轉(zhuǎn)錄因子SNAI1在小鼠植入前胚合子型基因組激活中的作用研究
發(fā)布時(shí)間:2021-01-12 06:53
研究目的:通過(guò)觀察SNAI1在小鼠植入前胚中表達(dá)及SNAI1特異性抗體培養(yǎng)的結(jié)果,為闡明轉(zhuǎn)錄因子SNAI1在小鼠植入前胚合子基因組激活中的作用和機(jī)制提供理論依據(jù);狙芯?jī)?nèi)容:1.觀察SNAI1在小鼠1-細(xì)胞胚和2-細(xì)胞胚中的階段性表達(dá)情況。2.觀察SNAI1特異性抗體培養(yǎng)對(duì)小鼠植入前胚體外發(fā)育、合子型基因組激活(Zygotic genome activation,ZGA)、2-細(xì)胞胚DNA復(fù)制、2-細(xì)胞胚G1/S期過(guò)渡相關(guān)因子的影響。研究方法:1.SNAI1在小鼠1-細(xì)胞胚和2-細(xì)胞胚中的階段性表達(dá):于hCG注射后18h55h每隔一段時(shí)間收集KM小鼠不同細(xì)胞周期的1-細(xì)胞胚和2-細(xì)胞胚,利用細(xì)胞免疫熒光染色檢測(cè)SNAI1蛋白的表達(dá)情況;2.SNAI1特異性抗體對(duì)小鼠植入前胚體外發(fā)育的影響:收集KM小鼠1-細(xì)胞胚,分別置于KSOM培養(yǎng)液,含不同濃度SNAI1特異性抗體、兔IgG的KSOM培養(yǎng)液中培養(yǎng),觀察小鼠植入前胚體外發(fā)育情況;3.SNAI1特異性抗體對(duì)小鼠ZGA的影響:收集KM小鼠1-細(xì)胞胚,分別置于含兔IgG(1μg/ml)和SNAI1特異性抗體(1μg/m...
【文章來(lái)源】:福建醫(yī)科大學(xué)福建省
【文章頁(yè)數(shù)】:53 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
SNAI1蛋白在小鼠1-細(xì)胞胚和2-細(xì)胞胚的表達(dá)定位A,小鼠1-細(xì)胞胚選取G1,S,G2,有絲分裂期(hCG后19h、24h、27h、30h)觀察SNAI1蛋白表達(dá)情況;B,小鼠2-細(xì)胞胚選取G1,S,G2,有絲分裂期(hCG后33h、Merged
23圖 2: SNAI1 特異抗體對(duì) KM 小鼠 1-細(xì)胞胚體外發(fā)育的影響。收集 KM 小鼠 1-細(xì)胞胚,置于 KSOM 培養(yǎng)液(空白對(duì)照)、1.0μg/ml 兔 IgG、和不同濃度(0.1μg/ml、0.5μg/ml、1.0μg/ml)SNAI1 抗體中培養(yǎng),于 hCG 注射后 45h、66h、90h、120h 觀察細(xì)胞發(fā)育率,并拍照。Bar=50μm。Figure 2: Effect of SNAI1 specific antibody on the development of 1-cell embryos in vitro.KM mouse 1-cell embryos were collected and cultured in KSOM medium, 1.0 μg/ml rabbitIgG, and SNAI1 antibody at different concentrations (0.1 μg/ml, 0.5 μg/ml, 1.0 μg/ml). Thedevelopment rate of the cells was counted at 45 h, 66 h, 90 h, and 120 h post-hCG. Bar=50μm.
embryosembryos(%)embryos(%)(%)(%)KSOM 105 105(100.00) 103(98.10) 103(98.10) 98(93.gG1.0μg/ml 102 100(98.04) 97(95.10) 96(94.12) 94(92.I1 特異性 0.1μg/ml103 101(98.06) 100(97.09) 99(96.12) 92(89.I1 特異性 0.5μg/ml102 99(97.06) 92(90.20)* 80(80.39)* 2(1.96I1 特異性 1.0μg/ml104 103(99.04) 0(0.00)* 0(0.00)* 0(0.00以 1-細(xì)胞胚為基數(shù)進(jìn)行卡方(χ2)檢驗(yàn)!*”表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。Based on 1-cell embryo numbers and analyzed by χ2test. "*" indicates that the differencwas statistically significant (P < 0.05).
