目的觀察肝組織切片室溫條件下存放不同時(shí)間,組織細(xì)胞抗原變化。方法復(fù)制大鼠肝纖維化模型,30%CCl_4橄欖油溶液2 mL·kg~(-1)皮下注射,每周2次,共計(jì)6周;第7周開始加10 mg·kg~(-1)·d~(-1) 2-AAF灌胃3周,9周末處死大鼠。大鼠肝組織連續(xù)切片12張,分成3組(分別用于HE、天狼猩紅膠原與免疫組化染色),每組4張(用于0、24、48、96周共4個(gè)不同時(shí)間點(diǎn))。切片于常溫空氣中分別放置0、24、48、96周時(shí)浸蠟封片,96周時(shí)全部切片脫蠟至水進(jìn)行HE染色、天狼猩紅膠原染色及細(xì)胞膜蛋白抗原CK7、細(xì)胞漿蛋白抗原SHH與細(xì)胞核蛋白抗原HNF 4α免疫組化染色,觀察肝組織炎癥情況及Image-Pro Plus 6.1軟件分析膠原面積與不同部位組織細(xì)胞抗原變化。結(jié)果組織切片室溫放置0～96周肝臟炎癥無明顯改變;隨著放置時(shí)間從0周延長至96周,膠原面積逐漸減少,96周時(shí)顯著減少為0周的64.54%～74.44%(P0. 05)。免疫組化染色顯示,0周CK7陽染面積為12.70%±0.90%;隨著放置時(shí)間延長,CK7陽染色面積逐漸減少,24、48與96周時(shí)CK7陽染面積分別為0周的71.02%、47.01%與35.16%(P0.05);0周SHH陽染面積為45.44%±6.11%,隨著放置時(shí)間延長,24、48與96周時(shí)SHH陽染面積分別占0周的49.38%、26.32%與20.77%(P0.01);0周HNF4α陽染面積為9.38%±0.62%;隨著放置時(shí)間延長,24、48與96周時(shí)HNF4α陽染面積分別占0周的47.76%、14.50%與11.41%(P0. 05)。結(jié)論肝組織切片室溫條件下不同保存時(shí)間的細(xì)胞膜、細(xì)胞漿、細(xì)胞核抗原明顯丟失,切片浸蠟封片能防止組織細(xì)胞抗原丟失。
【文章目錄】：
資料與方法
    一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    二、主要試劑
    三、研究方法
        (一)模型制備
        (二)樣品的采集和處理
        (三)肝組織石蠟切片保存
        (四)肝組織HE與天狼星紅膠原染色
        (五)肝組織免疫組化染色
    四、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
結(jié) 果
    一、肝組織細(xì)胞膜、細(xì)胞漿與細(xì)胞核抗原表達(dá)變化
    二、肝組織炎癥和膠原沉積變化
討 論

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本文編號(hào)：2842834