第一部分人感染A/H7N9禽流感病毒疫苗種子株安全性評價背景:隨著第1例人感染A/H7N9流感病毒于2013年2月在中國爆發(fā),至今共出現(xiàn)5波A/H7N9禽流感爆發(fā)的浪潮。截止到2018年3月2日,世界衛(wèi)生組織報道至少1567例感染病例,至少有615死亡病例。材料和方法:利用反向遺傳學(xué)PHW2000八質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染MDCK細(xì)胞,我們構(gòu)建了重組A/H7N9流感疫苗的種子株,其中血凝素（HA）和神經(jīng)氨酸酶（NA）來自A/Zhejiang/DTID-ZJU01/2013（H7N9）,其余 6 個基因片段（M、NS、NP、PA、PB1、PB2）來自A/Puerto Rico/8/34（H1N1）（PR8）。通過收集雞胚傳代的尿囊液檢測血凝素滴度,證實該重組病毒能感染SPF雞胚并在雞胚中成功復(fù)制。通過對雞胚傳代后獲取的多代毒株進行測序分析證實該疫苗種子株的遺傳穩(wěn)定性。利用小鼠以及雪貂去評價其安全性,以證實其是否符合安全疫苗種子株的條件。結(jié)果:我們成功構(gòu)建A/H7N9禽流感疫苗種子株A/ZJU01/PR8/2013,其具有良好的遺傳穩(wěn)定性和安全性,在連續(xù)傳代5次后,其HA及NA基因和氨基酸序列未發(fā)生改變... 

【文章來源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：150 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

疫苗株第1-5代與野毒株NA片段核普酸序列比對示意圖

疫苗株第1-5代與野毒株HA片段氛羞酸序列比對示意圖

１．４．２疫苗種子株毒力以及傳播力實驗結(jié)果??１．４．２．丨小鼠毒力（死亡率及ＭＬＤ５０）結(jié)果??１、ＰＲ８病毒感染組小鼠死亡率及半數(shù)致死量（ＭＬＤ５０）結(jié)果（見圖１．５）??原病毒液進行１０（＞、ＫＴ１、１（Ｔ２、１０＇?ＫＴ４稀釋后感染小鼠，小鼠死亡率分別??為１００％、１００％、１００％、８６％和１４％。距離比＝（高于５０％的死亡百分?jǐn)?shù)－５０％）?／??（高于５０％的死亡百分?jǐn)?shù)－低于５０％的死亡百分?jǐn)?shù)）＝（８６％－５０％）?／?（８６％－丨４％）??＝０．５。??ＬｏｇＭＬＤ５０＝高于５０％病毒系數(shù)度的對數(shù)＋距離比ｘ稀釋系數(shù)的對數(shù)＝－３＋０．５ｘ??１７??


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