外周血NAEs受體及代謝酶進(jìn)行了檢測,發(fā)現(xiàn)CB2R表達(dá)在翻譯和轉(zhuǎn)錄水平均高于對照組兒童,NAPE-PLD mRNA水平低于對照兒童;然而,意大利的一項研究卻顯示ASD兒童外周NAPE-PLD、CB2R表達(dá)上調(diào),FAAH表達(dá)降低[11];以上研究均提示NAEs代謝在ASD外周血中存在異常,但結(jié)果不盡相同,仍需要通過探究其在中樞系統(tǒng)的表達(dá)來進(jìn)一步驗證,因此本研究選用VPA誘導(dǎo)的ASD模型鼠作為研究對象,檢測其腦組織中NAEs相關(guān)受體及代謝酶的表達(dá)情況,為ASD的病因研究提供了新的方向。圖4 兩組鼠海馬組織中CB1R,CB2R,FAAH和NAPE-PLD蛋白相對表達(dá)量比較


本文編號：3032586