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]雌激素受體α抑制劑MPP對(duì)小鼠合子型基因組激活的影響可能與S期啟動(dòng)相關(guān)[J]. 許頌華,程霄翔,宋嬋嬋,賀琳,劉玥,連秀麗,逄麗麗,王世鄂. 中國(guó)組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志. 2015(06)
[2]CDK6及E2F-1參與細(xì)胞周期調(diào)控pRb通路的研究進(jìn)展[J]. 王瑞,達(dá)林泰,烏蘭其其格. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2015(03)
[3]小鼠植入前胚胎MuERV-L基因表達(dá)特征研究[J]. 邵根寶,高愛(ài)民,徐銀學(xué),丁紅梅,賈超,劉紅林. 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2007(04)
[4]Delay of ZGA initiation occurred in 2-cell blocked mouse embryos[J]. JIA JING QIU,WU WEN ZHANG,ZHI Li WU,YI HONG WANG,MIN QIAN,YI PING LIInstitute,of Biochemistry and Cell Biology,Shanghai Institutes for Biological Sciences. Chinese Academy of Sciences,200031 Shanghai,ChinaSchool of Life Science,East China Normal University. 200062 Shanghai,China. Cell Research. 2003(03)
[5]細(xì)胞周期調(diào)控研究進(jìn)展[J]. 張玉霞. 國(guó)外醫(yī)學(xué).遺傳學(xué)分冊(cè). 2001(05)
本文編號(hào):2972377
【文章來(lái)源】:福建醫(yī)科大學(xué)福建省
【文章頁(yè)數(shù)】:53 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
SNAI1蛋白在小鼠1-細(xì)胞胚和2-細(xì)胞胚的表達(dá)定位A,小鼠1-細(xì)胞胚選取G1,S,G2,有絲分裂期(hCG后19h、24h、27h、30h)觀察SNAI1蛋白表達(dá)情況;B,小鼠2-細(xì)胞胚選取G1,S,G2,有絲分裂期(hCG后33h、Merged
23圖 2: SNAI1 特異抗體對(duì) KM 小鼠 1-細(xì)胞胚體外發(fā)育的影響。收集 KM 小鼠 1-細(xì)胞胚,置于 KSOM 培養(yǎng)液(空白對(duì)照)、1.0μg/ml 兔 IgG、和不同濃度(0.1μg/ml、0.5μg/ml、1.0μg/ml)SNAI1 抗體中培養(yǎng),于 hCG 注射后 45h、66h、90h、120h 觀察細(xì)胞發(fā)育率,并拍照。Bar=50μm。Figure 2: Effect of SNAI1 specific antibody on the development of 1-cell embryos in vitro.KM mouse 1-cell embryos were collected and cultured in KSOM medium, 1.0 μg/ml rabbitIgG, and SNAI1 antibody at different concentrations (0.1 μg/ml, 0.5 μg/ml, 1.0 μg/ml). Thedevelopment rate of the cells was counted at 45 h, 66 h, 90 h, and 120 h post-hCG. Bar=50μm.
embryosembryos(%)embryos(%)(%)(%)KSOM 105 105(100.00) 103(98.10) 103(98.10) 98(93.gG1.0μg/ml 102 100(98.04) 97(95.10) 96(94.12) 94(92.I1 特異性 0.1μg/ml103 101(98.06) 100(97.09) 99(96.12) 92(89.I1 特異性 0.5μg/ml102 99(97.06) 92(90.20)* 80(80.39)* 2(1.96I1 特異性 1.0μg/ml104 103(99.04) 0(0.00)* 0(0.00)* 0(0.00以 1-細(xì)胞胚為基數(shù)進(jìn)行卡方(χ2)檢驗(yàn)!*”表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。Based on 1-cell embryo numbers and analyzed by χ2test. "*" indicates that the differencwas statistically significant (P < 0.05).
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]雌激素受體α抑制劑MPP對(duì)小鼠合子型基因組激活的影響可能與S期啟動(dòng)相關(guān)[J]. 許頌華,程霄翔,宋嬋嬋,賀琳,劉玥,連秀麗,逄麗麗,王世鄂. 中國(guó)組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志. 2015(06)
[2]CDK6及E2F-1參與細(xì)胞周期調(diào)控pRb通路的研究進(jìn)展[J]. 王瑞,達(dá)林泰,烏蘭其其格. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2015(03)
[3]小鼠植入前胚胎MuERV-L基因表達(dá)特征研究[J]. 邵根寶,高愛(ài)民,徐銀學(xué),丁紅梅,賈超,劉紅林. 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2007(04)
[4]Delay of ZGA initiation occurred in 2-cell blocked mouse embryos[J]. JIA JING QIU,WU WEN ZHANG,ZHI Li WU,YI HONG WANG,MIN QIAN,YI PING LIInstitute,of Biochemistry and Cell Biology,Shanghai Institutes for Biological Sciences. Chinese Academy of Sciences,200031 Shanghai,ChinaSchool of Life Science,East China Normal University. 200062 Shanghai,China. Cell Research. 2003(03)
[5]細(xì)胞周期調(diào)控研究進(jìn)展[J]. 張玉霞. 國(guó)外醫(yī)學(xué).遺傳學(xué)分冊(cè). 2001(05)
本文編號(hào):2972377
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