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基于核酸探針構(gòu)型轉(zhuǎn)換的生物傳感放大技術(shù)研究

發(fā)布時(shí)間:2021-01-01 05:14
  核酸適體是從人工構(gòu)建的隨機(jī)寡核酸文庫里篩選出來與配體高效、專一結(jié)合的DNA或RNA片段,這種篩選技術(shù)稱為“指數(shù)富集的配體系統(tǒng)進(jìn)化”(SELEX)。適體能與靶物質(zhì)進(jìn)行高度特異性的結(jié)合。核酸適體的成功問世,糾正了很久以來關(guān)于核酸只是遺傳信息存儲(chǔ)和轉(zhuǎn)運(yùn)載體的看法。核酸適體能特異性地結(jié)合蛋白質(zhì)、多肽、有機(jī)物、金屬離子等多種靶物質(zhì)。相對于抗體,適體還有特異性高、親和力好、制備運(yùn)輸簡便、目標(biāo)廣泛等優(yōu)點(diǎn)。正因?yàn)檫m體這些獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn),適體作為特異性的分子識(shí)別元件被廣泛應(yīng)用于生物傳感體系中。核酸適體生物傳感器(aptamer sensor)是一種能夠連續(xù)和可逆地進(jìn)行分子識(shí)別的裝置。基本原理為待測物質(zhì)通過具有分子識(shí)別功能的接受器時(shí),固定在接受器上的親合配基與待測生物分子相互作用的瞬間發(fā)生能量轉(zhuǎn)移,經(jīng)過換能器,以電或光等方式輸出,經(jīng)過電子系統(tǒng)的放大處理和顯示,可以對待測物質(zhì)進(jìn)行定性定量檢測。這些傳感體系靈敏、快速、選擇性好,但是單純利用適配體結(jié)合靶分子前后引起信號(hào)改變的檢測方法,在提高靈敏度方面十分有限。為了實(shí)現(xiàn)對低濃度的目標(biāo)物進(jìn)行高靈敏度檢測,我們對傳感體系進(jìn)行了信號(hào)放大處理,本論文前兩部分內(nèi)容就是對適體檢... 

【文章來源】:湖南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:72 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

基于核酸探針構(gòu)型轉(zhuǎn)換的生物傳感放大技術(shù)研究


SELEX技術(shù)篩選適配體過程示意圖

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生物傳感器的原理主要取決于分子識(shí)別元件與待測物質(zhì)之間的相互作用,其基本原理(如圖1.2所示)是:待測物質(zhì)通過擴(kuò)散作用進(jìn)入生物敏感膜層,經(jīng)過分子識(shí)別后,發(fā)生反應(yīng),產(chǎn)生的信息被相應(yīng)的換能器將其轉(zhuǎn)換為可檢測、 輸出與處理的電信號(hào),便可知道待測物質(zhì)濃度,從而實(shí)現(xiàn)對待測物質(zhì)的定量檢測。圖 1.2 生物傳感器工作原理示意圖1.2.2 生物傳感器的分類生物傳感器按不同的分類原則可以有不同的分類方法,一般來說主要按以下三個(gè)方面進(jìn)行分類(如圖 1.3 所示):(1) 根據(jù)生物傳感器中信號(hào)檢測器上的敏感物質(zhì)分類生物傳感器與其它傳感器相比,最大的特點(diǎn)在于信號(hào)檢測器中含有敏感的生命物質(zhì)(細(xì)胞器、抗原、動(dòng)植物組織、酶、微生物和抗體等)。根據(jù)不同的敏感物質(zhì),可分為組織傳感器[25]、免疫傳感器[28]、微生物傳感器[24]、細(xì)胞器傳感器、DNA傳感器[27-26]、酶傳感器[23]等,生物學(xué)工作者習(xí)慣于采用這種分類方法[29]。(2) 根據(jù)生物傳感器的信號(hào)轉(zhuǎn)換器分類生物傳感

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圖 1.3 生物傳感器分類的大致示意圖3 生物傳感器中適配體的固定化方法固化技術(shù)的發(fā)展是改進(jìn)和提高傳感器性能的關(guān)鍵因素之一,固定方法不適配體的優(yōu)異性,而且還會(huì)影響傳感器的性能和檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。為廉價(jià)、靈敏度高而且選擇性好的生物傳感器,固定化技術(shù)已成為研究者求的目標(biāo)。經(jīng)過近20年的不懈努力,已建立了各種不同生物功能的固定

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本文編號(hào):2950982

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