帕金森病基因編輯猴模型誘導(dǎo)多能干細(xì)胞的建立及研究
發(fā)布時(shí)間:2020-12-22 10:50
研究背景:帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是一種神經(jīng)退行性疾病,其主要病理學(xué)特征是中腦黑質(zhì)(Substantial nigra,SN)的多巴胺能神經(jīng)元(Dopaminergic neurons,DAns)的功能異常。PD的治療目前主要靠藥物,早期患者通過藥物治療多可很好的控制癥狀,至疾病中期雖然藥物仍有一定的作用,但常因開關(guān)效應(yīng)等運(yùn)動并發(fā)癥的出現(xiàn)導(dǎo)致生活質(zhì)量的下降。利用多能干細(xì)胞(Pluripotent stem cells,PSCs)對PD進(jìn)行細(xì)胞治療成為最有希望從根本上治愈患者的方法,其中誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(Induced pluripotent stem cells,i PSCs)和胚胎干細(xì)胞(Embryonic stem cells,ESCs)的研究與應(yīng)用最為引人矚目。i PSCs可以從患者自身的體細(xì)胞中重編程得到,倫理爭議和免疫排斥問題相對較小。但由于個體差異,使用時(shí)必須一對一建系,細(xì)胞間差異較大。ESCs來源單一,一次建系可供多人使用,但同時(shí)也帶了免疫排斥和倫理道德上的問題。近年,美國、日本和中國等國家都相繼報(bào)道了利用多能干細(xì)胞治療PD的案例,但臨床應(yīng)用...
【文章來源】:昆明理工大學(xué)云南省
【文章頁數(shù)】:82 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
自體細(xì)胞移植示意圖1Figure1Autologouscelltransplantation.細(xì)胞自體移植存在的問題細(xì)胞來源問題
圖 2 ESCs 建系過程圖 1。Figure 2 Derivation of ESCs.表 2 三種 ESCs 建系體系建系效率Tale 2 Efficiency of Three Systems for Derivation of ESCs體系 建系胚胎個數(shù)/個 得到細(xì)胞系/株 成功率PSGro 16 5 31.25%(5/16)FBS 18 4 22.22%(4/18)LCDM 24 5 20.8%(5/24)3.1.2 誘導(dǎo)多能干細(xì)胞建系
圖 4 iPS 細(xì)胞誘導(dǎo)過程。 1a. 加仙臺病毒前成纖維細(xì)胞,D0;b. 加病毒后 14天長出的 iPS 克隆;c. iPSCs 純化傳代,P9,比例尺 200um。Figure 4 Derivation process of iPSCs. a. Fibroblasts before add Sendai virus, D0; b. iPSclones grown 14 days after virus addition; c. Purification and passage of iPSCs, P9, scale bar200um.3.2 多能干細(xì)胞系鑒定3.2.1 多能性鑒定免疫熒光染色是為了鑒定細(xì)胞系的全能性,PSCs 中高表達(dá) SOX 2、OCT4、Nanog、TRA-1-60、TRA-1-81 等基因,因此這些蛋白的表達(dá)可以證明細(xì)胞的全能性[99]。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]基于人胚胎干細(xì)胞健康安全評價(jià)體系的構(gòu)建[J]. 俞光巖,曹彤,鄒曉暉,張學(xué)慧,傅歆,彭雙清,鄧旭亮,李盛林,劉鶴,肖苒,歐陽宏偉,彭暉,陳曉,趙增明,王曉穎,方海琴,路璐,任玉蘭,徐明明. 北京大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2016(01)
[2]無血清培養(yǎng)人胚胎干細(xì)胞的體系研究與進(jìn)展[J]. 張哲,曾憲卓,魯菲,郭明輝,董慧君. 中國組織工程研究. 2015(41)
本文編號:2931628
【文章來源】:昆明理工大學(xué)云南省
【文章頁數(shù)】:82 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
自體細(xì)胞移植示意圖1Figure1Autologouscelltransplantation.細(xì)胞自體移植存在的問題細(xì)胞來源問題
圖 2 ESCs 建系過程圖 1。Figure 2 Derivation of ESCs.表 2 三種 ESCs 建系體系建系效率Tale 2 Efficiency of Three Systems for Derivation of ESCs體系 建系胚胎個數(shù)/個 得到細(xì)胞系/株 成功率PSGro 16 5 31.25%(5/16)FBS 18 4 22.22%(4/18)LCDM 24 5 20.8%(5/24)3.1.2 誘導(dǎo)多能干細(xì)胞建系
圖 4 iPS 細(xì)胞誘導(dǎo)過程。 1a. 加仙臺病毒前成纖維細(xì)胞,D0;b. 加病毒后 14天長出的 iPS 克隆;c. iPSCs 純化傳代,P9,比例尺 200um。Figure 4 Derivation process of iPSCs. a. Fibroblasts before add Sendai virus, D0; b. iPSclones grown 14 days after virus addition; c. Purification and passage of iPSCs, P9, scale bar200um.3.2 多能干細(xì)胞系鑒定3.2.1 多能性鑒定免疫熒光染色是為了鑒定細(xì)胞系的全能性,PSCs 中高表達(dá) SOX 2、OCT4、Nanog、TRA-1-60、TRA-1-81 等基因,因此這些蛋白的表達(dá)可以證明細(xì)胞的全能性[99]。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]基于人胚胎干細(xì)胞健康安全評價(jià)體系的構(gòu)建[J]. 俞光巖,曹彤,鄒曉暉,張學(xué)慧,傅歆,彭雙清,鄧旭亮,李盛林,劉鶴,肖苒,歐陽宏偉,彭暉,陳曉,趙增明,王曉穎,方海琴,路璐,任玉蘭,徐明明. 北京大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2016(01)
[2]無血清培養(yǎng)人胚胎干細(xì)胞的體系研究與進(jìn)展[J]. 張哲,曾憲卓,魯菲,郭明輝,董慧君. 中國組織工程研究. 2015(41)
本文編號:2931628
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