目的·篩選耐藥肺炎克雷伯菌的噬菌體,并檢驗其是否符合耐藥肺炎克雷伯菌噬菌體庫的入庫要求。方法·將分離自1例泌尿系統(tǒng)感染患者的1株耐藥肺炎克雷伯菌作為宿主菌,從環(huán)境污水中進行噬菌體篩選,分離、純化噬菌體并進行生物學特性的研究及噬菌體基因組測序,并基于全基因組數(shù)據(jù)分析其使用安全性。結果·分離到1株耐藥肺炎克雷伯菌噬菌體,將其命名為JD902,屬有尾目,裂解量為88 pfu/cell,在pH值4.0～11.0范圍內(nèi)都能保持較好的活性�；蚪M分析表明,其不攜帶抗生素抗性基因和毒力因子基因。結論·JD902為1株烈性噬菌體,體外穩(wěn)定性及安全性均較高,可以納入臨床治療使用噬菌體庫。
【部分圖文】：

使用透射電鏡觀察噬菌體JD902形態(tài)，其由多面體對稱的頭部組成，屬于有尾目噬菌體，其頭部直徑約為82 nm（圖1）。2.2 噬菌體JD902的生物學特性

分別按MOI=10、1、0.1、0.01、0.001混合噬菌體和宿主菌，檢測共培養(yǎng)后的噬菌體效價；實驗結果發(fā)現(xiàn)，其最佳MOI為0.001～0.01（圖2）。2.2.2噬菌體JD902的體外殺菌活性

以橫坐標表示噬菌體和宿主細菌作用時間，以縱坐標表示未被宿主菌吸附的噬菌體的百分率繪制噬菌體的吸附曲線。以橫坐標表示噬菌體和宿主菌共同作用的時間，縱坐標表示培養(yǎng)混合物中噬菌體的效價，繪制噬菌體一步生長曲線。根據(jù)吸附曲線的結果，該噬菌體與宿主菌共同孵育6 min后，約93.2%的噬菌體可吸附于宿主菌上。從噬菌體的一步生長曲線來看，其潛伏期約為10 min，裂解期約為50 min，隨后進入穩(wěn)定期，噬菌體JD902的溶菌周期約60 min（圖4）。根據(jù)噬菌體裂解量計算公式：噬菌體裂解量=穩(wěn)定期噬菌體效價/感染初期宿主菌數(shù)量，該噬菌體裂解量約為88 pfu/cell，即平均每個宿主菌裂解釋放約88個子代噬菌體。圖4 噬菌體JD902的吸附曲線（A）和一步生長曲線（B)
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本文編號：2875208