肺炎克雷伯菌轉(zhuǎn)錄調(diào)控子RcsAB對(duì)galF基因調(diào)控研究
發(fā)布時(shí)間:2020-11-05 13:45
目的 探究肺炎克雷伯菌轉(zhuǎn)錄調(diào)控子RcsAB對(duì)莢膜多糖表型的影響及對(duì)莢膜多糖相關(guān)基因galF的調(diào)控機(jī)制。方法 將肺炎克雷伯菌NTUH-K2044的野生株與rcsA、rcsB、rcsAB的敲除株和回補(bǔ)株進(jìn)行毒力實(shí)驗(yàn)和莢膜多糖相關(guān)表型實(shí)驗(yàn)。采用細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn),莢膜多糖定量實(shí)驗(yàn)以及莢膜多糖電鏡觀察,探究rcsA、rcsB基因?qū)Ψ窝卓死撞那v膜多糖的影響。同時(shí)從分子水平驗(yàn)證轉(zhuǎn)錄調(diào)控子RcsAB可能通過(guò)調(diào)控莢膜多糖相關(guān)基因galF來(lái)影響莢膜多糖形成,qRT-PCR分析調(diào)控是上調(diào)或下調(diào),并運(yùn)用EMSA和DNaseI足跡實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證結(jié)合的基序,全面闡述RcsAB對(duì)gal F基因的調(diào)控。結(jié)果 莢膜多糖相關(guān)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示Rcs AB轉(zhuǎn)錄調(diào)控子正調(diào)控莢膜多糖的功能,且細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)顯示RcsAB調(diào)控子影響菌株毒力形成。qRT-PCR結(jié)果顯示RcsAB正調(diào)控galF基因的轉(zhuǎn)錄,EMSA結(jié)果說(shuō)明galF基因不單獨(dú)與RcsA、RcsB結(jié)合,而是與RcsAB蛋白復(fù)合物結(jié)合,通過(guò)DNaseI足跡實(shí)驗(yàn)顯示RcsAB蛋白復(fù)合物能直接結(jié)合到galF基因啟動(dòng)子區(qū)-177bp至-155bp之間的序列上。結(jié)論 RcsAB蛋白復(fù)合物通過(guò)直接調(diào)控莢膜多糖相關(guān)基因galF正調(diào)控莢膜多糖的形成,從而影響菌株的毒力。
【學(xué)位單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位年份】:2018
【中圖分類】:R378
【文章目錄】:
英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照
中文摘要
英文摘要
前言
1 材料
2 方法
3 結(jié)果
4 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文
【參考文獻(xiàn)】
本文編號(hào):2871716
【學(xué)位單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位年份】:2018
【中圖分類】:R378
【文章目錄】:
英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照
中文摘要
英文摘要
前言
1 材料
2 方法
3 結(jié)果
4 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
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1 Herwig Cerwenka;;Pyogenic liver abscess: Differences in etiology and treatment in Southeast Asia and Central Europe[J];World Journal of Gastroenterology;2010年20期
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