目的 探討腺病毒負(fù)載SOCS1siRNA和IL-12基因共同修飾人喉癌細(xì)胞（Hep-2）抗原致敏的樹突狀細(xì)胞（DC）在體外誘導(dǎo)﹑激活T淋巴細(xì)胞使成為細(xì)胞毒性T細(xì)胞（CTL）的免疫殺傷Hep-2的效能及相關(guān)免疫機(jī)制。 方法 用重組腺病毒（Ad）負(fù)載SOCS1siRNA基因和重組腺病毒負(fù)載IL-12基因修飾人外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)來源的樹突狀細(xì)胞（DC）；反復(fù)凍融法提取Hep-2粗提抗原（TAA）致敏的基因修飾的DC；倒置熒光顯微鏡觀察熒光轉(zhuǎn)染率；Western blot檢測(cè)腺病毒轉(zhuǎn)染的SOCS1和IL-12蛋白表達(dá)情況；ELISA法檢測(cè)各組DC及CTL分泌IL-12和IFN-γ的水平；MTT法檢測(cè)DC刺激同源T淋巴細(xì)胞增殖能力及CTL免疫殺傷Hep-2的效能；統(tǒng)計(jì)學(xué)分析各組間的差異。 結(jié)果 DC在體外由細(xì)胞因子誘導(dǎo)培養(yǎng)成功，具有典型的樹突狀細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特征。倒置熒光顯微鏡下見Ad-GFP轉(zhuǎn)染可見熒光表達(dá)率在90％以上；流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果證實(shí)其表型CD80，CD86表達(dá)率在40％左右，符合文獻(xiàn)報(bào)道；經(jīng)SOCS1siRNA和IL-12基因共同修飾能有效的下調(diào)DC中SOCS1蛋白的表達(dá)和上調(diào)IL-12蛋白的表達(dá)，各組比較均有差異；IL-12因子的分泌率也明顯高于SOCS1siRNA或IL-12的單基因轉(zhuǎn)染；并促使T細(xì)胞顯著增殖、活化。DC和CTL持續(xù)高分泌IFN-γ，增強(qiáng)了對(duì)Hep-2的特異性細(xì)胞免疫反應(yīng)。 結(jié)論 （1） SOCS1siRNA和IL-12基因共同修飾喉癌抗原致敏的DC分泌的IL-12和IFN-γ的能力增強(qiáng)。 （2） SOCS1siRNA和IL-12基因共同修飾喉癌抗原致敏的DC與T細(xì)胞混合反應(yīng)能有效的促進(jìn)T細(xì)胞增殖，促進(jìn)其分泌IFN-γ,IL-12從而誘導(dǎo)CTL更強(qiáng)的特異性殺傷喉癌細(xì)胞的能力。
【學(xué)位單位】：遼寧醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2012
【中圖分類】：R392
【文章目錄】：
中文論著摘要
英文論著摘要
英文縮略語(yǔ)表
前言
實(shí)驗(yàn)材料與方法
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
討論
結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)
參考文獻(xiàn)
附錄
    綜述
        參考文獻(xiàn)
    在學(xué)期間科研成績(jī)
    致謝
    個(gè)人簡(jiǎn)歷

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 ;Bone marrow-derived dendritic cells pulsed with tumor lysates induce anti-tumor immunity against gastric cancer ex vivo[J];World Journal of Gastroenterology;2008年46期

本文編號(hào)：2863761