目的:探索BALB/c小鼠新生期口服滅活幽門螺桿菌(H.pylori)后對胃黏膜是否具有免疫保護(hù)作用。方法:將32只BALB/c小鼠分為四組進(jìn)行實驗。第Ⅰ組為PBS對照組,第II組為滅活H.pylori組,第Ⅲ組為滅活H.pylori加大腸桿菌不耐熱腸毒素B亞單位(LTB)組,第IV組為正常對照組。用相應(yīng)抗原成分對Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組出生24 h以內(nèi)的新生BALB/c小鼠進(jìn)行灌胃免疫,末次免疫兩周后,將小鼠用108CFU的幽門螺桿菌SS1株進(jìn)行活菌灌胃攻擊,連續(xù)攻擊兩天,每天兩次。在攻擊后的第28天,將各組小鼠處死,取胃組織進(jìn)行活菌計數(shù)及組織病理學(xué)炎性評分。結(jié)果:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組慢性炎癥評分分別為2.25±0.46、2.12±0.35、1.5±0.53、0.25±0.46,炎癥活動度評分為2.12±0.35、2.12±0.35、1.37±0.52、0.25±0.46;除Ⅰ、Ⅱ組間無統(tǒng)計學(xué)意義外,其余組間差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組細(xì)菌定植量分別為1.33±0.21、1.18±0.27、1.05±0.37×105CFU/1個胃,Ⅳ組細(xì)菌定植量<4×102CFU/1... 

【文章來源】：中國免疫學(xué)雜志. 2016年02期 北大核心

【文章頁數(shù)】：4 頁

【部分圖文】：

各組慢性炎癥及炎癥活動度評分比較

⒀躉?訃翱燜匐迕甘匝椴⒓剖??1.3統(tǒng)計學(xué)分析統(tǒng)計學(xué)處理結(jié)果采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，組間比較采用方差分析，所得數(shù)據(jù)以x±s表示，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。2結(jié)果2.1活菌攻擊后胃組織炎癥評分將各組BALB/c小鼠采集的胃組織標(biāo)本進(jìn)行炎癥評分，從圖1中可以看出Ⅲ組的炎癥評分明顯低于Ⅰ、Ⅱ組，說明使用滅活H.pylori與LTB共同免疫小鼠后，能降低H.pylori攻擊后對胃組織的病理損傷作用，結(jié)果顯示具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)(如圖1所示)。Ⅰ、Ⅱ組病理切片中固有層可見大量淋巴細(xì)胞與中性粒細(xì)胞浸潤(如圖2)。Ⅲ組的病理切片中亦有不同程圖1各組慢性炎癥及炎癥活動度評分比較Fig．1ThegradesofinflammationseverityandativityNote:ComparedwithgroupsⅠ，ⅡandⅣ，*.P＜0.05;ComparedwithgroupsⅠ，ⅡandⅢ，＊＊.P＜0.05.度的炎性反應(yīng)，但評分低于Ⅰ、Ⅱ組。2.2活菌攻擊后H.pylori定植量檢測(表2)從表2中可以看出Ⅲ組的活菌定植量低于Ⅰ、Ⅱ組，說明使用滅活H.pylori與LTB共同免疫小鼠后，能減少活菌攻擊后的H.pylori體內(nèi)定植量，結(jié)果具統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。3討論早在90年代初期，有關(guān)H.pylori疫苗的研究就已經(jīng)開始。近年來，有著較多關(guān)于H.pylori疫苗的研究。根據(jù)疫苗的構(gòu)成不同，可將其分為全菌疫苗、亞單位疫苗、表位疫苗、載體疫苗等。亞單位疫苗的結(jié)構(gòu)與組成較為明確，是可引起免疫保護(hù)的一類蛋白質(zhì)、脂多糖等微生物組分。與亞單位疫苗相比，全菌疫苗的優(yōu)點是能誘發(fā)針對細(xì)菌各種抗原的免疫應(yīng)答［8］。但是這些蛋白介導(dǎo)的免疫應(yīng)答機(jī)制仍然不十分清楚，另一方面，現(xiàn)在仍然不能確定對H.pylori整個菌體有效的理想疫苗，與其誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答的效應(yīng)因子是什么(例如抗體、CD4+亞群、細(xì)胞因子等)。雖?

100，1∶1000稀釋，分別接種100μl到含H.pylori選擇性添加劑的哥倫比亞血瓊脂內(nèi)，用傾注法培養(yǎng)后進(jìn)行菌落計數(shù)，最后將平皿置培養(yǎng)罐內(nèi)，充入混合氣體，37℃培養(yǎng)5～7d，觀察菌落，進(jìn)行涂片染色鏡檢、觸酶、氧化酶及快速脲酶試驗并計數(shù)。1.3統(tǒng)計學(xué)分析統(tǒng)計學(xué)處理結(jié)果采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析，組間比較采用方差分析，所得數(shù)據(jù)以x±s表示，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。2結(jié)果2.1活菌攻擊后胃組織炎癥評分將各組BALB/c小鼠采集的胃組織標(biāo)本進(jìn)行炎癥評分，從圖1中可以看出Ⅲ組的炎癥評分明顯低于Ⅰ、Ⅱ組，說明使用滅活H.pylori與LTB共同免疫小鼠后，能降低H.pylori攻擊后對胃組織的病理損傷作用，結(jié)果顯示具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)(如圖1所示)。Ⅰ、Ⅱ組病理切片中固有層可見大量淋巴細(xì)胞與中性粒細(xì)胞浸潤(如圖2)。Ⅲ組的病理切片中亦有不同程圖1各組慢性炎癥及炎癥活動度評分比較Fig．1ThegradesofinflammationseverityandativityNote:ComparedwithgroupsⅠ，ⅡandⅣ，*.P＜0.05;ComparedwithgroupsⅠ，ⅡandⅢ，＊＊.P＜0.05.度的炎性反應(yīng)，但評分低于Ⅰ、Ⅱ組。2.2活菌攻擊后H.pylori定植量檢測(表2)從表2中可以看出Ⅲ組的活菌定植量低于Ⅰ、Ⅱ組，說明使用滅活H.pylori與LTB共同免疫小鼠后，能減少活菌攻擊后的H.pylori體內(nèi)定植量，結(jié)果具統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。3討論早在90年代初期，有關(guān)H.pylori疫苗的研究就已經(jīng)開始。近年來，有著較多關(guān)于H.pylori疫苗的研究。根據(jù)疫苗的構(gòu)成不同，可將其分為全菌疫苗、亞單位疫苗、表位疫苗、載體疫苗等。亞單位疫苗的結(jié)構(gòu)與組成較為明確，是可引起免疫保護(hù)的一類蛋白質(zhì)、脂多糖等微生物組分。與亞單位疫苗相比，全菌疫苗的優(yōu)點是能誘發(fā)針對細(xì)菌各種抗原的免疫應(yīng)答［

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]兒童幽門螺桿菌感染與胃黏膜病理變化的關(guān)系[J]. 查健忠,戴星,李冰冰.  臨床兒科雜志. 2010(01)
[2]治療性疫苗的發(fā)展現(xiàn)狀與應(yīng)用前景[J]. 閆東梅,朱迅.  中國生物制品學(xué)雜志. 2005(06)
[3]重組幽門螺桿菌過氧化氫酶脂質(zhì)體疫苗免疫預(yù)防研究[J]. 黃文,潘雪,李兆申,白楊,王繼德,周殿元.  胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志. 2005(04)



本文編號：2933134