目的泛福舒（OM85-BV）是一種含8種常見呼吸道病原菌的凍干溶解物,通過調節(jié)巨噬細胞的活性和細胞因子的產生,在抗感染免疫中發(fā)揮重要作用。本研究主要探討泛福舒對小鼠RAW264.7巨噬細胞炎癥因子的調節(jié)作用及相關機制研究。方法體外培養(yǎng)小鼠RAW264.7巨噬細胞,（1）泛福舒分別以不同的時間點及不同的濃度梯度刺激RAW264.7細胞,用RT-PCR和ELISA分別檢測IL-1β, IL-6和TNF-α mRNA和蛋白的表達；細胞免疫熒光檢測（?）RAW264.7細胞表面TLR4和TLR2表達情況；用小分子siRNA干擾技術分別沉默TLR4, TLR2, MyD88和TRAM基因的表達,RT-PCR和ELISA分別檢測IL-1β, IL-6, TNF-α mRNA及蛋白的表達變化；（2）泛福舒以不同時間點刺激RAW264.7細胞,Western Blot檢測AKT, ERK1/2, P38的磷酸化水平；用（?）AKT, ERK1/2, P38特異性抑制劑Ly294002, U0126和SB203580分別刺激RAW264.7細胞,RT-PCR和ELISA分別檢測IL-1β, IL-6, ... 

【文章來源】：華中科技大學湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數】：129 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

泛福舒以時間依賴的方式誘導Raw264.7細胞分泌IL-lp，IL-6和TNF-aA. IL-lp,IL-6和TNF-amRNA表達水平（注：與Oh組相比，><0.05)

華中科技大學博士學位論文濃度起逐漸升高，與(Hig/ml組相比差異具有統計學意義（><0.05,見圖2B)。A B12 ^ 12 0押 ml Opg ml^ [ I 25Mg m) * E I I 25明 ml ★■y 10 50沖 ml T \ 10 — 50ng ml T^ 7777X 100^ ml Jni 5{‘ VTTTX lOOMgml ^E o i ^0. 1！ i 1 ii■ 6 . || 5 6 . ||i i - i k Fill4 J ni "4- J J nilIL-lp IL-6 TNF-a IL-lp IL-6 TNF-a圖2泛福舒以濃度依賴的方式誘導RAW264.7細胞分泌IL-lp, IL-6和TNF-aA. IL-lp, IL-6和TNF-a mRNA表達水平（注：與0^ig/ml組相比，><0.05)B. IL-ip, IL-6和TNF-a分泌水平（注：與0呢/ml組相比，><0.05)2. TLR2/TLR4通路參與泛福舒誘導IL-ip, IL-6和TNF-a的產生(1) TLR2和TLR4在RAW264.7細胞中的表達細胞免疫焚光示TLR2和TLR4表達于RAW264.7細胞膜表面，見圖3。28

圖 7. MyD88、TRAM-siRNA 干擾效率A. MyD88-siRNA 干擾效率（Western Blot 和 RT-PCR)B. TRAM-siRNA 干擾效率（Western Blot 和 RT-PCR)


本文編號：2931066