背景:新皮質(zhì)投射神經(jīng)元細(xì)胞主要有兩種類(lèi)型,一種是皮質(zhì)內(nèi)連接新皮層上層（UL:II-IV）的神經(jīng)細(xì)胞,還有一種是皮質(zhì)下連接新皮層下層（LL:V-VI）的神經(jīng)細(xì)胞。在出生后發(fā)育期間,丘腦的傳人活動(dòng)可以調(diào)節(jié)腦中層特異性基因的表達(dá)從而控制新皮層神經(jīng)細(xì)胞形成不同的細(xì)胞結(jié)構(gòu),這對(duì)新皮層的發(fā)育是至關(guān)重要的。大腦新皮層中可以表達(dá)很多層特異性基因,這些基因的表達(dá)很多都受到神經(jīng)活性的影響,活動(dòng)依賴性基因調(diào)節(jié)對(duì)神經(jīng)元的適應(yīng)性行為以及經(jīng)驗(yàn)依賴的可塑性發(fā)育都是非常重要的。目的:本文主要研究1、在缺少內(nèi)在丘腦傳入活動(dòng)的情況下,層特異性基因的表達(dá)情況2、在外部感知活動(dòng)缺失的情況下,層特異性基因的表達(dá)情況3、活性依賴性基因調(diào)節(jié)差異性的內(nèi)在分子機(jī)制方法:1、通過(guò)基因敲除實(shí)驗(yàn),特異性敲除突觸前胞內(nèi)蛋白munc18,產(chǎn)生缺乏丘腦傳入活動(dòng)的基因敲除小鼠,檢測(cè)層特異性基因的表達(dá)情況2、小鼠出生后,通過(guò)移除小鼠兩側(cè)眼球使小鼠在發(fā)育時(shí)視覺(jué)皮層缺乏外周傳入活動(dòng)的刺激,然后檢測(cè)P19天時(shí)層特異性轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)水平3、我們從P0天的小鼠腦組織中提取原代神經(jīng)細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng),培養(yǎng)7天后,在培養(yǎng)基中提高鉀離子濃度到10mM來(lái)模擬神經(jīng)細(xì)胞極度... 

【文章來(lái)源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁(yè)數(shù)】：59 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
縮略詞表
中文摘要
英文摘要
1.引言
2.材料
    2.1 細(xì)胞系及動(dòng)物模型
    2.2 儀器與設(shè)備
    2.3 主要試劑及耗材
    2.4 試劑盒
    2.5 抗體
    2.6 試劑的配置及使用
    2.7 數(shù)據(jù)處理及制圖
3.實(shí)驗(yàn)方法
    3.1 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
        3.1.1 Neuro2a細(xì)胞培養(yǎng)
        3.1.2 熒光素酶實(shí)驗(yàn)
        3.1.3 轉(zhuǎn)染
        3.1.4 ICR小鼠腦皮層原代神經(jīng)細(xì)胞的分離與培養(yǎng)
        3.1.5 高鉀實(shí)驗(yàn)
        3.1.6 細(xì)胞免疫熒光
    3.2 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)
        3.2.1 小鼠去除眼球?qū)嶒?yàn)
        3.2.2 組織免疫熒光
        3.2.3 染色質(zhì)免疫沉淀技術(shù)
        3.2.4 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
        3.2.5 表觀遺傳學(xué)分析
        3.2.6 蛋白質(zhì)免疫印跡
4.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與數(shù)據(jù)分析
5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    5.1 ThMunc18KO小鼠腦皮層上層基因表達(dá)降低,下層基因的表達(dá)未受到影響
    5.2 ThMunc18KO小鼠中,EGR1和c-FOS在整個(gè)新皮層中的表達(dá)量均有所降低
    5.3 在視覺(jué)剝奪的青春期小鼠中,UL和LL基因表達(dá)都是正常的
    5.4 在體外實(shí)驗(yàn)中,UL和LL基因表達(dá)量都受神經(jīng)活性的影響
    5.5 EGR1和c-FOS可以結(jié)合到新皮層特異性基因的啟動(dòng)子上
    5.6 UL和LL神經(jīng)元之間不同的染色狀態(tài)
6 討論
7 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)歷
致謝
綜述
    參考文獻(xiàn)



本文編號(hào)：2952640