失神經(jīng)化骨質(zhì)疏松動物模型的建立與評價
發(fā)布時間:2020-11-01 03:56
目的:通過外科手術(shù)直接干預(yù)來切斷左側(cè)臂叢神經(jīng)致使大白兔左上肢殘疾從而構(gòu)建廢用骨質(zhì)疏松動物模型,探討周圍神經(jīng)損傷或病變對局部骨質(zhì)的影響,為失神經(jīng)化廢用性骨質(zhì)疏松及神經(jīng)生長因子藥物等方面的研究提供良好的實驗載體。方法:選用8月齡雄性新西蘭長耳大白兔24只,隨機分為3組(n=8):取左下頜骨經(jīng)頸向下至胸大肌中部連線中后2/3皮膚切口,顯露胸大肌,分別切斷胸大肌、胸小肌,暴露左鎖骨,仔細(xì)分離鎖骨下組織(必要時可線鋸截斷鎖骨),顯微鏡下解剖分離全臂叢神經(jīng)至神經(jīng)根孔處并緊貼近端根部剪斷,并自神經(jīng)根近端切斷處向遠(yuǎn)端游離約2cm切斷后曠置,構(gòu)建臂叢神經(jīng)根性損傷模型,作為實驗側(cè)。右側(cè)采取同樣的手術(shù)方法暴露全臂叢至神經(jīng)根孔處,但不切斷與損傷臂叢神經(jīng),作為假手術(shù)對照組。圈籠內(nèi)自由放養(yǎng)。分別于術(shù)后4、8、12周三個時間點于雙能X線骨密度儀上檢測雙側(cè)肱骨骨密度后,并于以上三個時間點各處死8只實驗動物,取各組左右兩側(cè)肱骨并測量長度后,予以濃度10%的中性甲醛液固定,將標(biāo)件置于WDW-20萬能電子試驗機上進行力學(xué)三點彎曲試驗,對骨質(zhì)的生物力學(xué)性能進行測定。將各組等長的左右兩側(cè)肱骨標(biāo)件置于精確度為0.0001克的電子天平秤上稱取其干重值。同時取兩側(cè)肱骨近側(cè)干骺端松質(zhì)骨,將假手術(shù)對照側(cè)與手術(shù)側(cè)骨質(zhì)分別進行蘇木精-伊紅染色及馬松三色染色,對各組肱骨干骺端松質(zhì)骨的骨微結(jié)構(gòu)形態(tài)進行對比觀察。結(jié)果:與假手術(shù)對照側(cè)相比,隨著骨質(zhì)失神經(jīng)化營養(yǎng)支配時間的延長,各組實驗側(cè)骨密度及骨干重值進行性減少,具有明顯統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。各組實驗側(cè)最大載荷、彈性模量、彎曲強度、彈性應(yīng)力、彈性應(yīng)變、最大應(yīng)力及最大應(yīng)變值與對照側(cè)相比明顯降低,統(tǒng)計學(xué)差異顯著(P0.05);各組實驗側(cè)組間比較,骨質(zhì)失神經(jīng)化支配時間越長,上述各變量值下降程度越顯著,差異越明顯(P0.05)。各組實驗側(cè)骨小梁厚度、骨小梁數(shù)量、骨小梁間隙、骨小梁連接點數(shù)目、髓腔大小及破骨細(xì)胞數(shù)目與對照側(cè)相比也明顯減少,統(tǒng)計學(xué)差異顯著。馬松三色染色結(jié)果闡明失神經(jīng)化營養(yǎng)支配的肢體隨著其廢用時間增長,被染藍色的新生骨膠原蛋白的數(shù)量明顯減少。結(jié)論:臂叢神經(jīng)切斷術(shù)是建立失神經(jīng)化廢用骨質(zhì)疏松動物模型的有效途徑,隨著骨骼失神經(jīng)化營養(yǎng)支配時間的延長,骨的密度、干重值、骨強度、生物力學(xué)性能及組織形態(tài)結(jié)構(gòu)均發(fā)生了不同程度的病理改變,成骨生成與骨吸收的動態(tài)平衡機制發(fā)生紊亂,骨再生速度、骨數(shù)量及質(zhì)量急劇下降,導(dǎo)致骨骼脆性及骨折發(fā)生的概率明顯上升。
【學(xué)位單位】:桂林醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位年份】:2018
【中圖分類】:R-332;R580
【部分圖文】:
