目的:研究mi R-181a/b通過(guò)血清反應(yīng)因子（SRF,serum response factor）對(duì)血管平滑肌細(xì)胞向合成型表型轉(zhuǎn)化及細(xì)胞增殖遷移能力的調(diào)控作用。方法:將mi R-181a/b瞬時(shí)轉(zhuǎn)染至人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞（HAo SMCs）中,用實(shí)時(shí)定量PCR、CCK-8檢測(cè)方法和transwell實(shí)驗(yàn)分別檢測(cè)平滑肌細(xì)胞的表型標(biāo)記基因的表達(dá)水平、細(xì)胞增殖能力和遷移能力的變化。生物信息學(xué)分析預(yù)測(cè)mi R-181a/b直接靶向血清反應(yīng)因子的3’UTR（非編碼區(qū)）,并通過(guò)實(shí)時(shí)定量PCR、western blot及雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)分別驗(yàn)證。結(jié)果:實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)果表示在HAo SMCs中過(guò)表達(dá)mi R-181a/b能夠抑制收縮表型標(biāo)記基因的表達(dá),促進(jìn)合成表型標(biāo)記基因的表達(dá),CCK-8與transwell實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明mi R-181a/b增強(qiáng)細(xì)胞的增殖和遷移能力。雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)與western blot結(jié)果表明Mi R-181a/b能夠直接靶向SRF,抑制SRF的蛋白表達(dá)。結(jié)論:mi R-181a/b通過(guò)直接靶向血清反應(yīng)因子的3’UTR促進(jìn)平滑肌細(xì)胞由收縮型表型向合成型表型轉(zhuǎn)化。 

【文章來(lái)源】：青海大學(xué)青海省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：60 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

平滑肌細(xì)胞的兩種表型及特征

圖 1.2 平滑肌細(xì)胞表型相關(guān)基因表達(dá)水平示意圖[1]Fig 1.2 Schematic representation of expression level of genes associated with SMCphenotype[1]注：許多基因可作為平滑肌兩種表型的標(biāo)記基因，圖中標(biāo)注的為本實(shí)驗(yàn)所選取的標(biāo)記

參與調(diào)控平滑肌細(xì)胞表型的生化因子及機(jī)制[71]


本文編號(hào)：3030723