發(fā)布時間：2021-02-04 06:47

　　目的利用基因芯片技術(shù)和實時熒光定量PCR技術(shù),結(jié)合Targets scan軟件和Western blot技術(shù),初步探討微小RNA-126（miR-126）調(diào)控CD4+T細胞功能的分子機制。方法提取野生型小鼠（對照組）和miR-126基因敲減小鼠（miR-126敲減組）脾淋巴細胞總RNA,送基因芯片測序,篩選出差異表達基因;運用Targets scan和miR-Walk軟件預(yù)測miR-126可能作用的靶分子,經(jīng)篩選后將胰島素受體底物-1（IRS-1）作為miR-126的靶分子;進一步利用實時熒光定量PCR檢測兩組小鼠脾CD4+CD62L+T細胞中IRS-1的水平變化,Western blot技術(shù)檢測兩組小鼠脾淋巴細胞蛋白激酶B（AKT）和細胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶（ERK）及其磷酸化水平。結(jié)果基因芯片分析篩選出大量差異表達的基因,與對照組比較,IRS-1的表達上調(diào)2.700 5倍。Target scan和miR-Walk軟件預(yù)測miR-126可與IRS-1的3′非翻譯區(qū)（3′UTR）結(jié)合,提示IRS-1是miR-126作用的靶分子。PCR顯示miR-126敲減組小鼠CD4+T細胞中IRS-1的表... 

【文章來源】：重慶醫(yī)學. 2020,49(02)

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

圖1 兩組CD4+T細胞的基因表達差異

運用Targets scan和miR-Walk預(yù)測miR-126的靶分子，與對照組比較，miR-126敲減組IRS-1表達上調(diào)2.700 5倍，見表1。調(diào)取鼠IRS-1基因序列，使用Target Scan軟件對其3′UTR區(qū)與miR-126進行序列比對分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)miR-126能與IRS-1的3′非翻譯區(qū)（3′UTR）結(jié)合，結(jié)果提示IRS-1可能是miR-126作用的靶分子，見圖2。圖3 miR-126調(diào)控IRS-1的表達

miR-126調(diào)控IRS-1的表達

【參考文獻】：
期刊論文
[1]miR-126敲減增強小鼠CD4+T細胞體內(nèi)活性并促進其向Th1細胞分化[J]. 崔盼盼,胡燕,陶弋婧,陳超,趙娟娟,郭萌萌,周涯,徐林.  細胞與分子免疫學雜志. 2016(03)



本文編號：3017910