背景:胚胎發(fā)育過程中,周期性節(jié)律出現(xiàn)的時間和作用至今尚未完全研究清楚。目的:觀察小鼠胚胎發(fā)育過程中鐘基因在不同胎齡胚胎、孕鼠肝臟和骨骼肌的時空表達特點。方法:收集ICR小鼠胎齡10-17 d全胚胎,用抗CLOCK和抗Per1多克隆抗體對胎齡10-17 d小鼠胚胎心臟、肺、肝和體壁骨骼肌進行免疫組織化學染色;胎齡10-17 d小鼠胚胎、孕鼠肝臟和股四頭肌的c DNA作模板,定量RT-PCR分析鐘基因BMAL1、CLOCK、Per1和肌調節(jié)因子myogenin、Tcap、MAZ的表達規(guī)律。結果與結論:（1）小鼠胚胎發(fā)育早期,全胚的鐘基因相對表達較低;（2）免疫組織化學顯示胎齡10至11d,心臟未見CLOCK和Per1陽性細胞,孕鼠子宮蛻膜組織中可見略高于背景的CLOCK弱陽性細胞和Per1強陽性細胞;胎齡13 d,左心房底壁和左右支氣管氣道平滑肌清晰可見CLOCK陽性細胞;胎齡14 d,體壁骨骼肌出現(xiàn)CLOCK和Per1陽性細胞;胎齡15d始,全胚的鐘基因表達明顯升高,但未呈現(xiàn)周期性節(jié)律波動,Z線相關蛋白Tcap表達顯著增高,提示肌節(jié)發(fā)育,肺葉內細支氣管壁可見CLOCK陽性細胞,右心房出現(xiàn)... 

【文章來源】：中國組織工程研究. 2019,23(01)北大核心

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文題釋義:
0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
    1.1 設計
    1.2 時間及地點
    1.3 材料
        1.3.1 實驗動物
        1.3.2 實驗用主要試劑和設備
    1.4 實驗方法
        1.4.1 小鼠胚胎和孕鼠組織的收集
        1.4.2 總RNA的提取純化和反轉錄
        1.4.3 定量聚合酶鏈式反應 （RT-qPCR） 分析
        1.4.4 免疫組織化學染色
        1.4.5 數(shù)據(jù)分析及形態(tài)學圖像采集
    1.5 主要觀察指標
2 結果Results
    2.1 鐘基因BMAL1、CLOCK和Per1在不同胎齡小鼠胚胎的表達
    2.2 鐘基因BMAL1、CLOCK和Per1在孕鼠外周器官肝臟和骨骼肌的表達
    2.3 肌調節(jié)因子myogenin在不同胎齡小鼠胚胎的表達
    2.4 小鼠胚胎發(fā)育過程中CLOCK和Per1在心臟、肺、肝和體壁骨骼肌的時空表達特點
3 討論Discussion
    3.1 周期性節(jié)律的出現(xiàn)和細胞發(fā)育分化成熟相關
    3.2 鐘基因在骨骼肌發(fā)育分化過程中的作用
    3.3 鐘基因在心臟、肺和肝發(fā)育分化過程中的作用


【參考文獻】：
期刊論文
[1]骨骼肌晝夜節(jié)律分子鐘機制的研究進展[J]. 閆銀弟,羅旭光,楊艷萍,李海榮,曹錫梅.  實用醫(yī)學雜志. 2018(07)



本文編號：3028579