目的探討MRP8/MRP14誘導(dǎo)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞細(xì)胞因子表達(dá)效應(yīng)及其作用機(jī)制。方法 Luminex x MAP液相芯片系統(tǒng)檢測(cè)重組MRP8/MRP14蛋白誘導(dǎo)腹腔巨噬細(xì)胞6種細(xì)胞因子/趨化因子的水平變化;MRP14不同結(jié)構(gòu)域融合蛋白刺激細(xì)胞,檢測(cè)TNF-α、IP-10和IL-6表達(dá);Western blot檢測(cè)MRP8/MRP14刺激細(xì)胞p38 MAPK、JNK和ERK激酶磷酸化變化;細(xì)胞預(yù)先用p38 MAPKs、JNK、ERK激酶抑制劑、TLR4和RAGE受體拮抗劑預(yù)處理,之后給予MRP8/MRP14蛋白刺激,檢測(cè)TNF-α、IP-10和IL-6表達(dá)。結(jié)果 MRP8/MRP14能顯著誘導(dǎo)TNF-α、IP-10和IL-6的表達(dá),與對(duì)照組相比,蛋白表達(dá)水平分別升高約98.2、378.6和6.3倍（P<0.01）,MRP8/MRP14不能誘導(dǎo)IL-2、IL-5和IFN-g的表達(dá);MRP14全長及其結(jié)構(gòu)域EFhand-1、EFhand-2及EFhand-1+2融合蛋白能夠誘導(dǎo)TNF-α、IP-10和IL-6的表達(dá)（P<0.01）,CT末端結(jié)構(gòu)域不具有誘導(dǎo)活性;MRP8/MRP14... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2017,37(09)北大核心

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 動(dòng)物和菌株
    1.2 主要試劑
    1.3 主要方法
        1.3.1 重組蛋白的制備
        1.3.2 小鼠腹腔巨噬細(xì)胞 （PMs） 的分離、培養(yǎng)
        1.3.3細(xì)胞培養(yǎng)上清細(xì)胞因子含量測(cè)定
        1.3.4 MRP14不同結(jié)構(gòu)域誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞細(xì)胞因子表達(dá)的效應(yīng)
        1.3.5 Western blot檢測(cè)
        1.3.6 p38 MAPK、JNK和ERK抑制劑對(duì)MRP8/MRP14誘導(dǎo)細(xì)胞因子表達(dá)的影響
        1.3.7 TLR4和RAGE受體抑制劑對(duì)MRP8/MRP14誘導(dǎo)細(xì)胞因子表達(dá)的影響
        1.3.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 MRP8/MRP14誘導(dǎo)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞細(xì)胞因子的表達(dá)
    2.2 MRP蛋白以包含有鈣結(jié)合手型 （EF-hand） 的結(jié)構(gòu)域具有誘導(dǎo)細(xì)胞因子表達(dá)的活性
    2.3 MRP8/MRP14刺激小鼠腹腔巨噬細(xì)胞p38 MAPK、JNK及ERK激酶的磷酸化變化
    2.4 p38 MAPK、JNK和ERK激酶抑制劑對(duì)MRP8/MRP14誘導(dǎo)細(xì)胞因子表達(dá)的影響
    2.5 TLR4和RAGE受體拮抗劑對(duì)MRP8/MRP14誘導(dǎo)細(xì)胞因子表達(dá)的影響
3 討論



本文編號(hào)：3001596