發(fā)布時間：2020-12-25 19:27

　　目的：觀察下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)（HPA）軸中的激素和受體在皮膚增生性瘢痕組織中的表達和布狀況；檢測增生性瘢痕成纖維細胞是否具有完整的HPA功能軸,探討其與增生性瘢痕形成的關(guān)系。方法：1.應(yīng)用實時熒光定量PCR以及免疫組織化學(xué)染色法,觀察HPA軸的活性物質(zhì)CRH、CRH-Rl、POMC、MC-2R以及GR在增生性瘢痕（n=12）和正常皮膚組織（n=7）中mRNA的表達。2.免疫組織化學(xué)染色法,觀察增生性瘢痕和正常皮膚組織中CRH、CRH-Rl、ACTH、MC-2R以及GR-a陽性細胞的分布差異。3.體外培養(yǎng)增生性瘢痕和正常皮膚成纖維細胞,利用濃度為10-6M、10-7M和10-8M的CRH和ACTH分別進行干預(yù)（正常成纖維細胞只用10-7M一個濃度）,用ELISA試驗檢測上清液中ACTH、糖皮質(zhì)激素的分泌量,再用實時熒光定量PCR法檢測POMC的mRNA表達量。結(jié)果：1. CRH、CRH-Rl、POMC、MC-2R以及GR-α的mRNA均在瘢痕組織中有表達,其中除MC-2R外其余表達量均明顯低于正常皮膚（p<0.05）。2. CRH、CRH-Rl、ACTH、MC-2R以及GR-... 

【文章來源】：暨南大學(xué)廣東省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

熒光定量PCR檢測增生性癱痕和正常皮膚組織中HPA軸激素和受體mRNA表達量(均數(shù)士標準誤)

激24小時后，可于細胞上清液中檢測到ACTH的分泌。不同濃度CRH均可激起癱痕成纖維細胞分泌AcTH(p<0.05)，而這功效可被cRH一Rl受體阻滯劑抑制(圖3A)。將濃度為10一7M的CRH刺激正常皮膚成纖維細胞24小時后，同樣可激起AcTH的分泌(p<0.05)，但是相同濃度的癱痕組和正常成纖維細胞組之間沒有明顯差異(圖 3B)。AB創(chuàng)息工任H工UIV百息︸工工OV010場10一，10書阻滯劑癱痕組織正常皮膚 CRH!MICRHIMI圖3:CRH束J激癱痕和正常皮膚成纖維細胞24h后，上清液中ACTH表達量;A:將CRH組分別與空白組和阻滯劑組相比較;B:將CRH組和空白組比較:* P<0.05;**P>0.05 F19.3CRHstimulateACTHProduetioninhyPertroPhicsearfibroblasts.The seeretionofACTHinthemedia:A:eomParedthecellsineubatedwithCRHfor24h grouPwiththeeontrolgrouPandtheantalarmingrouP:B:eomParedCRHgrouPwith

吸三一︼質(zhì)酮皮︻吸二日一︼癱痕組織正常皮膚癱痕組織圖4:CRH或表達量;A，C:空白組比較;CRH【M】ACTHACTH刺激癱痕和正常皮膚成纖維細胞24h后，將CRH組分別與空白組和阻滯劑組相比較;B，D正常皮膚!M】上清液中皮質(zhì)醇:將ACTH組和 *P<0.05;**P>0.05 F19.4CRHorACTHstimulatecortieosteroneproduetioninh即 ertrophicscar fibroblasts.Thesecretionofeorticosteroneinthemedia;AandC:eomParedtheeells incubatedwithCRHfor24hgrouPwiththecontrolgrouPandtheantalarlningrouP:B andD:comParedACTHgrouPwiththeeontrolgrouP:*P<0.05;**P>0.05皮質(zhì)醉︹n吸三一︼質(zhì)皮醉︻n吸日一] 010七10一，10書阻滯劑 CRHIM】ACTH!Ml圖5:CRH或ACTH刺激癱痕成纖維細胞24h后，上清液中皮質(zhì)醇表達量;A:將CRI碩組分別與空白組和阻滯劑組相比較;B:將ACTH組和空白組比較。 Fig.5CRHorACTHstimulateeortieosteroneproduetioninh沖 ertrophicscar fibroblasts.Theseeretionofcortieosteroneinthemedia:A:comParedtheeells26


本文編號：2938254