發(fā)布時(shí)間：2020-10-21 05:02

　　 目的探討跨膜蛋白16A(TMEM 16A)在功能性便秘小鼠結(jié)腸中的表達(dá)情況及其相關(guān)調(diào)控機(jī)制。方法取20只C57BL/6小鼠,分為構(gòu)建功能性便秘模型小鼠(實(shí)驗(yàn)組)和正常小鼠(對(duì)照組),兩組各10只。采用生物機(jī)能測(cè)定儀對(duì)兩組小鼠結(jié)腸肌電改變進(jìn)行檢測(cè),并分別采用免疫印跡法和實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測(cè)兩組小鼠結(jié)腸中TMEM 16A、鈣離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶B2(ATP2B2)蛋白和基因表達(dá)情況。結(jié)果肌電生理檢測(cè)發(fā)現(xiàn),實(shí)驗(yàn)組小鼠結(jié)腸平滑肌的肌電慢波頻率較對(duì)照組明顯下降(5. 36±1. 17次/min vs. 10. 75±2. 24次/min),慢波振幅較對(duì)照組明顯升高(105. 76±9. 43 V vs. 66. 90±5. 64 V)(P 0. 01)。免疫印跡法檢測(cè)發(fā)現(xiàn),實(shí)驗(yàn)組小鼠TMEM 16A蛋白表達(dá)水平較對(duì)照組明顯降低(0. 35±0. 09 vs. 1. 03±0. 15),ATP2B2蛋白表達(dá)水平較對(duì)照組明顯升高(1. 41±0. 18 vs. 0. 99±0. 11)(P 0. 01)。實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測(cè)發(fā)現(xiàn),實(shí)驗(yàn)組小鼠TMEM 16A基因相對(duì)表達(dá)量較對(duì)照組明顯降低(0. 46±0. 06 vs. 1. 00±0. 13),ATP2B2基因相對(duì)表達(dá)量較對(duì)照組明顯升高(1. 51±0. 17 vs. 1. 01±0. 09)(P 0. 01)。結(jié)論TMEM 16A表達(dá)下調(diào)可能與功能性便秘小鼠結(jié)腸收縮功能減弱有關(guān),TMEM 16A可能通過(guò)調(diào)節(jié)ATP2B2表達(dá)而起到調(diào)控功能性便秘小鼠發(fā)病機(jī)制的作用,提示TMEM 16A有望成為治療功能性便秘的潛在靶點(diǎn)。
【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    1.2 主要材料來(lái)源
    1.3 方法
        1.3.1 動(dòng)物模型的構(gòu)建
        1.3.2 肌電生理檢測(cè)
        1.3.3蛋白表達(dá)的檢測(cè)
        1.3.4 基因表達(dá)的檢測(cè)
    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 兩組小鼠結(jié)腸肌電生理檢測(cè)結(jié)果的比較
    2.2 兩組小鼠TMEM 16A和ATP2B2蛋白表達(dá)水平的比較
    2.3 兩組小鼠TMEM 16A和ATP2B2基因相對(duì)表達(dá)量的比較
3 討論
4 結(jié)論

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