幽門螺桿菌（Helicobacterpylori,Hp）感染是胃炎、胃十二指腸潰瘍及胃癌等疾病的重要危險因素。有效的疫苗接種將是在人群水平上預(yù)防和控制Hp感染的重要途徑。在抗Hp感染免疫應(yīng)答中,Hp中性粒細(xì)胞激活蛋白A（neutrophil-activating protein A,NapA）和黏附素 A（adhesin A,HpaA）發(fā)揮重要作用,是目前Hp疫苗研究中兩種重要的候選抗原。乳酸乳球菌（Lactococcus lactis,L.lactis）目前已被廣泛地用作疫苗載體,用于抗原蛋白的表達(dá)和遞送。目的用L.lactio NZ3900/pNZ8149食品級表達(dá)載體分別構(gòu)建表達(dá)Hp hpaA和napA基因的重組菌株,經(jīng)小鼠免疫實(shí)驗(yàn)鑒定其免疫保護(hù)效果,并初步探討其免疫保護(hù)機(jī)制,以促進(jìn)Hp 口服疫苗的研發(fā)。方法1.應(yīng)用基因重組技術(shù)構(gòu)建L.lactis基因重組菌株NZ3900/pNZ8149-hpaA和NZ3900/pNZ8149-napA,用nisin誘導(dǎo)表達(dá)HpaA和NapA蛋白,蛋白的免疫反應(yīng)性通過SDS-PAGE和Western blotting法鑒定。2.SPF級BALB/... 

【文章來源】：鄭州大學(xué)河南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：90 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．１總技術(shù)路線圖??４??

以L.laetir為載體重組菌株構(gòu)建的技術(shù)路線圖

篩選陽性菌落，ＰＣＲ，雙酶切及測序鑒定??ＮＺ３９００／ｐＮＺ８１４９－／�。穑�?和?ＮＺ３９００／ｐＮＺ８１４９－？ｏ／＾??圖１．２以Ｌ．／ａｃｆｉｉ為載體重組菌株構(gòu)建的技術(shù)路線圖??Ａ??Ｎｃｏｌ??＾?

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]生長分化因子(BMP11)重組質(zhì)粒在工程菌株中的穩(wěn)定性研究[J]. 郝丹,尤倩倩,郝偉,梁曉琳,袁靖琳,李全陽.  食品工業(yè)科技. 2017(19)
[2]幽門螺桿菌中性粒細(xì)胞激活蛋白在乳酸菌中的表達(dá)及免疫活性[J]. 彭曉燕,張榮光,段廣才,孫楠,王琛,張凌寒.  中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志. 2017(10)
[3]中性粒細(xì)胞浸潤預(yù)測幽門螺桿菌感染的應(yīng)用[J]. 徐小青,浦儉斌,曹勤.  世界華人消化雜志. 2016(18)
[4]Use of probiotics in the fight against Helicobacter pylori[J]. Paolo Ruggiero.  World Journal of Gastrointestinal Pathophysiology. 2014(04)
[5]Immune evasion strategies used by Helicobacter pylori[J]. Taslima T Lina,Shatha Alzahrani,Jazmin Gonzalez,Irina V Pinchuk,Ellen J Beswick,Victor E Reyes.  World Journal of Gastroenterology. 2014(36)
[6]Role of Toll-like receptors in Helicobacter pylori infection and immunity[J]. Sinéad M Smith.  World Journal of Gastrointestinal Pathophysiology. 2014(03)
[7]大腸桿菌外源蛋白表達(dá)載體穩(wěn)定性的研究進(jìn)展[J]. 江偉華,劉益麗,江明鋒.  生物技術(shù)通報(bào). 2014(05)
[8]Immune responses to Helicobacter pylori infection[J]. Mati Moyat,Dominique Velin.  World Journal of Gastroenterology. 2014(19)
[9]Helicobacter pylori neutrophil-activating protein:From molecular pathogenesis to clinical applications[J]. Hua-Wen Fu.  World Journal of Gastroenterology. 2014(18)
[10]Seroepidemiology of Helicobacter pylori infection in elderly people in the Beijing region, China[J]. Mei Zhang,Ying-Zhi Zhou,Xiao-Ying Li,Zhe Tang,Hong-Ming Zhu,Yan Yang,Jagadish K Chhetri.  World Journal of Gastroenterology. 2014(13)

博士論文
[1]幽門螺桿菌omp11和lpp20基因的克隆及表達(dá)產(chǎn)物免疫原性和保護(hù)效果研究[D]. 張榮光.鄭州大學(xué) 2004

碩士論文
[1]口服表達(dá)幽門螺桿菌抗原的重組乳酸乳球菌對小鼠免疫保護(hù)作用[D]. 史慶豐.鄭州大學(xué) 2013
[2]乳酸菌表達(dá)載體的構(gòu)建及初步應(yīng)用[D]. 代偉麗.天津科技大學(xué) 2012



本文編號：2925433