并自神經(jīng)根近端切斷處向遠(yuǎn)端游離約 2cm 切斷后曠置,按剖層次依次縫合術(shù)口,進而建立大白兔左側(cè)臂叢神經(jīng)根性損傷模型(見 1)作為實驗側(cè)。右側(cè)采取同樣的手術(shù)方法暴露全臂叢至神經(jīng)根孔處,但切斷與損傷臂叢神經(jīng),作為假手術(shù)對照組。為預(yù)防縫合口感染,術(shù)前半時給予各組 80 萬 U 注射用青霉素鈉肌肉注射,術(shù)后 24 小時內(nèi)可追加肌一次,同時視傷口滲液情況,每日予以術(shù)口換藥 1-2 次。根據(jù)術(shù)后第 4w、w、12w 三個不同的時間點隨機將 24 只新西蘭長耳白兔分為 3 組(每 8 只組)。然后繼續(xù)圈籠內(nèi)繼續(xù)放養(yǎng),任其自由活動。
12W-20 型天辰電子萬能力學(xué)試驗機(由桂林理工大學(xué)實(Bone Mineral Density,BMD)測定 線骨密度儀(法國 MEDILINK 公司)測骨密度值,檢測時先縱向掃描,顯示肱 3.0 和 12.0mm 處作斷層測定[4]。計算指測定
圖 3. 術(shù)后第 4、8、12 周各組兔肱骨骨密度變化值比較干重值個不同時間點測定兔肱骨全長骨骼干重結(jié)果表明(見較,左側(cè)實驗側(cè)肱骨干重值比右側(cè)假手術(shù)對照組,有明顯統(tǒng)計學(xué)差異,且下降程度隨肢體廢用時間的延驗側(cè)組間值相比較,肱骨失神經(jīng)化支配時間越長,骨骼著,有明顯差異(P<0.05);同時假手術(shù)對照組各組間差異較小,無明顯統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。組 別 n 肱骨骨干重(g)W 對照組8 6.7017±1.4261
【參考文獻】
本文編號:2864998
【學(xué)位單位】:桂林醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位年份】:2018
【中圖分類】:R-332;R580
【部分圖文】:
并自神經(jīng)根近端切斷處向遠(yuǎn)端游離約 2cm 切斷后曠置,按剖層次依次縫合術(shù)口,進而建立大白兔左側(cè)臂叢神經(jīng)根性損傷模型(見 1)作為實驗側(cè)。右側(cè)采取同樣的手術(shù)方法暴露全臂叢至神經(jīng)根孔處,但切斷與損傷臂叢神經(jīng),作為假手術(shù)對照組。為預(yù)防縫合口感染,術(shù)前半時給予各組 80 萬 U 注射用青霉素鈉肌肉注射,術(shù)后 24 小時內(nèi)可追加肌一次,同時視傷口滲液情況,每日予以術(shù)口換藥 1-2 次。根據(jù)術(shù)后第 4w、w、12w 三個不同的時間點隨機將 24 只新西蘭長耳白兔分為 3 組(每 8 只組)。然后繼續(xù)圈籠內(nèi)繼續(xù)放養(yǎng),任其自由活動。
12W-20 型天辰電子萬能力學(xué)試驗機(由桂林理工大學(xué)實(Bone Mineral Density,BMD)測定 線骨密度儀(法國 MEDILINK 公司)測骨密度值,檢測時先縱向掃描,顯示肱 3.0 和 12.0mm 處作斷層測定[4]。計算指測定
圖 3. 術(shù)后第 4、8、12 周各組兔肱骨骨密度變化值比較干重值個不同時間點測定兔肱骨全長骨骼干重結(jié)果表明(見較,左側(cè)實驗側(cè)肱骨干重值比右側(cè)假手術(shù)對照組,有明顯統(tǒng)計學(xué)差異,且下降程度隨肢體廢用時間的延驗側(cè)組間值相比較,肱骨失神經(jīng)化支配時間越長,骨骼著,有明顯差異(P<0.05);同時假手術(shù)對照組各組間差異較小,無明顯統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。組 別 n 肱骨骨干重(g)W 對照組8 6.7017±1.4261
【參考文獻】
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1 徐曉杰;李梅;;廢用性骨質(zhì)疏松癥診治進展[J];中華骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病雜志;2015年01期
2 張戈,秦嶺,VWY Hong,鄭昱新,Betty Au,石印玉,梁秉中;成年卵巢切除大鼠模型股骨近端pQCT與DEXA的相關(guān)分析[J];中國骨質(zhì)疏松雜志;2002年02期
本文編號:2864998
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