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毛囊內(nèi)特洛細(xì)胞的鑒定及分選

發(fā)布時間:2020-10-23 16:31
   目的:觀察人頭皮組織中特洛細(xì)胞(TCs)的位置,形態(tài)以及超微結(jié)構(gòu)。培養(yǎng)、分選和鑒定TCs。方法:在這項研究中使用的是人頭皮組織,在最初的實驗中,采用免疫組化結(jié)合透射電鏡技術(shù),觀察人頭皮組織TCs的分布,研究TCs與鄰近細(xì)胞的空間關(guān)系。培養(yǎng)人頭皮組織的細(xì)胞,通過熒光激活細(xì)胞分選純化TCs,最后通過特異性抗體CD34和CD117熒光染色進(jìn)一步證實TCs。結(jié)果:免疫組化染色,發(fā)現(xiàn)人真皮的結(jié)締組織中有許多CD34陽性細(xì)胞。它們集中圍繞在毛囊、血管、汗腺、皮脂腺、血管和脂肪小葉。CD117陽性細(xì)胞主要位于真皮乳頭層或圍繞皮膚附屬器(如毛囊和汗腺和皮脂腺)的結(jié)締組織中。透射電鏡圖像(Transmission Electron Microscope,TEM)觀察到TCs特殊的超微結(jié)構(gòu)進(jìn)一步證實了它的存在。在TEM下,這些細(xì)胞紡錘形,具有小的細(xì)胞體和長的細(xì)胞突起,包圍毛囊隆起區(qū)的干細(xì)胞團(tuán)。熒光激活細(xì)胞分選獲取的TCs進(jìn)行體外培養(yǎng)。這些細(xì)胞表現(xiàn)為紡錘形,具有念珠狀的突起,陽性表達(dá)CD34和C-kit/CD117。結(jié)論:在正常人頭皮組織中檢測到兩個TCs亞群,一種表達(dá)CD34,另一種表達(dá)C-kit/CD117。其圍繞干細(xì)胞,可能參與皮膚的穩(wěn)態(tài),重構(gòu)與再生。背景:丙烯酸/丙烯酰胺聚合物具有良好的光學(xué)性能和生物相容性,是理想的生物材料,已廣泛應(yīng)用于組織工程。Muse細(xì)胞是間充質(zhì)干細(xì)胞的亞型,在再生醫(yī)學(xué)方面有很好的前景。目的:探討不同組成的聚丙烯酸酯聚合物,對從正常人真皮成纖維細(xì)胞獲取的Muse細(xì)胞的粘附、增殖和分化的影響。方法:獲取正常人真皮成纖維細(xì)胞,0.25%胰酶處理16h,甲基纖維素(Methylcellulose,MC)培養(yǎng)基懸浮培養(yǎng),將獲取的擬胚體樣Muse細(xì)胞簇胰酶消化成單個細(xì)胞,將消化好的單個細(xì)胞接種在275種不同的丙烯酸/丙烯酰胺聚合物芯片上。根據(jù)Muse細(xì)胞粘附與生長狀態(tài),篩選出適合它生長的特異性聚合物,并制成二級芯片。觀察Muse細(xì)胞在候選物芯片上的生長,增殖以及分化狀態(tài),進(jìn)一步篩選出最適合其生長的聚合物。結(jié)果:根據(jù)Muse細(xì)胞在一級芯片上的粘附與生長狀態(tài),帥選出10種適合它生長的候選物。其中,Muse細(xì)胞在6種聚合物微點內(nèi)和4種聚合物微點外生長良好。此外,Muse細(xì)胞在3種聚合物微點內(nèi)增殖并分化為類似成纖維細(xì)胞樣的長梭形細(xì)胞;Muse細(xì)胞在1種聚合物微點內(nèi)形成類似戒指征的細(xì)胞簇;在剩下的2種聚合物微點內(nèi)形成的細(xì)胞簇狀態(tài)最佳,環(huán)繞在4種聚合物微點外的Muse細(xì)胞增殖形成細(xì)胞簇并繼續(xù)擴(kuò)增形成新的子代細(xì)胞。結(jié)論:發(fā)現(xiàn)一種能維持Muse細(xì)胞在未分化狀態(tài)下粘附、增殖和干性的理想聚合物。
【學(xué)位單位】:蚌埠醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位年份】:2018
【中圖分類】:R329.2
【部分圖文】:

表皮,同型,同心圓


CD34陽性TCs與鄰近的表皮平行

毛囊,隆突,干細(xì)胞,同型


觸形成同型連接(圖. 4B)。需要注意的是我們在干細(xì)胞豐富的毛囊隆突區(qū)周圍發(fā)現(xiàn)大量的 TCs.它們彼此連接排成同心圓(圖. 6)。圖 1CD34 陽性 TCs 與鄰近的表皮平行 (100×)

排泄管,根鞘,毛囊,表皮


在汗腺的分泌小管和起始排泄管周
【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 劉茜;材料調(diào)控脂肪干細(xì)胞命運(yùn)及其血管生成活性的研究[D];清華大學(xué);2012年



本文編號:2853271

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