背景:新皮質(zhì)投射神經(jīng)元細(xì)胞主要有兩種類型,一種是皮質(zhì)內(nèi)連接新皮層上層（UL:II-IV）的神經(jīng)細(xì)胞,還有一種是皮質(zhì)下連接新皮層下層（LL:V-VI）的神經(jīng)細(xì)胞。在出生后發(fā)育期間,丘腦的傳人活動可以調(diào)節(jié)腦中層特異性基因的表達從而控制新皮層神經(jīng)細(xì)胞形成不同的細(xì)胞結(jié)構(gòu),這對新皮層的發(fā)育是至關(guān)重要的。大腦新皮層中可以表達很多層特異性基因,這些基因的表達很多都受到神經(jīng)活性的影響,活動依賴性基因調(diào)節(jié)對神經(jīng)元的適應(yīng)性行為以及經(jīng)驗依賴的可塑性發(fā)育都是非常重要的。目的:本文主要研究1、在缺少內(nèi)在丘腦傳入活動的情況下,層特異性基因的表達情況2、在外部感知活動缺失的情況下,層特異性基因的表達情況3、活性依賴性基因調(diào)節(jié)差異性的內(nèi)在分子機制方法:1、通過基因敲除實驗,特異性敲除突觸前胞內(nèi)蛋白munc18,產(chǎn)生缺乏丘腦傳入活動的基因敲除小鼠,檢測層特異性基因的表達情況2、小鼠出生后,通過移除小鼠兩側(cè)眼球使小鼠在發(fā)育時視覺皮層缺乏外周傳入活動的刺激,然后檢測P19天時層特異性轉(zhuǎn)錄因子的表達水平3、我們從P0天的小鼠腦組織中提取原代神經(jīng)細(xì)胞進行體外培養(yǎng),培養(yǎng)7天后,在培養(yǎng)基中提高鉀離子濃度到10mM來模擬神經(jīng)細(xì)胞極度... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
縮略詞表
中文摘要
英文摘要
1.引言
2.材料
    2.1 細(xì)胞系及動物模型
    2.2 儀器與設(shè)備
    2.3 主要試劑及耗材
    2.4 試劑盒
    2.5 抗體
    2.6 試劑的配置及使用
    2.7 數(shù)據(jù)處理及制圖
3.實驗方法
    3.1 細(xì)胞實驗
        3.1.1 Neuro2a細(xì)胞培養(yǎng)
        3.1.2 熒光素酶實驗
        3.1.3 轉(zhuǎn)染
        3.1.4 ICR小鼠腦皮層原代神經(jīng)細(xì)胞的分離與培養(yǎng)
        3.1.5 高鉀實驗
        3.1.6 細(xì)胞免疫熒光
    3.2 動物實驗
        3.2.1 小鼠去除眼球?qū)嶒?br>        3.2.2 組織免疫熒光
        3.2.3 染色質(zhì)免疫沉淀技術(shù)
        3.2.4 實時熒光定量PCR
        3.2.5 表觀遺傳學(xué)分析
        3.2.6 蛋白質(zhì)免疫印跡
4.實驗設(shè)計與數(shù)據(jù)分析
5 實驗結(jié)果
    5.1 ThMunc18KO小鼠腦皮層上層基因表達降低,下層基因的表達未受到影響
    5.2 ThMunc18KO小鼠中,EGR1和c-FOS在整個新皮層中的表達量均有所降低
    5.3 在視覺剝奪的青春期小鼠中,UL和LL基因表達都是正常的
    5.4 在體外實驗中,UL和LL基因表達量都受神經(jīng)活性的影響
    5.5 EGR1和c-FOS可以結(jié)合到新皮層特異性基因的啟動子上
    5.6 UL和LL神經(jīng)元之間不同的染色狀態(tài)
6 討論
7 結(jié)論
參考文獻
個人簡歷
致謝
綜述
    參考文獻



本文編號：2952640