目的 建立一種可以同時鑒別寨卡病毒、基孔肯雅病毒和馬雅羅病毒的檢測方法。方法 通過全球共享數(shù)據(jù)庫中檢索下載寨卡病毒、基孔肯雅病毒和馬雅羅病毒全基因組序列進(jìn)行比對分析,估計其保守區(qū),確定靶基因位置,針對這3種病毒分別設(shè)計特異性引物和探針,建立三重實時熒光定量RT-PCR檢測方法,對方法的特異性、靈敏性和重復(fù)性進(jìn)行評估。結(jié)果 所建立實時熒光定量RT-PCR檢測方法可檢出寨卡病毒、基孔肯雅病毒和馬雅羅病毒模擬樣本,最低檢出限分別為寨卡病16.22拷貝/PCR,基孔肯雅病毒12.02拷貝/PCR,馬雅羅病毒體外轉(zhuǎn)錄RNA為2.82拷貝/PCR,三重組合檢測與3種病毒分別單重檢測,靈敏度無明顯差別。與登革病毒、漢坦病毒、SFTS病毒、黃熱病毒和流感病毒等無交叉反應(yīng),檢測100份健康人體檢血清樣本未見非特異性反應(yīng),特異性為100%。重復(fù)性結(jié)果顯示,通過選取高、中、低3個不同濃度梯度的病毒核酸或體外轉(zhuǎn)錄RNA,3種病毒的標(biāo)準(zhǔn)差均控制在0.5以內(nèi),變異系數(shù)在2%以下。結(jié)論 建立了寨卡病毒、基孔肯雅病毒和馬雅羅病毒的三重實時熒光定量RT-PCR檢測方法,該方法具有良好的特異性、靈敏性和重復(fù)性。 

【文章來源】：中華實驗和臨床病毒學(xué)雜志. 2019,(06)

【文章頁數(shù)】：5 頁

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]寨卡病毒、登革病毒、基孔肯雅病毒三重?zé)晒舛縍T-PCR檢測方法的建立及評價[J]. 龔雪蕊,李阿茜,劉洋,李川,張全福,李德新,梁米芳,王世文.  病毒學(xué)報. 2018(01)



本文編號：3020136