目的探討阿米洛利聯(lián)合鹽酸羥考酮注射液對癌痛模型小鼠脊髓趨化因子CXC配體13(CXCL13)及脊髓背角即刻早期基因c-fos表達(dá)的影響。方法選取60只BALB/c小鼠進(jìn)行研究,將其隨機(jī)分為五組,分別為正常組(A組)、皮膚癌痛組(B組)、生理鹽水組(C組)、阿米洛利組(D組)及阿米洛利聯(lián)合鹽酸羥考酮注射液組(E組),每組12只。除A組外,其余組小鼠均采用小鼠一側(cè)后跖面皮下注射Walker256癌細(xì)胞懸液的方法來建立皮膚癌痛模型。建模成功后,A組和B組小鼠不給于任何干預(yù)措施,C組給予經(jīng)鞘內(nèi)注射0.9%氯化鈉注射液10μl,D組給予經(jīng)鞘內(nèi)注射阿米洛利溶液10μl,濃度為1.5μg/μl,E組在D組基礎(chǔ)上同時(shí)給予靜脈注射0.2 mg/kg鹽酸羥考酮注射液。測定各組小鼠給藥前后不同時(shí)間點(diǎn)的疼痛反應(yīng),測定結(jié)束后取脊髓組織,應(yīng)用Western blot法及反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法測定脊髓CXCL13和脊髓背角c-fos表達(dá)情況。結(jié)果鞘內(nèi)注射前30 min,B組、C組、D組、E組小鼠的機(jī)械痛閾值較接種前均明顯降低(t分別=44.18、34.50、32.05、40.18,P均0.05),且B組、C組、D組、E組小鼠鞘內(nèi)注射后30 min、60 min、120 min和180 min機(jī)械痛閾值均明顯低于A組(t分別=29.74、31.80、34.44、32.93;41.09、55.42、34.10、26.93;33.37、45.95、21.65、14.53;33.37、35.67、21.72、13.75,P均0.05),E組鞘內(nèi)注射后60 min、120 min和180 min的機(jī)械痛閾值明顯高于D組(t分別=42.52、32.56、26.63,P均0.05)。與A組比較,B組、C組、D組小鼠脊髓CXCL13蛋白表達(dá)、CXCL13 mRNA表達(dá)均上調(diào)(t分別=5.10、4.59、2.35;6.13、5.51、2.39,P均0.05),而E組小鼠脊髓CXCL13蛋白表達(dá)、CXCL13 mRNA表達(dá)與A組比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t分別=0.58、0.21,P均0.05)。與A組比較,B組、C組、D組、E組小鼠脊髓背角c-fos蛋白表達(dá)、c-fos mRNA表達(dá)均上調(diào)(t分別=13.02、8.58、8.67、6.20;17.48、12.13、12.95、8.15,P均0.05),但E組c-fos蛋白表達(dá)、c-fos mRNA表達(dá)明顯低于B組、C組、D組(t分別=9.34、5.44、4.15;12.78、7.79、6.80,P均0.05)。結(jié)論阿米洛利聯(lián)合鹽酸羥考酮注射液可用于皮膚癌小鼠癌痛過敏的緩解,該機(jī)制可能與兩者聯(lián)合可抑制脊髓和脊髓背角組織CXCL13、c-fos的表達(dá)有關(guān)。
【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和分組
    1.2 方法
        1.2.1 細(xì)胞與試劑
        1.2.2 腫瘤接種
        1.2.3 藥物干預(yù)
    1.3 測定指標(biāo)
        1.3.1 機(jī)械痛覺閾值測定
        1.3.2 Western blot法測定CXCL13、c-fos蛋白表達(dá)
        1.3.3 RT-PCR法檢測CXCL13 mRNA和c-fosmRNA TrizolmRNA表達(dá)水平
    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 各組小鼠不同時(shí)間點(diǎn)機(jī)械痛閾值比較見表2
    2.2 各組CXCL13、c-fos蛋白表達(dá)及CXCL13 mRNA、c-fos mRNA表達(dá)水平見表3
3 討論

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