豬鏈球菌（Streptococcus suis, S. suis）是一種革蘭氏陽(yáng)性兼性厭氧菌,根據(jù)莢膜多糖（capsular polys-accharide, CPS）抗原特性差異,可將其分為35種血清型（1-34型,1/2型）。其中以豬鏈球菌2型（S. suis serotype 2, SS2）分布最廣,致病性最強(qiáng)。人感染SS2后,通常出現(xiàn)化膿性腦膜炎、心內(nèi)膜炎、伴有耳聾、運(yùn)動(dòng)功能紊亂等癥狀。1998年和2005年我國(guó)暴發(fā)的豬鏈球菌疫情出現(xiàn)了典型的鏈球菌中毒性休克綜合征（STSS）臨床癥狀,其發(fā)病急、病程短及高致死率等特點(diǎn)引起了國(guó)內(nèi)外學(xué)者的廣泛關(guān)注。目前對(duì)豬鏈球菌,尤其是我國(guó)豬鏈球菌流行株了解甚少,缺乏對(duì)豬鏈球菌毒力因子和致病機(jī)制的全面了解。雖然有幾類(lèi)毒力因子已被確認(rèn)與豬鏈球菌的致病性相關(guān),如具有抗吞噬作用的莢膜多糖（CPS）、胞外因子（EF）、溶菌酶釋放蛋白（MRP）、溶血素（SLY）、精氨酸氨基肽酶（ADiS）等。國(guó)內(nèi)外還鑒定出了一些可能的毒力因子,但多涉及毒力相關(guān)因子的功能性鑒定。由于不同菌株所具有的毒力因子各不相同,同一種毒力因子在不同菌株中的作用也不一定相同,同時(shí)單獨(dú)研究毒... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)人民解放軍軍事科學(xué)院北京市

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

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芯片樣點(diǎn)排列示意圖（注：S表示subarray）

圖2-1 芯片樣點(diǎn)排列示意圖（注：S 表示subarray）DNA芯片轉(zhuǎn)錄譜分析采取以下的實(shí)驗(yàn)方案：2×2×2方案（圖2-2）：野生株和突變株相同培養(yǎng)條件下提取兩份RNA（生物學(xué)重復(fù)），每份RNA逆轉(zhuǎn)錄成兩份cDNA（技術(shù)重復(fù)）共得到8份單標(biāo)cDNA，對(duì)應(yīng)兩兩混合配對(duì)，共4張芯片，芯片上一個(gè)基因兩個(gè)點(diǎn)（測(cè)量重復(fù)），每個(gè)基因最終得到8個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn)。

13,000rpm 離心。將上清13,000rpm 離心，棄盡異丙醇，室 DNase buffer 中。核酸沉淀溶解于下作用。解液，。加入 MPC 蛋白沉淀劑，-2中。3,000rpm 離心，棄去異丙醇。加入 75%乙醇，3,000rpm 離心，棄盡 RNA，取 1μl 用于紫外分光光度計(jì)取 RNA 的質(zhì)量。


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