研究背景:盡管研究表明嗅神經(jīng)具有再生能力,但感覺神經(jīng)性嗅覺損傷后,僅有少部分患者可以恢復(fù)嗅覺功能。目前對(duì)于感覺神經(jīng)性嗅覺障礙尚無滿意的治療方法。多項(xiàng)研究證實(shí),i PSCs不僅可以由體細(xì)胞重編程而來,而且其功能與胚胎干細(xì)胞（ESCs）十分類似,具有能夠向各類細(xì)胞分化的能力,無免疫排斥及倫理道德問題,本實(shí)驗(yàn)擬探索i PSCs能否在體外被誘導(dǎo)分化為嗅受體神經(jīng)元及僧帽/叢細(xì)胞,從而為細(xì)胞移植治療感覺神經(jīng)性嗅覺障礙提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。目的:探討小鼠i PSCs在體外是否具有向嗅受體神經(jīng)元和僧帽/叢細(xì)胞分化的潛能。研究?jī)?nèi)容和方法:1.小鼠i PSCs的培養(yǎng)及多能性基因鑒定:小鼠胚胎成纖維細(xì)胞提取、傳代及飼養(yǎng)層制備,小鼠i PSCs接種于飼養(yǎng)層上培養(yǎng),擬胚體（EB）制備,RT-PCR鑒定i PSCs多能性基因Oct4,Nanog,Sox2的情況。2.小鼠i PSCs與嗅上皮共培養(yǎng)及免疫學(xué)鑒定:分離小鼠嗅上皮細(xì)胞,將小鼠i PSCs與其共培養(yǎng),對(duì)分化細(xì)胞用嗅受體神經(jīng)元的標(biāo)志物（OMP,GAP43,NCAM）進(jìn)行免疫熒光及RT-PCR鑒定。3.小鼠i PSCs與嗅球共培養(yǎng)及免疫學(xué)鑒定:分離小鼠嗅球細(xì)胞,將小鼠... 

【文章來源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

MEF的形態(tài)

圖 3.2.1 小鼠 iPSCs 形態(tài)（A）貼壁生長(zhǎng)的小鼠 iPSCs 呈集落生長(zhǎng)，邊界清晰，形成細(xì)胞克隆盤（200× Scale Bar：100um））；（B）懸滴法收集的擬胚體呈球形或橢圓形，其內(nèi)細(xì)胞連接緊密（100× Scale Bar：50um）；（C）EB 球在熒光顯微鏡下在藍(lán)光的激發(fā)下發(fā)出綠色熒光（100× Scale Bar：50um）。

附圖圖 3.2.1 小鼠 iPSCs 形態(tài)（A）貼壁生長(zhǎng)的小鼠 iPSCs 呈集落生長(zhǎng)，邊界清晰，形成細(xì)胞克隆盤（200× Scale Bar：100um））；（B）懸滴法收集的擬胚體呈球形或橢圓形，其內(nèi)細(xì)胞連接緊密（100× Scale Bar：50um）；（C）EB 球在熒光顯微鏡下在藍(lán)光的激發(fā)下發(fā)出綠色熒光（100× Scale Bar：50um）。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞向內(nèi)耳毛細(xì)胞和螺旋神經(jīng)節(jié)細(xì)胞分化的體外研究[J]. 管利娜,陳燕紅,朱恒濤,陳靜,江紅群.  中華耳鼻咽喉頭頸外科雜志. 2014 (08)



本文編號(hào)：2958338