豬脂肪來源干細(xì)胞促成纖維細(xì)胞增殖、遷移的研究
發(fā)布時間:2021-01-05 00:53
目的觀察豬脂肪來源干細(xì)胞(ADSCs)對成纖維細(xì)胞的促增殖、遷移作用。方法取豬頸部皮下脂肪組織,酶消化法獲得脂肪干細(xì)胞,細(xì)胞免疫熒光及流式細(xì)胞技術(shù)檢測細(xì)胞表面抗原;原代培養(yǎng)并鑒定豬成纖維細(xì)胞;實驗分為ADSCs組+成纖維細(xì)胞和成纖維細(xì)胞+成纖維細(xì)胞組,觀察ADSCs培養(yǎng)液上清對成纖維細(xì)胞的促增殖及遷移作用;測定ADSCs培養(yǎng)液上清中血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、血小板衍生的生長因子(PDGF-AA)及轉(zhuǎn)化生長因子(TGF)-β1的含量。結(jié)果成功培養(yǎng)出豬ADSCs及豬成纖維細(xì)胞,ADSCs可促進(jìn)成纖維細(xì)胞的增殖和遷移,ADSCs能分泌VEGF、TGF-β1和PDGF-AA,其濃度分別為(765.63±56.23)pg/ml,(133.42±24.35)pg/ml和(78.43±16.56)pg/ml。結(jié)論 ADSCs可促進(jìn)成纖維細(xì)胞的增殖和遷移,為ADSCs在創(chuàng)面愈合中的應(yīng)用提供支持。
【文章來源】:臨床外科雜志. 2020年02期
【文章頁數(shù)】:5 頁
【部分圖文】:
細(xì)胞免疫熒光顯示豬脂肪干細(xì)胞CD44和CD105染色呈陽性表達(dá),而CD34和CD45染色為陰性表達(dá)(10×)
豬皮膚組織塊培養(yǎng)7天后有細(xì)胞向外生長,細(xì)胞呈長梭形,大致呈平行排列,核較大,胞質(zhì)較多,為典型的成纖維細(xì)胞形態(tài)(圖3A)。取出組織塊后,大約2周后細(xì)胞融合成單層細(xì)胞。免疫熒光檢測發(fā)現(xiàn)原代培養(yǎng)的豬成纖維細(xì)胞表達(dá)HSP47,熒光顯微鏡下顯示為綠色(圖3B)。證實原代培養(yǎng)成纖維細(xì)胞成功。3.豬脂肪干細(xì)胞促成纖維細(xì)胞增殖和遷移實驗
實驗分為實驗組(干細(xì)胞-成纖維細(xì)胞組)及對照組(成纖維細(xì)胞-成纖維細(xì)胞組),脂肪干細(xì)胞和成纖維細(xì)胞共培養(yǎng)3天后,在熒光顯微鏡下觀察,可以發(fā)現(xiàn)在實驗組紅色熒光染料標(biāo)記的成纖維細(xì)胞比對照組明顯增多(25.5±7.3 v 18.4±8.6),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見圖4。(2)Transwell板共培養(yǎng)實驗:
本文編號:2957690
【文章來源】:臨床外科雜志. 2020年02期
【文章頁數(shù)】:5 頁
【部分圖文】:
細(xì)胞免疫熒光顯示豬脂肪干細(xì)胞CD44和CD105染色呈陽性表達(dá),而CD34和CD45染色為陰性表達(dá)(10×)
豬皮膚組織塊培養(yǎng)7天后有細(xì)胞向外生長,細(xì)胞呈長梭形,大致呈平行排列,核較大,胞質(zhì)較多,為典型的成纖維細(xì)胞形態(tài)(圖3A)。取出組織塊后,大約2周后細(xì)胞融合成單層細(xì)胞。免疫熒光檢測發(fā)現(xiàn)原代培養(yǎng)的豬成纖維細(xì)胞表達(dá)HSP47,熒光顯微鏡下顯示為綠色(圖3B)。證實原代培養(yǎng)成纖維細(xì)胞成功。3.豬脂肪干細(xì)胞促成纖維細(xì)胞增殖和遷移實驗
實驗分為實驗組(干細(xì)胞-成纖維細(xì)胞組)及對照組(成纖維細(xì)胞-成纖維細(xì)胞組),脂肪干細(xì)胞和成纖維細(xì)胞共培養(yǎng)3天后,在熒光顯微鏡下觀察,可以發(fā)現(xiàn)在實驗組紅色熒光染料標(biāo)記的成纖維細(xì)胞比對照組明顯增多(25.5±7.3 v 18.4±8.6),差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見圖4。(2)Transwell板共培養(yǎng)實驗:
本文編號:2957690
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