目的探討糞腸球菌ace基因在細菌生物被膜形成中的作用。方法將糞腸球菌野生株U8-ace~-、空質粒對照株EU8-ace~-、轉化株ZU8-ace~+接種至96孔細胞板,分別于37℃及46℃培養(yǎng)6 h,測定OD_(595),比較糞腸球菌ace基因陽性、陰性菌株在不同溫度下的早期黏附能力;將U8-ace~-,EU8-ace~-,ZU8-ace~+接種到96孔板,46℃培養(yǎng)3,6,12,24,36及48 h,結晶紫染色,測定OD_(570)微量滴定板法比較糞腸球菌ace基因野生株、空質粒對照株、轉化株的生物被膜形成能力;將U8-ace~-,EU8-ace~-,ZU8-ace~+在含蓋玻片的細胞培養(yǎng)皿內4 6℃培養(yǎng)6～72 h,激光共聚焦掃描顯微鏡(CLSM)觀察比較ace~+,ace~-腸球菌生物被膜的平均厚度、密度、活菌比例。結果轉化株ZU8-ace~+于46℃培養(yǎng)的早期黏附OD_(595)值高于37℃培養(yǎng)的OD_(595)值,差別有統(tǒng)計學意義(P0.01)。糞腸球菌U8-ace~-,EU8-ace~-37℃培養(yǎng)的早期黏附OD_(595)與46℃培養(yǎng)的值比較,差別無統(tǒng)計學意義(P0.05);微量滴定板法顯示不同時間點ace基因轉化株的OD_(570)值均大于野生株的OD_(570)值;轉化株與野生株生物被膜形成能力OD_(570)比較,差別有統(tǒng)計學意義(P0.01);空質粒對照株與野生株比較,差別無統(tǒng)計學意義(P0.05);CLSM觀察不同培養(yǎng)時間點生物被膜的平均厚度、細菌的密度以及活菌比例,ace~+糞腸球菌的值均高于ace~-糞腸球菌,ZU8-ace~+與U8-ace~-比較,差別有統(tǒng)計學意義(P0.01);EU8-ace~-與U8～ace~-比較,差別無統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論糞腸球菌膠原黏附素ace基因或有利于腸球菌生物被膜的形成。
【部分圖文】：

微量滴定板法比較腸球菌野生株U8-ace-、空質粒對照株EU8-ace-、轉化株ZU8-ace+生物被膜形成能力，各菌株的生物被膜形成能力隨培養(yǎng)時間延長而提高，糞腸球菌轉化株ZU8-ace+在各時段的生物膜形成能力均比野生株U8-ace-、空質粒對照株EU8-ace-的強。經單因素方差分析，ZU8-ace+與U8-ace-比較，差別有統(tǒng)計學意義（P<0.01);EU8-ace-與U8-ace-比較，差別無統(tǒng)計學意義（P>0.05，圖1）。2.3 CLSM觀測比較糞腸球菌ace基因陽性、陰性菌株生物被膜情況

在生物被膜形成各階段，糞腸球菌轉化株ZU8-ace+所形成生物膜的平均厚度均高于野生株U8-ace-，經單因素方差分析，ZU8-ace+與U8-ace-比較，差別有統(tǒng)計學意義（P<0.01);EU8-ace-與U8-ace-比較，差別無統(tǒng)計學意義（P>0.05，圖2）。2.3.2 ace+,ace-糞腸球菌生物被膜中層內細菌密度比較

生物膜內層、中間層的細菌密度相對較大，而外層較低。取生物膜中層進行糞腸球菌轉化株ZU8-ace+與野生株U8-ace-生物被膜密度比較，結果表明，糞腸球菌轉化株ZU8-ace+所形成的生物被膜密度比野生株U8-ace-的高，經單因素方差分析，ZU8-ace+與U8-ace-比較，差別有統(tǒng)計學意義（P<0.01);EU8-ace-與U8-ace-比較，差別無統(tǒng)計學意義（P>0.05，圖3）。2.3.3 ace+,ace-糞腸球菌生物被膜內活菌比例比較
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