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轉(zhuǎn)錄因子SNAI1在小鼠植入前胚合子型基因組激活中的作用研究

發(fā)布時(shí)間:2021-01-12 06:53
  研究目的:通過(guò)觀察SNAI1在小鼠植入前胚中表達(dá)及SNAI1特異性抗體培養(yǎng)的結(jié)果,為闡明轉(zhuǎn)錄因子SNAI1在小鼠植入前胚合子基因組激活中的作用和機(jī)制提供理論依據(jù);狙芯?jī)?nèi)容:1.觀察SNAI1在小鼠1-細(xì)胞胚和2-細(xì)胞胚中的階段性表達(dá)情況。2.觀察SNAI1特異性抗體培養(yǎng)對(duì)小鼠植入前胚體外發(fā)育、合子型基因組激活(Zygotic genome activation,ZGA)、2-細(xì)胞胚DNA復(fù)制、2-細(xì)胞胚G1/S期過(guò)渡相關(guān)因子的影響。研究方法:1.SNAI1在小鼠1-細(xì)胞胚和2-細(xì)胞胚中的階段性表達(dá):于hCG注射后18h55h每隔一段時(shí)間收集KM小鼠不同細(xì)胞周期的1-細(xì)胞胚和2-細(xì)胞胚,利用細(xì)胞免疫熒光染色檢測(cè)SNAI1蛋白的表達(dá)情況;2.SNAI1特異性抗體對(duì)小鼠植入前胚體外發(fā)育的影響:收集KM小鼠1-細(xì)胞胚,分別置于KSOM培養(yǎng)液,含不同濃度SNAI1特異性抗體、兔IgG的KSOM培養(yǎng)液中培養(yǎng),觀察小鼠植入前胚體外發(fā)育情況;3.SNAI1特異性抗體對(duì)小鼠ZGA的影響:收集KM小鼠1-細(xì)胞胚,分別置于含兔IgG(1μg/ml)和SNAI1特異性抗體(1μg/m... 

【文章來(lái)源】:福建醫(yī)科大學(xué)福建省

【文章頁(yè)數(shù)】:53 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

轉(zhuǎn)錄因子SNAI1在小鼠植入前胚合子型基因組激活中的作用研究


SNAI1蛋白在小鼠1-細(xì)胞胚和2-細(xì)胞胚的表達(dá)定位A,小鼠1-細(xì)胞胚選取G1,S,G2,有絲分裂期(hCG后19h、24h、27h、30h)觀察SNAI1蛋白表達(dá)情況;B,小鼠2-細(xì)胞胚選取G1,S,G2,有絲分裂期(hCG后33h、Merged

KM小鼠,小鼠,細(xì)胞發(fā)育,培養(yǎng)液


23圖 2: SNAI1 特異抗體對(duì) KM 小鼠 1-細(xì)胞胚體外發(fā)育的影響。收集 KM 小鼠 1-細(xì)胞胚,置于 KSOM 培養(yǎng)液(空白對(duì)照)、1.0μg/ml 兔 IgG、和不同濃度(0.1μg/ml、0.5μg/ml、1.0μg/ml)SNAI1 抗體中培養(yǎng),于 hCG 注射后 45h、66h、90h、120h 觀察細(xì)胞發(fā)育率,并拍照。Bar=50μm。Figure 2: Effect of SNAI1 specific antibody on the development of 1-cell embryos in vitro.KM mouse 1-cell embryos were collected and cultured in KSOM medium, 1.0 μg/ml rabbitIgG, and SNAI1 antibody at different concentrations (0.1 μg/ml, 0.5 μg/ml, 1.0 μg/ml). Thedevelopment rate of the cells was counted at 45 h, 66 h, 90 h, and 120 h post-hCG. Bar=50μm.

KM小鼠,特異性,基數(shù),統(tǒng)計(jì)學(xué)意義


embryosembryos(%)embryos(%)(%)(%)KSOM 105 105(100.00) 103(98.10) 103(98.10) 98(93.gG1.0μg/ml 102 100(98.04) 97(95.10) 96(94.12) 94(92.I1 特異性 0.1μg/ml103 101(98.06) 100(97.09) 99(96.12) 92(89.I1 特異性 0.5μg/ml102 99(97.06) 92(90.20)* 80(80.39)* 2(1.96I1 特異性 1.0μg/ml104 103(99.04) 0(0.00)* 0(0.00)* 0(0.00以 1-細(xì)胞胚為基數(shù)進(jìn)行卡方(χ2)檢驗(yàn)!*”表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。Based on 1-cell embryo numbers and analyzed by χ2test. "*" indicates that the differencwas statistically significant (P < 0.05).

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]雌激素受體α抑制劑MPP對(duì)小鼠合子型基因組激活的影響可能與S期啟動(dòng)相關(guān)[J]. 許頌華,程霄翔,宋嬋嬋,賀琳,劉玥,連秀麗,逄麗麗,王世鄂.  中國(guó)組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志. 2015(06)
[2]CDK6及E2F-1參與細(xì)胞周期調(diào)控pRb通路的研究進(jìn)展[J]. 王瑞,達(dá)林泰,烏蘭其其格.  現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2015(03)
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[5]細(xì)胞周期調(diào)控研究進(jìn)展[J]. 張玉霞.  國(guó)外醫(yī)學(xué).遺傳學(xué)分冊(cè). 2001(05)



本文編號(hào):2972377

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